鲁建飞
- 作品数：14 被引量：16H指数：2
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 基于RNA-Seq技术鉴定鲤疱疹病毒II型编码的功能miRNA及miR-C12调控细胞凋亡研究
- 1. 异育银鲫尾鳍细胞系的建立及其对CyHV-2的敏感性研究 本实验中，我们建立了异育银鲫尾鳍细胞系，命名为GiCF。原代培养的GiCF细胞形态多样，主要呈上皮样细胞和纤维样细胞的特点，稳定传代后细胞呈纤维样细胞的特点...
- 鲁建飞
- 关键词：细胞凋亡
- 草鱼呼肠孤病毒S11基因shRNA干扰载体的构建及效果评价
- 利用生物学软件分析GCRV S11基因,设计针对S11基因不同位置的小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰序列,并将这些序列片段克隆到干扰载体pG p U6中,构建出4个shRNA干扰载体pG...
- 鲁建飞吕利群
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒SHRNA
- 文献传递
- 草鱼呼肠孤病毒S7基因突变株及其应用
- 本发明涉及一种草鱼呼肠孤病毒S7基因突变株及其应用，该突变株的保藏号为CCTCC NO：V201515。研究发现该突变株感染CIK细胞后不产生明显的细胞病变效应，并能在CIK细胞中复制扩增，序列分析表明该突变株相比于GC...
- 王浩吕利群宗乾坤许丹喻飞鲁建飞夏思瑶
- 文献传递
- 一株Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及属于生物技术领域，特别涉及一株Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的单克隆抗体及其应用。本发明成功克隆了PGEX‑4T‑3‑ORF92质粒，筛选出一株抗Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF92蛋白的细胞株CyHV‑2‑ORF92‑1B...
- 吕利群沈兆媛姜有声鲁建飞许丹
- 草鱼呼肠孤病毒NS26蛋白与LITAF相互作用的研究
- NS26蛋白是水生呼肠孤病毒特有的蛋白质,在其他呼肠孤病毒中没有同源蛋白。前期研究表明NS26与草鱼Lipopolysaccharide-induced TNF-αfactor(LITAF)在酵母系统中存在相互作用。本研...
- 鲁建飞吕利群
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒相互作用
- 文献传递
- II型鲤疱疹病毒ORF4的多克隆抗体制备及其组织分布被引量：2
- 2017年
- 【目的】制备II型鲤疱疹病毒(Cy HV-2)ORF4多克隆抗体,利用免疫学方法研究ORF4编码蛋白在病毒感染过程中的组织表达特征。【方法】利用在线软件SMART和BLASTx分析Cy HV-2 ORF4序列,采用PCR技术从Cy HV-2基因组中扩增得到ORF4基因,克隆至表达载体PGEX-4T-3中,将获得的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,表达产物经过SDS-PAGE和Western blot鉴定,再利用亲和层析法纯化出重组蛋白。用纯化的重组ORF4蛋白免疫新西兰兔,收集兔血,分离兔血清获得抗ORF4蛋白的多克隆抗体,再利用Western blot检测抗体与ORF4蛋白之间的特异性。提取攻毒后的异育银鲫肌肉、脑、鳃、脾脏、肝胰脏、心脏、肾脏等组织DNA,用荧光定量PCR技术监测其病毒在各组织的复制水平。使用RIPA裂解液提取上述各组织总蛋白,再利用Western blot技术检测ORF4在感染Cy HV-2的异育银鲫各组织中的表达情况。【结果】原核表达的重组ORF4蛋白分子量为65 k D,与预期大小一致;获得的ORF4抗血清能特异性识别重组ORF4蛋白。病毒感染的异育银鲫体内ORF4主要表达在肾脏、脾脏和鳃上;荧光定量PCR证明Cy HV-2主要在肾脏、脾脏和鳃上富集。【结论】Cy HV-2的非结构蛋白ORF4可能参与病毒的复制,是病毒复制感染周期的特征性指示蛋白之一,这为深入研究ORF4在Cy HV-2感染过程中的作用机制提供参考。
- 晏文岩鲁建飞孔善云沈兆媛杨雨清吕利群许丹
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 中草药饲料添加剂对异育银鲫感染Ⅱ型鲤疱疹病毒的影响被引量：9
- 2018年
- 分别用添加1%穿心莲、黄芪、板蓝根、大黄4种中草药的定制饲料投喂异育银鲫,而后腹腔注射1mL定量为1.08×10~7个/mL的Ⅱ型鲤疱疹病毒,研究这4种中草药对异育银鲫感染Ⅱ型鲤疱疹病毒的影响。人工感染后采用实时荧光定量PCR的方法测定血液中的Ⅱ型鲤疱疹病毒滴度。试验结果显示,对照攻毒组鱼体临床症状为胸腹部体表大面积充血,鳃部暗红出血,脾脏肿大、内脏出血等体征,为典型的Ⅱ型鲤疱疹病毒发病症状,且用PCR方法能检测出Ⅱ型鲤疱疹病毒基因组片段。投喂含穿心莲、板蓝根、黄芪、大黄的定制饲料,异育银鲫死亡率分别为15%、30%、35%、95%,对照组死亡率为100%。对照组血液中的病毒滴度高于穿心莲、板蓝根、黄芪,大黄与对照组病毒滴度差别较小。研究结果表明,大黄定制饲料抗Ⅱ型鲤疱疹病毒效果相对较差,黄芪与板蓝根抗病毒效果稍强,穿心莲具有较好的抗Ⅱ型鲤疱疹病毒效果,或可作为抗Ⅱ型鲤疱疹病毒的抗病毒饲料产品用于疾病防控。本研究结果为利用中草药药饵防治异育银鲫感染Ⅱ型鲤疱疹病毒提供了一定的理论依据。
- 沈兆媛鲁建飞许丹吕利群
- 关键词：中草药死亡率异育银鲫
- 一种异育银鲫尾鳍细胞系的构建方法及其应用
- 本发明公开了一种异育银鲫尾鳍细胞系的构建方法及其应用，包括：将健康异育银鲫尾鳍的尾鳍剪下，用75％的酒精消毒处理后剪成大小为1‑2mm<Sup>3</Sup>的组织块，均匀移植到培养瓶并将培养瓶翻转，置于25℃的恒温培养...
- 鲁建飞吕利群许丹费越越王浩姜有声
- 文献传递
- 草鱼呼肠孤病毒NS26蛋白与宿主细胞相互作用的研究
- NS26 是水生呼肠孤病毒特有的蛋白质，在其他呼肠孤病毒中没有同源蛋白。为了研究NS26 在病毒侵染宿主过程的分子生物学机制，本研究采用酵母双杂交技术筛选与NS26 相互作用的蛋白，并进一步探讨筛选出的蛋白质与NS26 ...
- 鲁建飞王浩张娅楠吕利群
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒相互作用
- Ⅱ型鲤疱疹病毒在3种原代细胞上的培养特性比较
- 为研究Ⅱ型鲤疱疹病毒(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)体外感染复制特征,分别制备异育银鲫的背鳍细胞、肾脏细胞、卵巢细胞3种原代细胞。在此基础上,用原代细胞分别接种Ⅱ型鲤疱疹病毒,并通过实时定量...
- 鲁建飞许丹吕利群
- 关键词：异育银鲫原代细胞培养RT-QPCR
- 文献传递
