许珊
- 作品数：10 被引量：31H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金天普研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 多肽bCAT联合卡泊芬净对白色念珠菌菌丝及成熟生物被膜的作用
- 2020年
- 目的探讨嗜铬粒蛋白A(chromogranin,CGA)衍生多肽bCAT联合卡泊芬净(caspofungin,CAS)对白色念珠菌菌丝及成熟生物被膜的作用及机制。方法以标准菌株ATCC10231为研究对象,体外建立生物被膜模型,分别用bCAT、CAS、bCAT联合CAS作用于被膜,以RPMI1640干预作为空白对照组(control组)。XTT法检测生物被膜代谢活性的变化,并计算抗成熟生物被膜50%的MIC(MBIC50),RT-PCR检测黏附因子ALS3的mRNA表达,DCFH-DA观察细胞内ROS含量的变化,SYTO9/PI染色观察生物被膜通透性的变化。结果bCAT及CAS抗成熟生物被膜的MBIC50分别为3105、128μg/mL,两者联合使用时抗成熟被膜的MBIC50分别降至776、4μg/mL,RT-PCR检测结果显示bCAT+CAS组处理被膜后ALS3表达量为(1.71±0.65)%,与control、bCAT(776μg/mL)、CAS(4μg/mL)组比较差异具有统计学意义(P<0.05);ROS含量为(428.96±47.67)%,与control、bCAT(776μg/mL)、CAS(4μg/mL)组比较差异具有统计学意义(P<0.05);bCAT+CAS组中死亡菌明显增加,菌丝相真菌明显减少。结论CGA衍生多肽bCAT联合CAS具有协同抗成熟被膜作用,其机制可能与降低黏附因子ALS3的表达而抑制菌丝的形成、增加ROS含量造成氧化损伤相关。
- 刘贤许珊沈一鸣亢胜男刘景仑陈晓迎张丹
- 关键词：嗜铬粒蛋白A白色念珠菌生物被膜卡泊芬净
- 多肽bCAT通过下调白念珠菌HWP1基因表达抑制生物被膜的形成机制被引量：5
- 2017年
- 目的明确多肽bCAT抑制白念珠菌生物被膜形成能力,并探索其与黏附基因HWP1表达的关系。方法标准菌株白念珠菌ATCC10231和临床菌株作为研究对象,XTT法检测其生物被膜形成能力,bCAT抗浮游白念珠菌的MIC值以CLSI-M27-A3方法确定,XTT法及菌落计数检测bCAT抑制生物被膜形成作用,并计算代谢活性确定抑制50%生物被膜形成的MIC(BIC_(50)),bCAT减少白念珠菌的黏附作用经倒置显微镜下观察及菌落计数法检测,并采用RT-PCR通过2^(-ΔΔCt)法计算HWP1的表达量。统计方法为单因素方差分析,组内比较采用Dunnett T3检验。结果标准菌株及临床菌株均有较强生物被膜形成能力。bCAT抗浮游状态的白念珠菌MIC值为40~80μmol/L,BIC_(50)为80~160μmol/L;并且bCAT能减少白念珠菌的黏附作用,空白对照组菌落计数为(27 822.22±2 472.74)cfu,bCAT浓度为160、80、40、20、10μmol/L时的菌落个数分别为(5 355.55±1 264.03)cfu、(11 377.78±2 232.58)cfu、(17 488.89±1 136.27)cfu、(22 377.78±3 521.99)cfu、(26 044.44±1 329.57)cfu。组间差异具有统计学意义(F=147.018,P=0.001),组内比较发现160、80、40μmol/L处理组与不含bCAT时差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR发现160μmol/L处理组HWP1相对表达量为空白对照组的12.24%。结论 bCAT能有效抑制白念珠菌生物被膜形成,其机制可能与降低HWP1基因的表达从而减少白念珠菌的黏附有关。具有一定的临床前景。
- 许珊张舒张丹刘思佚刘梳柯
- 关键词：白念珠菌生物被膜形成嗜铬粒蛋白A
- 嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR抑制LPS诱导的永生化脑微血管内皮细胞高通透性被引量：1
- 2018年
- 目的探讨嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR(chromofungin)对LPS所诱导的永生化人脑微血管内皮细胞高通透性的影响。方法分别用LPS、CHR、CGA4-16作用于人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC),用CCK8法检测不同浓度LPS刺激HBMEC细胞活力变化;EVOM法及Transwell小室法检测内皮细胞相对通透性;Western blot及RT-PCR法检测紧密连接蛋白(ZO-1和Claudin-5)的表达情况。结果与空白组相比,随着LPS浓度增加,HBMEC细胞的活性受到显著抑制(P<0.05)。随着LPS作用时间延长,其细胞内紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5的表达逐渐下调,6 h后蛋白表达量降到最低(P<0.05),12 h和24 h后其蛋白表达与6 h相比无明显差异。LPS作用下HBMEC单层细胞电阻值明显降低(t=-18.214,P<0.001),细胞通透性显著升高(t=6.083,P=0.004),ZO-1、Claudin-5的蛋白和mRNA表达明显下调(P<0.05),而CHR可显著改善上述变化。结论嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR能通过上调紧密连接相关蛋白的表达从而改善LPS所致的脑微血管内皮细胞高通透性。
- 刘思佚曾燕刘疏柯魏伏许珊张丹
- 关键词：人脑微血管内皮细胞高通透性
- 乌司他丁通过Rho／ROCK信号通路改善脂多糖诱导脓毒症小鼠肺损伤的研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨乌司他丁（UTI）对脂多糖（LPS）诱导脓毒症小鼠肺损伤的保护作用及其分子机制。方法将C57BL／6小鼠随机分为对照组（Con组，n=10）、模型组（LPS组，n=10）及UTI干预组（L＋U组，n=30），建立LPS脓毒症小鼠模型。采用肺湿干质量（W／D）法及伊文思蓝（EvansBlue，EB）法观察各组小鼠肺组织含水量及肺微血管通透性的变化，HE染色法检测各组小鼠肺组织病理变化，免疫组化法检测肺组织血管钙黏蛋白（VE-cadherin）及ROCK2的表达。结果与Con组比较，LPS组小鼠肺组织W／D及EB含量均明显增加（均P〈0．05），而L＋U组W／D及EB含量明显降低，其中UTI在10^4U／kg、10^5U／kg剂量时，与LPS组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）；LPS组小鼠较Con组肺组织损伤严重，L＋U组肺组织损伤明显减轻；免疫组化结果显示，LPS组小鼠肺组织VE—cadherin表达明显降低，ROCK2表达明显增高（均P〈0．05），而UTI干预后，VE—cadherin表达明显增加，ROCK表达明显下降（均P〈0．05）。结论UTI能够剂量依赖性地降低LPS所致的肺毛细血管通透性增加，从而改善脓毒症小鼠肺损伤，这一作用可能与UTI抑制Rho／ROCK信号通路的激活有关。
- 魏伏张丹曾燕许珊罗丽
- 关键词：肺损伤RHO/ROCK信号通路
- CHR抑制白假丝酵母菌生物被膜形成作用及机制探讨
- 2016年
- 目的：CGA47-66（chromofungin,CHR）是嗜铬粒蛋白A（chromograinin A,CGA）水解形成的生物活性多肽,已有研究证实其具有免疫调节和抗菌作用,本研究旨在进一步证实CHR抗白假丝酵母菌生物被膜形成的作用,探讨其作用机制。方法：根据CLSI-M27-A3参考方法检测CHR对浮游状态下白假丝酵母菌的最低抑菌浓度,菌落计数法及XTT比色法验证CHR是否具有抑制生物被膜形成的作用,并确定CHR对白假丝酵母菌的BIC50,通过菌落计数法和倒置显微镜证实CHR抗真菌粘附作用,并使用q RT-PCR检测粘附基因Hwp1的表达情况从而进一步验证其作用的分子机制。结果：CHR对浮游状态白假丝酵母菌的MIC值为10～20μmol/L,并证实CHR具有抗白假丝酵母菌生物被膜形成作用,BIC50值为80～160μmol/L,且具有浓度依赖性;q RT-PCR检测CHR下调C.albicans Hwp1基因的表达,160μmol/L CHR处理组相对Hwp1基因表达量通过2-△△Ct值计算为（0.089 5±0.036 0）,无处理组Hwp1基因的表达是CHR组的11.17倍,差异具有统计学意义（t=44.008,P=0.001）。结论：CHR具有抑制白假丝酵母菌生物被膜形成的作用,其机制可能与CHR减少白假丝酵母菌细胞的粘附有关。本研究为CHR在抗真菌材料方面的应用提供了理论基础。
- 张舒许珊张丹黄文祥魏伏刘思佚罗盛淑何琴李佳俊
- 关键词：白假丝酵母菌生物被膜形成
- CGA衍生抗菌多肽抗白色念珠菌生物被膜作用及其机制
- 目的 研究CGA 衍生抗菌多肽bCHR 和bCAT 对抑制白色念珠菌生物被膜形成作用及其机制 方法 扫描电镜观察CGA 衍生抗菌多肽bCHR 和bCAT 抑制硅胶表面白色念珠菌的形成,XTT(c;3,3'-[1-(苯氨酰...
- 许珊张舒张丹
- 乌司他丁抑制脓毒症患者血清诱导的血管内皮细胞高通透性被引量：7
- 2017年
- 目的观察乌司他丁(UTI)对脓毒症休克患者血清诱导的人脐静脉血管内皮细胞高通透性的影响。方法 ELISA检测5例健康志愿者和5例脓毒症休克患者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;分别以(10、100、1000)U/mL UTI、300μL脓毒症休克患者血清、22 ng/mL TNF-α作用于体外培养的EA.hy926人脐静脉内皮细胞,采用Transwell^(TM)法检测细胞通透性;跨上皮细胞电阻法(EVOM)检测单层细胞电阻;免疫荧光细胞化学染色法检测细胞纤维型肌动蛋白(F-actin)形态及分布情况。结果与健康志愿者相比,脓毒症患者血清中TNF-α含量明显增高;脓毒症血清作用于EA.hy926单层细胞后,细胞电阻值明显降低,细胞通透性显著升高,F-actin重新分布,细胞内应力纤维增多,而UTI可改善EA.hy926细胞的上述变化。结论 UTI能够抑制脓毒症血清引起的EA.hy926细胞通透性增加,且呈现一定的剂量依赖性。
- 刘思佚魏伏罗丽许珊刘疏柯张丹
- 关键词：乌司他丁高通透性肿瘤坏死因子Α
- 嗜铬粒蛋白A衍生多肽CGA47-66抑制脓毒症小鼠血脑屏障通透性增加被引量：9
- 2016年
- 目的探讨嗜铬粒蛋白A（CGA）衍生多肽CGA47-66（CHR）对脓毒症小鼠血脑屏障通透性的影响。方法健康雄性C57BL／6小鼠120只，按随机数字表法分组，每组12只。72只用于观察脂多糖（LPS）诱导小鼠脑组织含水量和脑组织伊文思蓝（EB）含量的动态变化。另48只分为生理盐水对照组（NS组）、LPS诱导脓毒症模型组（LPS组）、低剂量CHR预处理组（CL＋LPS组）及高剂量CHR预处理组（CH＋LPS组）o腹腔注射10mg／kg、LPS0．1mL制备脓毒症小鼠模型；NS组注射等量生理盐水；CL＋LPS组和cH＋LPs组于注射LPS前10min分别腹腔注射CHR15．5ug／kg和77．5ug／kg。6h后经尾静脉注射2％EB4mL／kg，检测脑组织含水量和EB含量；采用荧光示踪法定性观察血脑屏障通透性变化；苏木素一伊红（HE）染色后观察脑组织病理学改变。结果注射LPS后随着时间的延长，脑组织含水量和EB含量均逐渐增加，脑组织含水量与对照组出现统计学差异的时间早于EB含量变化的时间（分别为3h和6h）。LPS组脑组织含水量及EB含量均较NS组明显升高[脑组织含水量：（79．77±0．62）％比（78．28±0．44）％，P〈0．01；EB含量（ug／g）：13．87±4．50比7．13±1．76，P〈0．05]；而两个CHR预处理组均可逆转LPS诱导的脑组织含水量和EB含量增高，以CH＋LPS组效果更加明显[脑组织含水量：（78．15±0．73）％比（79．77±0．62）％，EB（ug／g）：7．09±2．59比13．87±4．50，均P〈0．05]。EB荧光观察结果显示，NS组荧光信号仅存在于脑膜；LPS组脑实质中可见EB荧光广泛分布，说明EB渗漏较NS组明显；两个CHR预处理组脑实质中EB荧光减少，说明EB渗漏明显减少，且以高剂量组改善更为明显。HE染色显示，NS组脑血管结构清晰，周围间隙未见明显增大；LPS组脑组织结构疏松，小血管周围间隙明显增宽，水肿明显；两个CHR预处理组脑水肿较LPS
- 曾燕张丹姜丽萍魏伏许珊
- 关键词：脓毒症嗜铬粒蛋白A血脑屏障
- 乌司他丁抑制肿瘤坏死因子-α诱导血管内皮细胞高通透性的机制研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨乌司他丁(UTI)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞通透性增高的影响及其主要分子机制。方法离体培养人脐静脉内皮细胞系EA.hy926,分别以UTI和TNF-α作用于EA.hy926,小室法测单层细胞通透性,免疫荧光法测磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶向亚基1(p-MYPT1)的表达;分别采用免疫细胞化学法、Western Blot法测与通透性相关的关键分子(RhoA、ROCK2、MYPT1、p-MYPT1及VE-cadherin)表达的变化情况。结果 TNF-α作用下EA.hy926单层细胞通透性增加,细胞内p-MYPT1的表达量较正常对照组明显增加,而UTI可改善EA.hy926细胞的上述变化情况;免疫细胞化学结果显示,与正常对照组比较,TNF-α作用下RhoA、ROCK2的表达明显增加,而UTI可抑制RhoA、ROCK2的高表达;Western Blot结果显示,与正常对照组比较,TNF-α作用下p-MYPT1、RhoA和ROCK2的表达明显增加,VE-cadherin的表达明显降低(均P<0.05),而UTI可抑制p-MYPT1、RhoA和ROCK2蛋白的高表达,增加VE-cadherin的表达。结论 UTI可能通过Rho/ROCK信号通路抑制TNF-α引起的EA.hy926细胞通透性增加。
- 刘思佚魏伏刘疏柯罗丽许珊张丹
- 关键词：高通透性乌司他丁肿瘤坏死因子-ΑRHO/ROCK信号通路
- 脓毒症患者中横纹肌溶解综合征与预后关系的研究被引量：4
- 2017年
- 目的探讨脓毒症患者中横纹肌溶解综合征(RM)与病情严重程度及预后的关系。方法采用前瞻性研究方法,入选2014年10月~2015年9月重庆医科大学附属第一医院中心ICU连续收治的脓毒症患者151例作为研究对象。检测入ICU当天的血清肌酸激酶(CK),以CK≥1000U/L作为RM的诊断标准,比较发生RM的患者与未发生RM患者的感染标志物、危重症评分、器官功能障碍和28天病死率等。结果 151例脓毒症患者中37例(24.5%)发生RM。RM组的PCT水平、APACHEⅡ评分和SOFA评分较非RM组高(P<0.05)。RM组ICU期间肝脏功能障碍、循环障碍、肾脏功能障碍的发生率、人均器官障碍数、血肌酐峰值水平、接受连续肾脏替代治疗(CRRT)患者的比例和28天病死率较非RM组高(P<0.05),而呼吸功能障碍、凝血功能障碍和神经系统障碍的发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CK对预测脓毒症患者28天死亡风险具有统计学意义,ROC曲线下面积(AUC)为0.694(P<0.05),低于APACHEⅡ评分(0.841)和SOFA评分(0.805)(P<0.05)。结论脓毒症患者中RM的发生率高,发生RM的患者的病情更危重,其ICU期间肝脏功能障碍、循环障碍、肾脏功能障碍的发生率和28天病死率均显著增加,CK可以作为预测脓毒症患者28天病死率的参考指标。
- 龚雪张丹李鹏飞曾燕魏伏许珊董瑞安
- 关键词：横纹肌溶解综合征脓毒症肌酸激酶预后器官功能障碍
