王锋
- 作品数:25 被引量:24H指数:3
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:广州市科技计划项目广东省高等学校珠江学者岗位计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程经济管理环境科学与工程更多>>
- 对硫磷纳米抗体筛选及分子识别机制研究被引量:6
- 2019年
- 对硫磷是一种广谱的有机磷酸酯类杀虫、杀螨剂,毒性极强,可对环境和人类健康造成严重危害。尽管我国已禁止使用对硫磷,但仍存在违禁使用现象,加强对其监测十分必要。纳米抗体是已知最小的与抗原结合的片段(15 kDa),来源于骆驼科动物体内重链抗体的可变区,具有稳定性强、灵敏度高、易表达、水溶性好等特性。本研究基于噬菌体展示技术构建了抗对硫磷纳米抗体库,其库容为2.41×10^7 cfu/mL,经抗原-抗体固相亲和筛选及噬菌体酶联免疫法(Phage ELISA)鉴定,获得5种抗对硫磷纳米抗体VHH1、VHH6、VHH13、VHH21和VHH24。以结合能力最强的VHH1为基础,采用同源建模和分子对接技术探讨VHH1与对硫磷分子的识别机制,发现VHH1与对硫磷存在氢键和疏水间分子作用力,关键氨基酸是Ser60、Lys104、Phe105、Gly106和Arg107。本研究为抗体的进化改造和半抗原的设计提供了新思路。
- 张玉琪张瑾如王锋李家冬司睿吕丽珊沈玉栋王弘HAMMOCK Bruce D孙远明
- 关键词:对硫磷噬菌体展示分子模拟
- 一种楸树育苗专用复合肥及其应用
- 本发明公开了一种楸树育苗专用复合肥及其应用。所述楸树育苗专用复合肥中氮的质量含量为13.5~18.4%,五氧化二磷的质量含量为4.7~6.0%,氧化钾的质量含量为7.9~17.6%。本发明提供的楸树育苗专用复合肥是在广泛...
- 李吉跃王军辉何茜马建伟苏艳白晶晶董菊兰麻文俊王锋
- 文献传递
- 微囊藻毒素纳米抗体的制备及其间接竞争酶联免疫分析方法的建立被引量:5
- 2022年
- 微囊藻毒素(MC)作为肝毒性最强的藻毒素之一,在受污染的水体中时常检出,严重威胁着人畜饮水安全,加强其检测十分重要。在前期研究中,已成功构建抗MC-LR噬菌体展示纳米抗体文库。本研究以MC-LR-OVA作为包被原,经4轮固相淘筛,获得纳米抗体M110。该抗体可识别MC-LR,且具有良好的稳定性。基于纳米抗体M110建立了检测MC-LR的间接竞争酶联免疫分析法(ic-ELISA),检测的半抑制浓度IC50值为3.55 ng/mL,检测限0.65 ng/mL,线性范围1.28~9.88 ng/mL。与UPLC-MS/MS方法检测结果相关系数达0.998,提示本方法可用于水体中微囊藻毒素残留的检测。
- 司睿吴广培王锋雷红涛王弘
- 关键词:微囊藻毒素
- 一种特异性检测藻毒素类物质的纳米抗体及酶联免疫分析方法
- 本发明公开了一种特异性检测藻毒素类物质的纳米抗体及酶联免疫分析方法,所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本纳米抗体可以识别多种含藻毒素(NOD、MC‑LR、MC‑YR、MC‑WR和MC‑RR),且检测结...
- 王弘司睿雷红涛王锋张玉琪张瑾如徐振林肖治理
- 文献传递
- 同时检测呋喃它酮代谢物、孔雀石绿及隐孔雀石绿的免疫检测方法
- 本发明提供了一种同时检测呋喃它酮代谢物(AMOZ)、孔雀石绿(MG)及隐孔雀石绿(LMG)的免疫检测方法。本发明科学合成AMOZ半抗原和LMG半抗原,将其分别与载体蛋白偶联制备人工抗原。利用AMOZ人工抗原和LMG人工抗...
- 肖治理王锋王弘沈玉栋杨金易孙远明王宇戴尽波刘凤银
- 文献传递
- 一种基于驼源抗体直接检测细交链孢菌酮酸的化学发光免疫分析方法及试剂盒
- 本发明公开了一种基于驼源抗体直接检测细交链孢菌酮酸的化学发光免疫分析方法及试剂盒,本发明利用一种具有如式(I)所示的细交链孢菌酮酸的人工抗原,<Image file="DDA0002123977870000011.GIF...
- 王弘王锋沈玉栋徐振林肖治理杨金易雷红涛孙远明
- 文献传递
- 嫁接扶杆装置
- 本实用新型公开了一种嫁接扶杆装置,包括扶杆和至少一根弹性绑带,所述弹性绑带的一端与所述扶杆连接,所述扶杆的底端设有固定叉脚,扶杆通过固定叉脚插入土壤中,达到直立、不易倾倒的固定功效。弹性绑带一端连接于扶杆上,另一端再将幼...
- 苏艳郑会全李吉跃王锋林元震何茜
- 文献传递
- 基于光谱法研究异细交链孢菌酮酸半抗原-抗体的相互作用被引量:1
- 2015年
- 本文采用紫外可见光谱(UV-Vis)、荧光光谱和圆二色谱(CD)技术研究了异细交链孢菌酮酸单克隆抗体(Mc Ab)与其半抗原(Ite AH)之间的相互作用并用ELISA方法对荧光结果进行了验证。结果表明,ITe AH对Mc Ab有荧光猝灭作用,淬灭机理主要为静态猝灭且遵循非辐射能量转移理论。在298、310、318 K 3个温度下,ITe AH与Mc Ab的结合常数分别为1.9×106、1.6×106、1.4×106 L/mo L,结合位点数n≈1,结合距离r为3.35 nm,经ELISA测得的结合常数与荧光分析的结果较一致。由结合作用过程的热力学参数可知,两者之间以静电引力为主要作用力,不同p H下,由ELISA结果可推测其影响了ITe AH与抗体结合。同步荧光光谱显示ITe AH的加入并未使抗体的酪氨酸和色氨酸残基附近的微环境发生明显改变,两者的结合位点更倾向于酪氨酸残基,圆二色谱分析发现ITe AH与Mc Ab相互作用后,抗体的二级结构发生明显变化。
- 王雅丽王锋王弘杨金易徐振林沈玉栋肖治理雷红涛孙远明
- 关键词:单克隆抗体紫外可见光谱荧光光谱圆二色谱
- 一种细交链孢菌酮酸的单克隆抗体及其酶联免疫检测方法
- 本发明公开了一种能特异性识别细交链孢菌酮酸的单克隆抗体及其酶联免疫检测方法。本发明首先制备了半抗原(TEA‑CMO),并分别偶联血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)得到免疫原(TEA‑CMO‑KLH)和包被原(TE...
- 王弘周晓文沈玉栋王锋徐振林孙远明肖治理杨金易
- 文献传递
- 同时检测呋喃它酮代谢物、孔雀石绿及隐孔雀石绿的免疫检测方法
- 本发明提供了一种同时检测呋喃它酮代谢物(AMOZ)、孔雀石绿(MG)及隐孔雀石绿(LMG)的免疫检测方法。本发明科学合成AMOZ半抗原和LMG半抗原,将其分别与载体蛋白偶联制备人工抗原。利用AMOZ人工抗原和LMG人工抗...
- 肖治理王锋王弘沈玉栋杨金易孙远明王宇戴尽波刘凤银