王斌 作品数:4 被引量:20 H指数:2 供职机构: 河北医科大学第二医院 更多>> 发文基金: 河北省医学科学研究重点课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
镁离子对大鼠雪旺细胞增殖及NGF分泌的影响 被引量:1 2016年 目的观察镁离子对体外培养大鼠雪旺细胞(Schwann cells,SCs)增殖及神经生长因子(nerve growth factor,NGF)分泌的影响。方法选取出生3~5 d SD大鼠,分离双侧坐骨神经行SCs体外培养,用S-100免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度。取对数生长期SCs分别加入含不同浓度Mg Cl2(0、0.5、1、2 mmol/L)和10%FBS的DMEM培养基。分别于第2、4、6、8天,MTT法检测SCs增殖情况,ELISA法检测细胞分泌NGF水平。结果经双30 min差速贴壁法,可以去除大部分成纤维细胞。原代培养的SCs,接种24 h后即可贴壁生长。在培养的第72 h细胞胞体出现并肩平行排列的趋势,第7天可见细胞聚合。经免疫组织化学检测计数,培养6 d后的SCs,其纯度达到91%。各组SCs增殖活力均呈上升趋势(A组上升幅度最大,C组上升幅度最小),各组分泌的NGF水平至第6天达峰值后均下降(A组上升幅度最大,C组上升幅度最小),4组组间、不同时点间、组间·不同时点间交互作用差异有统计学意义(P〈0.05)。结论适宜浓度的Mg Cl2对体外培养大鼠SCs的增殖和分泌功能有促进作用。 李明 宋永周 王斌 童九辉 袁鹤 马维关键词:镁 雪旺细胞 神经生长因子 氯化镁对大鼠坐骨神经断端再生微结构的作用研究 2016年 目的研究氯化镁对大鼠坐骨神经损伤后超微结构修复的作用。方法将90只SD大鼠随机分为氯化镁组(MgCl_2组),神经生长因子组(NGF组),0.9%氯化钠组(NaCl)组,每组30只。制作坐骨神经缺损模型,分别以硅胶管桥接坐骨神经缺损,构成神经再生室。分别将1 mmol/L MgCl_2、NCF、0.9%氯化钠溶液分别注入神经再生室中。于术后4、8、12周处死动物,取出神经再生室中断端再生组织,固定处理后通过光镜观察再生神经纤维数目及再生纤维神经截面积,电镜观察神经再生室中雪旺细胞增殖和发育情况、髓鞘的超微结构。结果 MgCl_2组和NGF组术后4、8、12周再生神经纤维数目和再生神经纤维截面积高于NaCl组,差异有统计学意义(P<0.05),而MgCl_2组与NGF组比较,差异无统计学意义(P<0.05)。MgCl_2组和NGF组新生神经纤维再生数量增多,雪旺细胞增生明显,形态接近正常,髓鞘厚度均匀增加,鞘层分离不明显,神经膜细胞及轴浆有轻度变性,Na Cl组神经纤维再生不明显,髓鞘结构模糊,扭曲,雪旺细胞增生不明显,表型幼稚。结论氯化镁可促进大鼠坐骨神经损伤修复后超微结构的修复。 李明 宋永周 曹舒兴 王斌 童九辉 李秋童 马维关键词:氯化镁 雪旺细胞 神经生长因子 坐骨神经损伤 姜黄素对体外培养软骨细胞氧化应激反应的影响 被引量:14 2016年 目的:研究姜黄素对骨关节炎软骨细胞氧化应激的影响。方法:体外培养骨关节炎患者膝关节软骨细胞和正常关节软骨细胞,并以姜黄素干预,检测培养液一氧化氮(NO)、丙二醛产生量(MDA),检测一氧化氮合成酶(NOS)、超氧化物歧化酶活性(SOD);Real-Time PCR和Western blot法检测细胞Nrf2 m RNA及其蛋白表达水平。采用荧光共聚焦显微镜观察Nrf2的核转位情况,分析姜黄素对炎症损伤细胞的干预作用。结果:对关节炎软骨细胞,经姜黄素干预后,SOD、MDA、NOS、NO均有显著性变化。与正常软骨细胞组比较,关节炎软骨细胞组Nrf2 m RNA及其蛋白表达水平下调,细胞核内Nrf2活性增强;经姜黄素干预组变化更明显。结论:关节炎软骨细胞存在氧化应激反应,姜黄素能部分纠正氧化应激,对软骨细胞具有保护作用,机制可能与诱导Nrf2核转位从而激活Nrf2-ARE信号通路有关。 宋永周 关健 李明 马维 袁鹤 王斌 童九辉关键词:姜黄素 软骨细胞 氧化应激 NRF2 Nrf2介导姜黄素对软骨细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量:5 2015年 背景:研究表明氧化应激在骨关节炎的发生发展中起重要作用,姜黄素具有抗氧化、清除自由基作用。目的:通过建立H2O2诱导软骨细胞损伤模型,观察姜黄素对软骨细胞的保护作用。方法:体外培养SD大鼠关节软骨细胞,随机分为正常组、模型组(H2O2)、姜黄素低、中、高剂量剂量组(20,40,80μmol/L)。姜黄素与软骨细胞培养48 h后,加入H2O2,24 h后收集细胞,MTT法测定细胞存活率,测定细胞超氧化物歧化酶、丙二醛、过氧化氢酶含量,Real-Time PCR和Western blot法检测细胞Nrf2 mR NA及其蛋白表达水平,荧光显微镜观察细胞核形态变化。结果与结论:与正常组比较,模型组软骨细胞存活率降低,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量降低,丙二醛含量增加,Nrf2 mR NA及其蛋白表达水平下调,呈现出凋亡细胞的特征。经姜黄素预先处理,软骨细胞存活率升高,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量升高,丙二醛含量降低,Nrf2 mR NA及其蛋白表达水平升高,细胞核形态改善,随姜黄素浓度升高变化更明显。结果说明,姜黄素对H2O2所致软骨细胞氧化应激损伤保护作用可能是通过增强Nrf2表达来实现的。 宋永周 关健 李明 马维 袁鹤 王斌 童九辉关键词:姜黄素 软骨细胞 氧化性应激 氧化应激 NRF2