张高林
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
- 供职机构：兰州大学基础医学院更多>>
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- 镰形棘豆提取物对人肾小管上皮细胞转分化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:本实验通过观察镰形棘豆提取物含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的作用,探讨其在肾间质纤维化方面的作用及机制。方法:采用镰形棘豆提取物(300mg/kg)给大鼠灌胃,每天2次,连续3天。3天后大鼠股动脉采血,分离血清,即得镰形棘豆提取物含药血清。体外培养HK-2细胞,培养基为含10%胎牛血清的DMEM/F12(1:1);细胞分为4组:空白对照组、空白血清对照组(TGF-β1 10 ng/ml+10%空白血清)、镰形棘豆提取物组(TGF-β1 10 ng/ml+10%镰形棘豆提取物含药血清)、转化生长因子-β1诱导组(TGF-β1 10 ng/ml)。药物干预细胞后,采用免疫组化技术测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,ELISA技术测Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和纤连蛋白(FN)的含量,荧光定量PCR检测转化生长因子-β受体I(TβRI)、受体II(TβRII)的mRNA表达,Western blot检测Smad 2、smad 3的蛋白表达。结果:正常的HK-2细胞只表达E-cadherin,不表达α-SMA。但经TGF-β1诱导后细胞转分化,E-cadherin的表达开始减弱,α-SMA表达逐渐增强,药物干预后,α-SMA表达明显减弱,E-cadherin表达增强。与空白对照组相比,TGF-β1诱导组ColⅠ、ColⅢ、FN的含量显著增加,在24h时分别为(197.4±0.7)、(32.7±0.2)、(754.5±4.1),72h时分别为(216.4±0.8)、(38.3±0.1)(995.4±1.5),P﹤0.05;与TGF-β1诱导组相比,镰形棘豆提取物组ColⅠ、ColⅢ、FN的分泌显著下降,72h时作用更为显著,含量分别为(205.5±0.7)、(35.0±0.3)、(892.4±0.9),P﹤0.05。与空白对照组相比,TGF-β1诱导组TβRI(11.08±0.10)、TβRII(11.57±0.12)的mRNA表达和Smad 2(0.971±0.017)、smad 3(0.972±0.011)的蛋白表达显著上升,P﹤0.05;与TGF-β1诱导组相比,镰形棘豆提取物组TβRI(9.788±0.379)、TβRII(8.452±0.250)mRNA表达和Smad 2(0.536±0.013)、Smad3(0.530±0.035)蛋白表达也减少,P﹤0.05。空白血清则无此作用。结论:镰形棘豆提取�
- 李钦杨丽霞程卫东姜华李晓东张高林
- 关键词：转化生长因子-Β1人肾小管上皮细胞转分化
- 含红芪、黄芪的益气养血汤对SAMP8小鼠免疫衰老及p38MAPK表达的影响被引量：9
- 2016年
- 目的:比较含红芪和含黄芪的益气养血汤对快速老化小鼠P8(SAMP8)小鼠免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:取昆明种青龄小鼠10只为青龄鼠组,SAMP8小鼠40只随机分为4组,分别为胸腺肽组、生理盐水组、益气养血红芪组和益气养血黄芪组。分别以生理盐水,胸腺肽每日4.6 mg·kg-1,含红芪、黄芪的益气养血汤每日6 g·kg-1剂量ig小鼠,每日1次,连续ig 15次,末次ig后2 h眼球摘除取血及脾脏。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其血清白细胞介素-2(IL-2),γ干扰素(IFN-γ)含量,流式细胞术检测脾脏淋巴细胞表面CD3,CD4,CD8,CD28及CD152分子的表达情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测p38 MAPK mRNA的表达情况,蛋白质免疫印迹(Western blot)及免疫组化法检测其p38MAPK蛋白表达。结果:与青龄小鼠比较,生理盐水组SAMP8小鼠IL-2,IFN-γ含量降低,CD8,CD28分子表达降低,CD4分子表达及CD28CD152分子双阳性表达增高,p38 MAPK mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。与生理盐水组比较,胸腺肽组及中药组均能提高SAMP8小鼠血清中IL-2,IFN-γ含量,胸腺肽组含量高于中药组,红芪组IL-2含量高于黄芪组;胸腺肽组及中药组均能提高CD28分子表达,降低CD28CD152双阳性分子表达,胸腺肽组及黄芪组双阳性表达率低于红芪组;中药组能提高SAMP8小鼠脾淋巴细胞表面CD8分子表达,且黄芪组CD8表达高于红芪组;胸腺肽组及黄芪组能降低CD4分子表达;胸腺肽组及中药组均能提高p38 MAPK mRNA表达,且胸腺肽组mRNA表达高于中药组,黄芪组高于红芪组;胸腺肽组及中药组均能提高p38MAPK蛋白含量及蛋白阳性率,且胸腺肽组优于中药组(P<0.05)。结论:含红芪、黄芪的益气养血汤均能改善SAMP8小鼠的免疫衰老现象,增加p38MAPK的表达。
- 李纬程卫东张文君徐静汶张高林
- 关键词：益气养血汤红芪SAMP8小鼠P38免疫衰老
- 红芪替换玉屏风散中黄芪对SAMP8小鼠抗免疫老化作用的比较被引量：13
- 2016年
- 目的比较研究含红芪和黄芪玉屏风散对快速老化小鼠8(SAMP8)抗免疫衰老作用。方法通过MTT法确定最佳含药血清质量分数和作用时间,并检测最佳含药血清对T淋巴细胞增殖能力的影响。流式细胞术检测含药血清对T淋细胞亚群分化的影响。ELISA法检测培养上清液中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达。RT-PCR法检测含药血清对T淋巴细胞Pi3k mRNA表达的影响。结果当含药血清质量分数为40%,作用时间为48 h时对SAMP8小鼠的脾淋巴细胞促进增殖的作用最强;含红芪和黄芪的含药血清对SAMP8小鼠T淋巴细胞亚群的分化作用不明显,没有统计学差异;红芪和黄芪含药血清均可增加IL-2、IFN-γ的分泌(P<0.05);红芪和黄芪玉屏风散均可增加Pi3k mRNA的相对表达量,且红芪组明显优于黄芪组(P<0.05)。结论含红芪和黄芪的玉屏风散均有抗免疫老化的作用,且红芪玉屏风散在诱导T淋巴细胞增殖、上调Pi3k mRNA的表达方面作用优于黄芪,所以在抗免疫衰老方面红芪可以替代黄芪。
- 张文君程卫东李纬张高林李钦胡燕
- 关键词：红芪玉屏风散SAMP8小鼠
- 玫参颗粒对去卵巢大鼠血脂代谢的影响
- 2015年
- 目的观察玫参颗粒对去卵巢大鼠血脂代谢的影响。方法将70只Wistar大鼠中60只行切除双侧卵巢手术后随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇片组(雌激素组)、坤宝丸阳性对照组,玫参颗粒高、中、低剂量组。除了假手术组外,其他各组手术后5 d进行阴道涂片,连续5 d,观察到无规律的动情周期则为成模大鼠,每组给予相应的药物灌胃,假手术组和模型组给予蒸馏水。每日1次,连续4周,给药同时每周称量体质量1次。末次灌胃后,麻醉后进行腹主动脉采血测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)。结果与假手术组相比,其余各组大鼠体质量均有增加(P<0.05或P<0.01);玫参颗粒低、中、高剂量组和雌激素组都可以降低因去卵巢而升高的血清TC(P<0.05或P<0.01);模型组大鼠HDL-C含量与假手术组比较均显著降低(P<0.01),玫参颗粒中、高剂量组,雌激素组能明显升高降低的HDL-C含量(P<0.05或P<0.01)。模型组大鼠LDL-C含量与假手术组比较均显著升高(P<0.01),玫参颗粒低、中、高剂量组,雌激素组能明显降低升高的LDL-C含量(P<0.05或P<0.01)。结论玫参颗粒可以纠正因去除卵巢导致的血脂代谢异常,为临床上应用于治疗围绝经后雌激素缺乏相关疾病尤其是脂代谢相关疾病和新药的开发应用提供了实验依据。
- 张高林庞大勇程卫东程卫东张文君
- 关键词：去卵巢大鼠胆固醇高密度脂蛋白低密度脂蛋白
- 红芪多糖对D-半乳糖致衰老小鼠抗免疫衰老作用的研究被引量：9
- 2016年
- 目的:研究红芪多糖(hedysamn polysaccharide,HPS)的抗免疫衰老作用。方法:使用清洁级昆明种小鼠,采取D-半乳糖腹腔注射的方法构建亚急性衰老小鼠模型;分为正常对照组,模型对照组,维生素E组和HPS高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组小鼠连续腹腔注射D-半乳糖(120μg/g);正常对照组灌胃生理盐水,维生素E组灌胃维生素E溶液(50μg/g),HPS高、中、低剂量组依次灌胃200,100,50μg/g HPS水溶液。观察小鼠胸腺和脾脏指数、T淋巴细胞增殖能力、T淋巴细胞亚群的水平,测定小鼠血清IL-2、IFN-γ、IL-4、TNF-α含量。结果:模型对照组小鼠脏器指数、T淋巴细胞增殖能力、T淋巴细胞亚群测定、血清IL-2、IFN-γ、IL-4、TNF-α与正常对照组对比,差别有统计学意义(P<0.01)。与模型对照组对比,HPS高、中、低剂量组的胸腺指数和脾脏指数、T淋巴细胞的增殖能力,CD3+T、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T细胞百分比,CD3+CD28+T细胞均升高;HPS高、中、低剂量组小鼠血清细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4水平升高,TNF-α水平降低。HPS高、中、低剂量组间诸指标对比,高、中剂量作用明显。结论:HPS具有一定的抗免疫衰老作用,可通过调节T淋巴细胞作用来延缓衰老,能有效改善亚急性衰老小鼠的细胞免疫和体液免疫功能。
- 柳春玲寇宁张高林李磊强庞大勇程卫东
- 关键词：红芪多糖D-半乳糖衰老小鼠
