王圣洁
- 作品数：13 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家微生物资源平台项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 用于Lonsdalea属病原菌检测的引物探针组合、试剂盒、检测方法及其应用
- 本发明公开了一种用于Lonsdalea属L.quercina和L.populi快速检测的特异性引物探针组、试剂盒、检测方法及其应用。采用本发明的引物探针组、试剂盒、方法能够有效检测Lonsdalea属的L.quercin...
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- 检测枣疯病、槐树丛枝病或樱桃致死黄化植原体的LAMP引物组及其试剂盒和应用
- 本发明公开了检测枣疯病、槐树丛枝病和樱桃致死黄化植原体的LAMP引物组及其试剂盒和应用。本发明针对16SrV‑B组植原体tuf基因保守序列设计用于检测枣疯病、槐树丛枝病和樱桃致死黄化植原体的LAMP引物组。本发明还公开了...
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- 文献传递
- 检测植原体的LAMP引物组及其试剂盒和应用
- 本发明公开了检测植原体的LAMP引物组及其试剂盒和应用。本发明首先针对16SrI组植原体16S基因和tuf基因保守序列的6个区域分别设计6组和2组引物，最终得到特异性强的由SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和...
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- 文献传递
- 枣疯病植原体LAMP检测技术及其在抗病种质资源筛选中的应用
- 枣疯病是枣树上一种毁灭性的病害,由于病原传播快,无有效的防治措施,造成了严重的经济损失。高效、精确的植原体分子诊断与检测技术,可以帮助预测病害发生情况、筛选优良的抗性种质资源、为枣树产业的健康发展提供保障,本研究旨在建立...
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- 关键词：植原体抗病性鉴定
- 文献传递
- 以tuf基因为靶标的5种16SrⅠ组植原体环介导恒温扩增技术被引量：6
- 2017年
- 【目的】建立一种能够特异性检测和鉴定16SrⅠ组植原体的环介导恒温扩增技术,实现16SrⅠ组植原体的快速检测。【方法】以植原体tuf基因作为靶标,通过序列比对,设计多组具有特异性的LAMP引物组,筛选出一套适用于16SrⅠ组植原体的特异性检测体系。以16SrⅡ组、16SrⅤ组、16SrⅩⅨ组植原体样品按照此检测体系进行反应,来验证其特异性;同时将稀释后的感病组织样品同步进行PCR和LAMP检测,以确定其检测灵敏度。对来自不同省市的6份田间样品以及9份组培样品进行检测,以验证其检测的稳定性。【结果】16SrⅠ-LAMP在恒温63℃条件下40 min内完成扩增,能检测5种分别引起泡桐丛枝、苦楝丛枝、桑树萎缩、莴苣黄化和长春花绿变病的16SrⅠ组植原体,不能检测其他组植原体包括16SrⅡ组的花生丛枝、甘薯丛枝、臭矢菜丛枝、16SrⅤ组的枣疯病、红花槐丛枝、樱桃致死黄化和16SrⅩⅨ组的板栗黄化皱缩植原体。通过在反应液中加入钙黄绿素肉眼判断绿色为阳性结果,褐色为阴性结果,与用荧光定量设备进行判读扩增曲线的结果一致。相比于PCR检测,16SrⅠ-LAMP检测的灵敏度提高了8倍;16SrⅠ-LAMP能够快速检测出来自不同区域的田间泡桐发病样品、感病泡桐组培苗和嫁接传病脱毒苗。【结论】以tuf基因作为靶标,建立能同时检测5种16SrⅠ组植原体的环介导恒温扩增技术,具有高效、特异、操作简便、检测时间短及成本较低等优点,适合于基层和现场检测。
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- 关键词：植原体
- 河南濮阳丝棉木丛枝病原菌的检测与鉴定
- 丝棉木(Euonymus maackii Rupr),属卫矛科植物,由于其适应能力强,观赏价值高,已逐渐成为园林绿化中落叶小乔木的主流树种。从河南濮阳采集到表现丛枝症状的感病丝棉木植株,主要表型症状为:叶片变小、叶部黄化...
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- 关键词：植原体系统进化树RFLP分析
- 文献传递
- 检测植原体的LAMP引物组及其试剂盒和应用
- 本发明公开了检测植原体的LAMP引物组及其试剂盒和应用。本发明首先针对16SrI组植原体16S基因和tuf基因保守序列的6个区域分别设计6组和2组引物，最终得到特异性强的由SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和...
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- 文献传递
- 嫁接于3个枣园病砧的抗病接穗枣疯植原体检测及分子变异被引量：1
- 2021年
- 【目的】检测3个枣园不同抗性枣树材料嫁接传毒后携带植原体状况,分析不同植原体株系传播流行、遗传变异和系统发育及其与枣树品种抗性之间的关系,揭示枣疯植原体群体遗传变异特性,为抗病品系合理利用与病害防控提供依据。【方法】4月采集不同抗性枣树材料嫁接到北京玉泉山枣树资源圃、北京昌平王家园和河北唐县军城镇三地枣园的发病砧木上,当年8—10月分别提取接穗和砧木组织样品总DNA,利用植原体16S rDNA、16S-23S间区(SR)、secA、tuf、fusA-tuf间区、himA及其下游假定蛋白基因等片段进行PCR和LAMP检测,并对PCR产物进行测序,分析遗传变异和系统进化。【结果】抗病品系的接穗材料症状严重度大都低于感病砧木;表现无症接穗T30通过直接和巢式PCR与LAMP均未检测到植原体;3个枣园枣树样品中的植原体16S rDNA、SR、tuf和secA基因序列同源性为100%;根据所测38份样品中himA及其下游假定蛋白基因序列在117、154和190 bp位点的碱基变异,军城镇样品序列聚于T-A型,玉泉山样品和河北唐县梁家沟枣疯序列聚于C-A型,而昌平样品和泗洪、泰安、通州枣疯序列聚于C-C型;根据所测29份样品中fusA-tuf基因间区序列在第39 bp位置有碱基A插入或缺失,将玉泉山和军城镇样品归于TJ2型,而国内其他地区各株系和昌平样品为TJ1型;himA及其下游假定蛋白基因序列及fusA-tuf基因间区序列在3个枣园各有优势菌株序列,序列分型对应且互相佐证。【结论】本研究首次测定枣树‘骏优2号’(Z18)优良品系具有高抗病性,并首次检测到3个枣园内枣疯植原体株系的himA及其下游假定蛋白基因与fusA-tuf基因间区存在明显地域差异,且与样品抗病性强弱无关联;初步排除玉泉山枣园植原体来源于江苏泗洪大枣移栽苗传病的假设。
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- 关键词：嫁接枣疯病植原体
- 植原体遗传多样性研究现状与展望被引量：7
- 2016年
- 植原体是引起众多植物病害的一类重要的无细胞壁的原核致病菌,其寄主种类多、危害面积广,对经济、环境等影响严重。大量研究表明植原体存在丰富的遗传多样性。本文就植原体遗传多样性研究现状作一概要评述,并对植原体遗传变异的研究技术、产生机制、与致病性关系等今后可能的研究方向作一展望。对已完成的5个植原体全基因组序列分析发现,它们在大小、结构和功能等方面皆存在显著差异,缺少很多标准代谢所需的基因。不同植原体中质粒的数量、大小和功能等也存在一定差异。植原体含有2个核糖体RNA编码基因,其序列在不同株系中的变异奠定了现今植原体分类鉴定的基础。对植原体蛋白编码基因如核糖体蛋白编码基因(rp)、蛋白延伸因子基因(tuf、fus A)、转运蛋白基因(sec Y、sec A)、效应子及非编码区序列如启动子、假基因等的深入研究可进一步揭示植原体更丰富的遗传变异特征。由于植原体分离培养困难,人们对其形态特征、生理代谢等了解甚少,因而全基因组测序、多位点序列分析等现代分子生物学技术将会成为植原体遗传变异研究的主要手段。植原体遗传多样性研究进展有助于从分子水平上系统地阐明植原体遗传变异规律、系统进化特征及其与寄主(植物和昆虫)、生态环境间的互作和适应关系,并产生新的认识。这对于提高植原体的分类鉴定、致病机制、流行预测及病害防治等研究水平具有重要的作用和意义。
- 于少帅徐启聪林彩丽王圣洁田国忠
- 关键词：植原体系统进化
- 我国植原体遗传多样性研究进展
- 植原体为无细胞壁、难培养的原核病原菌，可引起我国不同气候带和地理环境中的植物发生黄化、丛枝、花变态、衰退等病害，包括多种作物、园艺花卉、果树、林木、乃至海藻等，表现出丰富的遗传多样性和变异类型。传统途径是依据寄主植物和症...
- 田国忠于少帅王圣洁林彩丽李永朴春根严东辉郭民伟
