李佛生
- 作品数：12 被引量：14H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新世纪高等教育教学改革工程更多>>
- 相关领域：生物学文化科学农业科学医药卫生更多>>
- 不同抗生素对金发草愈伤组织生长分化的影响被引量：3
- 2016年
- 该研究以金发草愈伤组织为材料,通过分析比较不同抗生素种类(卡那霉素、潮霉素、头孢噻呋钠和氨苄青霉素)和浓度对金发草愈伤组织生长分化的影响,来确定适用于金发草遗传转化体系中的抗性筛选剂和抑菌剂。结果表明:(1)金发草愈伤组织对卡那霉素很敏感,且其分化率随着卡那霉素浓度的增加显著减少(P=0.01)。当卡那霉素浓度为10 mg·L^(-1)时,金发草愈伤组织的生长分化受到明显抑制,且有大量的白化苗形成,但分化率仍有36.56%;当卡那霉素浓度为15 mg·L^(-1)时,金发草愈伤组织的分化率为11.94%,只有很少部分的愈伤分化出绿色的丛生苗;当卡那霉素浓度为20 mg·L^(-1)时,金发草愈伤组织基本褐化死亡,分化率仅为2.26%。因此,浓度为15 mg·L^(-1)的卡那霉素适合作为金发草遗传转化体系中的抗性筛选剂。(2)金发草愈伤组织对潮霉素的敏感性要比卡那霉素弱,且潮霉素对金发草愈伤组织分化率的影响小,但毒害作用大。因此,潮霉素不适合作为金发草遗传转化体系中的抗性筛选剂。(3)300 mg·L^(-1)的头孢霉素和氨苄青霉素对金发草愈伤组织生长分化影响很小且能有效抑制杂菌的生长,较高浓度的氨苄青霉素对金发草愈伤组织的抑制作用不太明显。因此,300 mg·L^(-1)的头孢霉素和较高浓度的氨苄青霉素均可作为金发草遗传转化体系中的抑菌剂。该研究确定了适用于农杆菌介导的金发草遗传转化体系中的抗性筛选剂和抑菌剂,为金发草的遗传改良及功能性基因的研究奠定了基础。
- 耿天龙李佛生于敏罗枫雪唐琳王胜华
- 关键词：金发草愈伤组织抗生素抑菌剂
- 辐照杀虫和灭菌虚拟仿真实验教学项目建设
- 2022年
- 为了解决学生在辐照处理实践环节中实验操作和实践内容缺失的问题,开发了工业化辐照杀虫和灭菌虚拟仿真实验。该实验包括辐照杀虫和灭菌的原理、电子束辐照和钴60-γ射线虚拟实验操作、辐照处理效果分析和线上答题等模块,可以实现实验内容的在线操作、自主学习、在线考核。同时在线提供的教学引导视频可供学生在没有VR设备的情况下使用,最大程度实现教学资源的共享。通过运用unity-3D信息技术和VR虚拟现实技术的交互,突破了传统实验中高危设备和高危实验环境的限制,提高了实验教学过程的便捷性,拓展了教学空间,获得了良好的实验效果,并建立了虚实结合、线上线下相统一的微生物实验课程教学。
- 阎臻李佛生冯甦杨鑫张杰赵建
- 关键词：电子束辐照
- 水稻OsHAK26启动子的克隆及瞬时表达分析被引量：1
- 2017年
- 对水稻KT/HAK/KUP钾离子转运蛋白家族OsHAK26起始密码子上游2 064bp序列进行分析,发现该序列除了具备TATA-Box、CAAT-Box等基本启动子元件外,还含有许多发育、激素、非生物胁迫等响应元件以及KT/HAK/KUP家族启动子普遍存在的元件。用该片段及5'端缺失的-1 473bp、-963bp、-441bp、-193bp四个片段分别取代植物瞬时表达载体pBI-221的CaMV35S启动子区域,并利用拟南芥叶肉原生质体进行瞬时表达分析。结果表明,这五种片段都具有一定的启动活性,随着长度减小,活性下降,但缺失-963bp^-441bp之间的片段却导致活性显著回升,推断该区段含有抑制元件,缺失-441bp^-193bp之间的片段导致活性大幅下降,推断-441bp^-193bp为OsHAK26基因启动子的核心启动区域。
- 罗枫雪李佛生姚民徐莺
- 关键词：水稻启动子缺失突变
- 利用果胶产油脂酵母菌筛选及果胶降解酶膜反应器构建的研究
- 2022年
- 该文通过采集不同生境的土样,筛选得到了能利用果胶生物质或其产物产油脂的两株酵母菌2S-6和HN-3B,对应油脂含量分别为51.44%和64.66%,其中菌株2S-6通过分子鉴定为奥默柯达菌,且该菌还具有优良的分解果胶能力,表明其具有较强活性的果胶酶,可用于果胶降解酶膜反应器的构建。因此,通过基因工程技术,获得其大量非糖基化多聚半乳糖醛酸酶之后,在1.25%戊二醛交联处理2.55 h的最佳条件下,将其固定于静电纺丝壳聚糖纳米纤维膜上制得了酶膜反应器,并将果胶水解为半乳糖醛酸单体,转化率可达到63.96%。这为实现果胶生物质废料的资源化利用和减少环境污染奠定基础。
- 房勇廷陈晶珍肖彦姿武文杰杨轶凡徐辉汪红李佛生
- 关键词：果胶酵母菌酶膜反应器微生物油脂资源化利用
- 水稻miR446及其靶基因APP1在非生物胁迫中的功能研究被引量：1
- 2016年
- 根据基因芯片的数据筛选出Osa—miR446及靶基因作为研究对象．生物信息学分析表明，Osa—miR446有4个候选靶基因，通过RACE技术对这些候选靶基因进行鉴定，发现只有LOC—Os03g56930．1（APP1基因）可得到理想的剪切条带，测序后比对可知该剪切位点位于APP1基因的内含子区域（第1036-1037个碱基）．随后，通过克隆获得APP1基因，信息学分析可知该基因开放阅读框长度为711bp，是一个编码237个氨基酸的新的未定性的疏水性蛋白质．Southern杂交结果显示APP1在水稻基因组中为单拷贝基因．利用荧光定量PCR分析了Osa—miR446及其靶基因APP1在非生物胁迫中的表达模式，结果表明Osa-miR446与APP1基因的表达均呈负相关，说明Osa—miR446确实可通过剪切APP1基因的转录产物来对非生物胁迫应答．
- 廖雪洪艾涛波李锐李佛生陈放
- 关键词：水稻靶基因胁迫
- 异源表达AtCYSa基因烟草的耐盐和抗虫特性分析
- 2018年
- 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂在植物防御生物与非生物胁迫过程中发挥着重要的作用。拟南芥中的半胱氨酸蛋白酶抑制剂AtCYSa基因的表达能够受到多种胁迫的诱导,且在拟南芥中过量表达AtCYSa基因可以增强转基因拟南芥抵御盐、干旱和氧化等非生物胁迫的能力。为了进一步探究AtCYSa基因的功能以及在烟草中的应用,构建了植物表达载体pCAMBIA 1302-AtCYSa。通过PCR以及RT-PCR验证共获得4株阳性转基因烟草,选择其中3株转基因烟草进行盐胁迫处理和抗虫活性实验。在盐胁迫处理中,100mmol/L NaCl和200mmol/L NaCl处理组的丙二醛含量显著低于野生型对照组。伊文思蓝染色和细胞相对活性结果表明,转基因烟草的细胞活性比野生型烟草明显偏高。这说明在盐胁迫处理下,AtCYSa基因的表达能够起到保护转基因烟草的作用。抗虫活性研究发现,实验组的幼虫总重均呈明显的下降趋势,且幼虫死亡率显著高于对照组。这些结果表明,AtCYSa基因在烟草中的过量表达能够增强转基因烟草的耐盐以及抗虫的能力。
- 姚民朱淑华李佛生张士彦唐琳
- 关键词：转基因烟草耐盐抗虫
- 厚基础、强综合、促创新的生物学一流本科实践育人体系的构建与实践
- 2023年
- 生物学实践教学在培养具有创新能力的一流本科人才中起着关键作用.该成果依托“拔尖计划”、生物科学国家级一流本科专业和生物学国家级教学团队,以培养具有家国情怀与科学精神的“创新型生物学一流本科人才”为目标,践行实践育人理念,将川大特色“红色文化”和求真务实、批判创新的科学精神融入实践教学,强化学生思想价值引领和使命担当,加强文献阅读与实验设计训练,开设探究式和开放性实验项目以及多学科交叉和创新创业实践模块,改革实践教学学业评价,构建了厚基础、强综合、促创新的生物学一流本科进阶式实践育人体系,有效引导学生主动性、自主性、创新性实践,学生的创新意识与潜力得到了极大激发.
- 林宏辉邹方东王甜李佛生熊莉杨春蕾张大伟王茂林
- 关键词：实践育人体系
- 贯通动物解剖与厌氧微生物培养的实验教学改革被引量：1
- 2020年
- 以本科动物生物学实验与微生物学实验教学为基础,利用两门课程在课程内容衔接、课时安排和实验材料利用上的连续性和时序性,将两门课程的部分实验内容进行有机整合,形成跨课程的综合性实验教学内容。通过这种整合,可以在以往独立实验操作训练的基础上,进一步系统地训练学生动物形态解剖与分类、无菌操作、厌氧菌培养及动物肠道微生物结构认知等。通过训练学生实验操作与贯穿实验内容,培养学生实验设计能力、实验操作能力、理论知识综合运用能力和创新能力,引导学生设计大学生创新创业项目并组织申请,达到有效提高实验教学效果并激发学生科研兴趣的培养目的。
- 李佛生晏仕英赵淼淼周洁熊莉汪红赵建
- 关键词：微生物学实验
- 水稻miRNA3026启动子及硫氧还蛋白基因OsTxnDC9的克隆与分析被引量：2
- 2016年
- 硫氧还原蛋白基因OsTxnDC9是水稻miRNA3026的宿主基因。克隆出了水稻miRNA3026启动子,其总长度为1 477bp;构建出4个缺失片段,瞬时表达表明这个启动子为弱启动子。在此基础上克隆出水稻硫氧还原蛋白OsTxnDC9基因,其长度为480bp。生物信息学表明OsTxnDC9基因编码的氨基酸序列与二穗短柄草硫氧还原蛋白基因编码的氨基酸(XP_003573612.1)序列同源性最高。荧光定量PCR发现OsTxnDC9在水稻花粉一核中表达量最高,亚细胞定位表明其主要在细胞质中表达。这为探索miRNA3026启动子和宿主基因的关系奠定了基础。
- 董娟李佛生罗枫雪夏芳朱淑华唐琳
- 关键词：启动子荧光定量
- 牦牛腹泻粪样的细菌分离鉴定与耐药性检测被引量：5
- 2018年
- 对红原县16头牦犊牛分别采集腹泻粪样,用选择性培养基分离,并根据形态特征和16SrRNA基因序列分析鉴定得到了沙门氏菌、大肠杆菌、芽孢杆菌等64株菌株。采用药敏纸片法检测所得菌株对8类、共计9种药敏纸片的耐药性。结果表明:所测菌株对庆大霉素、环丙沙星、复方新诺明、氨曲南较敏感,耐药率为0%～25%;对红霉素和万古霉素耐药率为75%～100%。该实验不仅为抗生素类药物治疗牦牛腹泻问题提供参考,还有助于研究型创新人才培养,也为今后开设综合创新实验教学奠定了基础。
- 李佛生胡舒昶谢鑫李一璠汪杭冯兰杨鑫
- 关键词：牦牛致病菌耐药性检测
