苗盼盼
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划山东省科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同固定和标记方法对流式细胞术检测博莱霉素诱发γH2AX表达的影响
- 【目的】比较几种不同的固定和标记方法在流式细胞术检测博莱霉素诱发原代培养肝细胞内磷酸化H2AX（γH2AX）的表达水平、以及二者剂量反应关系上的差异。【材料和方法】研究以原代小鼠肝细胞为受试细胞,以博莱霉素为受试物,将不...
- 孟涛苗盼盼牛勇戴宇飞郑玉新
- 关键词：流式细胞术博莱霉素原代肝细胞
- 文献传递
- 甲苯二异氰酸酯职业暴露对血清中基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制剂-1水平的影响及其与肺功能的相关性分析被引量：2
- 2016年
- 目的探讨甲苯二异氰酸酯（TDI）职业暴露对血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-11水平的影响及其与肺功能的相关性。方法采用横断面研究设计，于2014年10月，以整群抽样方法选择我国西部地区某TDI生产厂的作业T人为暴露组，共61名，纳人工种包括装桶T、巡检T、制造T。根据各工种外暴露浓度的不同，将装桶工归为高暴露组，巡检工和操作工归为低暴露组。另根据年龄、性别匹配原则，选择该工厂内与暴露组工人工作强度相似但不接触TDI及其他致敏物质的企业管理人员作为对照组，共计58名。通过问卷调查获取调查对象性别、年龄、工龄、吸烟及饮酒情况、个人及家族过敏史、职业史及近期患病情况。用8h加权平均浓度（8h-TwA）表示TDI空气中外暴露水平。采用ELISA检测血清中MMP-9和TIMP—1的水平，采用便携式肺功能仪测定用力肺活量（FVC）、第一秒用力呼气容积（FEV1．0）。采用Spearman相关分析法分析MMP-9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1与FVC、FEV1．0及工龄的关系。结果暴露组调查对象作业场所空气中TDI8h．TWA的平均值为0．39mg／m3，其中，装桶工为0．76mg／m3，操作工和巡检工均为0．25mg／m3。对照组、低暴露组及高暴露组血清中MMP-9的水平分别为（807．21±347．70）、（586．91±317．50）、（388．94±312．01）ng／ml（Z2=16．69，P〈0．001）；MMP-9／TIMP-1的P50（P25-P75）分别为4．67（2．87～6．68）、2．3（1．44～3．481、1．11f0．59—1．48）（22=39．42，P〈0．001）；TIMP-1分别为（173．44±72．67）、（236．12±51．98）、（302．81±44．39）ng／ml（F=20．09，P〈0．001）。暴露组中肺功能FVC、FEV1．0和FEV1．0／FVC的P50（P25～P75）分别为92．8％（86．0％～101．8％）、85．5％（76．7％～92．8％）和112．5（108．2～118．5），均低于对照组[124．3％（107�
- 苗盼盼孟涛贾强牛勇叶萌纪玉青巨睿陈学磊邵华郑玉新戴宇飞
- 关键词：基质金属蛋白酶9金属蛋白酶1组织抑制剂生物标志物
- 原代肝细胞模型的优化及苯乙烯和氧化苯乙烯的毒性研究
- 2016年
- 目的建立具有高活力、高功能特性的原代小鼠肝细胞模型,并通过该体外模型评价受试物苯乙烯和氧化苯乙烯的急性毒性。方法以BABL/C小鼠作为肝细胞供者,在经典两步胶原酶消化法基础上进行优化,通过逆向灌流、间断灌注、限制消化时间及Percoll液离心纯化的方式获取小鼠肝细胞,并进行体外单层和夹层培养;通过细胞形态、细胞活力、胞内糖原颗粒以及上清中各指标即白蛋白（ALB）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及尿素氮（BUN）变化综合评价原代培养的肝细胞模型;以苯乙烯和氧化苯乙烯为受试物,用浓度分别为0.2、1、5、10和25μmol/L的受试物作用于夹层培养3 d的肝细胞,于染毒3、6、12、24及48 h后,采用CCK-8法和LDH法测定细胞存活率。结果改良法分离获取的小鼠肝细胞活力为（90.3±5.2）%,纯度为（95.3±4.2）%,产量达（2.4±0.9）×107;夹层培养7 d内90%以上细胞呈典型的肝细胞形态特征,培养第3 d胞浆内可见大量糖原颗粒。ALB分泌、LDH和ALT漏出、BUN合成、以及细胞活力夹层培养在8 d内、单层培养在6 d内呈波动性变化,且夹层培养法各指标明显优于单层培养法;夹层培养第3 d ALB分泌量[（1.42±0.20）g/L]和BUN合成量[（1.97±0.22）mmol/L]及细胞活力均达峰值,而LDH漏出量[（7.30±2.33）U/L]和ALT漏出量[（6.51±1.86）U/L]降到谷值,且3~7 d各指标变化相对稳定。苯乙烯和氧化苯乙烯在染毒6 h内,对肝细胞显示了较低的细胞毒性,细胞存活率在90%以上,且CCK-8和LDH两种毒性测定方法之间无显著差异;随着染毒时间的进一步延长,CCK-8法检测出的细胞存活率更低（85%以下）,与LDH法相比差异有统计学意义。用不同浓度受试物处理肝细胞24 h后,从5μmol/L开始观察到相对较高的细胞毒性,用CCK-8法检测出细胞存活率约为85%,但与LDH法相比无显著差异;随着染毒浓度的继续增加,CCK-8
- 孟涛牛勇苗盼盼纪玉青宾萍戴宇飞郑玉新
- 关键词：原代培养苯乙烯氧化苯乙烯胶原酶细胞毒性
- 利用原代肝细胞模型检测细胞内磷酸化组蛋白H2AX表达筛选遗传毒物的方法验证
- 2016年
- 目的验证以原代小鼠肝细胞为受试细胞,以细胞内磷酸化组蛋白H2AX（γH2AX）表达改变为检测指标的体外检测化学物遗传毒性的实验方法。方法采用改良的两步胶原酶灌注法分离获取小鼠肝细胞,并运用三明治法体外培养肝细胞。选择4种已知的遗传毒物平阳霉素、苯并芘、苯乙烯和氧化苯乙烯及2种非遗传毒物硫唑嘌呤和环孢素A作为受试物,用受试物0~40μmol·L-1处理原代培养肝细胞0~24 h,CCK-8法检测细胞毒性,并用流式细胞术检测γH2AX的表达水平。结果利用所建立的方法筛选上述4种遗传毒物均获得阳性结果,2种非遗传毒物均呈阴性反应。直接遗传毒物平阳霉素和氧化苯乙烯作用3 h,间接遗传毒物苯并芘和苯乙烯作用6 h时,γH2AX表达量最高（P〈0.01）。4种遗传毒物处理组在最适时间点（直接遗传毒物：3 h;间接遗传毒物：6 h）及最适作用浓度（10μmol·L-1）诱发细胞γH2AX的表达水平依次为25.7,18.4,12.4和14.2（平均荧光强度）,分别为DMSO溶剂对照组的18,12,8和10倍（P〈0.01）,且γH2AX的表达水平与遗传毒物浓度呈显著正相关（P〈0.01）。非遗传毒物硫唑嘌呤和环孢素A处理组与DMSO溶剂和空白对照组相比,γH2AX的水平均无明显变化。结论利用原代肝细胞模型检测γH2AX表达水平可在无S9的情况下有效区分遗传毒物与非遗传毒物和直接遗传毒性与间接遗传毒性。γH2AX表达水平可作为鉴别遗传毒物与非遗传毒物的有效参考指标。
- 孟涛苗盼盼纪玉青牛勇宾萍戴宇飞郑玉新
- 关键词：遗传毒物肝细胞原代培养组蛋白类流式细胞术
- TDI职业暴露所导致的淋巴细胞亚群和细胞因子及趋化因子的变化
- 【目的】二异氰酸甲苯酯（Toluene diisocyanate,TDI）是一种工业化学物,职业接触可引起哮喘。为探讨TDI致哮喘的早期效应标志物,本研究采用横断面分子流行病学设计,分析TDI暴露所导致的作业工人淋巴细胞...
- 苗盼盼孟涛贾强牛勇纪玉青杨墨巨睿邵华郑玉新戴宇飞
- 关键词：二异氰酸甲苯酯淋巴细胞亚群细胞因子
- 文献传递
- 甲苯二异氰酸酯职业暴露者外周血淋巴细胞亚群分析被引量：4
- 2017年
- [目的]研究甲苯二异氰酸酯(TDI)对暴露工人外周血淋巴细胞亚群的影响,为探讨TDI的免疫毒性提供依据。[方法]采用横断面研究方式,以整群抽样法选取甘肃省TDI作业工人53名为暴露组,选取同地区非职业性TDI暴露工人55名为对照组。气相色谱法检测作业环境中TDI水平和尿中代谢产物甲苯二胺(TDA)浓度。应用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群水平,并结合血常规中淋巴细胞总数的结果,计算CD3+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、B细胞和NK细胞绝对数。[结果]暴露组尿中总TDA浓度M(P_(25)~P_(75))为15.86(7.91~29.99)μg/L。淋巴细胞亚群分析,对照组的淋巴细胞、CD3+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、B细胞和NK细胞分别为1.80(1.40~2.30)×10~9/L、(1.24±0.35)×10~9/L、0.65(0.53~0.75)×10~9/L、0.47(0.35~0.57)×10~9/L、0.18(0.13~0.23)×10~9/L和0.23(0.19~0.31)×10~9/L。暴露组淋巴细胞、CD8^+T细胞和NK细胞分别为1.92(1.59~2.46)×10~9/L、0.54(0.40~0.67)×10~9/L和0.45(0.35~0.61)×10~9/L,暴露组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。依据尿中总TDA浓度中位数进行分组,低暴露组淋巴细胞、CD3+T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞和NK细胞分别为2.13(1.84~2.45)×10~9/L、(1.42±0.34)×10~9/L、0.70(0.58~0.83)×10~9/L、0.60(0.53~0.69)×10~9/L和0.48(0.33~0.64)×10~9/L,高于对照组(P<0.05);高暴露组NK细胞为0.43(0.32~0.55)×10~9/L,高于对照组(P<0.05)。所有指标在低、高暴露组间差异无统计学意义(P>0.05)。暴露组TDI暴露工龄与淋巴细胞亚群的变化无相关(P>0.05)。[结论]TDI暴露可导致作业工人外周血淋巴细胞亚群发生变化,提示TDI职业暴露者免疫功能受到影响。
- 沈美丽梅良英孟涛贾强苗盼盼牛勇叶萌陈学磊于功昌邵华戴宇飞
- 关键词：甲苯二异氰酸酯淋巴细胞亚群CD8+T细胞NK细胞
- 氯乙酸致人支气管上皮细胞16HBE的凋亡机制研究被引量：3
- 2016年
- [目的]探讨氯乙酸对人支气管上皮细胞16HBE氧化应激以及线粒体凋亡通路的影响。[方法]以16HBE细胞为研究对象,将实验分为对照组和0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的氯乙酸染毒组,染毒24 h后检测细胞存活率、凋亡率及超氧化物歧化酶(SOD)活力;染毒0.25、0.5、1、8、24 h后检测细胞内活性氧(ROS)水平;染毒8、24 h后检测线粒体膜电位以及Bcl-2和Bax m RNA表达水平。用1.5、2.5 mmol/L氯乙酸染毒24 h后,检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、Caspase-9、Caspase-3、PARP-1凋亡相关蛋白的表达水平。[结果]随氯乙酸染毒浓度升高,染毒24 h后细胞存活率、SOD活力和线粒体膜电位呈剂量依赖性下降(r=-0.902、-0.732和-0.863,P<0.05),而细胞凋亡率呈剂量依赖性上升(r=0.914,P<0.05)。与对照组相比,1.5、2.0、2.5 mmol/L剂量组细胞存活率分别降低了12%、20%和30%,SOD活力分别降低了9%、21%和30%,线粒体膜电位分别降低了11%、18%和24%,而细胞凋亡率分别是对照组的3、4和7倍。各剂量组细胞内ROS水平呈先升高后降低的趋势,在染毒0.5 h达到峰值,与对照组相比分别增加了15%、35%、48%和55%(P<0.05),染毒1 h后反而降低。染毒各时间点染毒浓度与ROS水平均存在剂量-效应关系(r=0.756、0.893、0.735、0.667和0.653,均P<0.05);相关性分析表明染毒24 h后ROS水平与细胞凋亡率呈明显正相关(r=0.826,P<0.05)。染毒8、24 h两个时间点,染毒浓度与Bcl-2、Bax m RNA表达量存在剂量效应关系(8 h:r=-0.634和0.754,24 h:r=-0.773和0.823,P<0.05);与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度≥1.5 mmol/L时Bcl-2 m RNA和蛋白表达明显下调,而Bax m RNA和蛋白表达明显上调(P<0.05);相关性分析表明Bax m RNA表达与ROS水平具有正相关(r=0.886和0.824,P<0.05),而Bcl-2m RNA表达与ROS水平具有负相关(r=-0.862和-0.815,P<0.05)。与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度2.5 mmol/L时细胞色素C、活化的Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量显著增加,�
- 孟涛苗盼盼杨墨贾强戴宇飞
- 关键词：氯乙酸氧化应激活性氧凋亡线粒体通路
- 镍职业暴露对作业工人外周血淋巴细胞亚群的影响
- 2018年
- [目的]探讨镍职业暴露对作业工人外周血淋巴细胞亚群的影响。[方法]选择70名镍作业工人为暴露组,126名非镍作业工人为对照组,使用硫酸镍斑贴实验将暴露组分为斑贴阴性组和斑贴阳性组。乙炔-空气火焰原子吸收光谱法检测暴露工厂车间空气中镍浓度,电感耦合等离子体质谱法及外标法获得皮肤暴露镍浓度,分光光度法检测研究对象尿镍浓度。EDTA抗凝静脉血做常规分析,流式细胞技术检测外周血淋巴细胞亚群百分比,并结合二者获得外周血淋巴细胞亚群绝对值。t检验比较暴露组与对照组、斑贴阴性组与斑贴阳性组淋巴细胞亚群等指标的差异,Pearson相关分析尿镍水平、暴露工龄与淋巴细胞亚群等指标的相关性,一般线性模型分析吸烟与暴露的交互作用。[结果]暴露组作业工人斑贴阳性者共14人(阳性率20%),尿镍水平[M(P_(25),P_(75))]高于对照组[13.60(7.35,28.76)vs 6.02(3.93,10.97)μg/L,P=0.000],外周血白细胞、中性粒细胞及CD4^+/CD8^+高于对照组[分别为(7.03±1.67)×10~9/L vs(6.23±1.35)×10~9/L,(4.54±1.45)×10~9/L vs(3.71±1.07)×10~9/L,(1.68±0.72)vs(1.27±0.43),均P<0.05],CD8^+T细胞、NK细胞和血小板低于对照组[分别为(0.52±0.26)×10~9/L vs(0.60±0.22)×10~9/L,(0.34±0.18)×10~9/L vs(0.45±0.25)×10~9/L,(200.66±69.01)×10~9/L vs(229.85±51.48)×10~9/L,均P<0.05]。总人群CD4^+/CD8^+与尿镍水平呈正相关(r=0.152,P=0.037);未发现暴露工龄长短与外周血淋巴细胞亚群等指标存在相关关系(P>0.05)。[结论]镍职业暴露可致作业工人外周血CD4^+/CD8^+增高,CD8^+T细胞、NK细胞降低。
- 李云霞孟涛梅良英苗盼盼沈美丽戴宇飞
- 关键词：淋巴细胞亚群CD8+T细胞NK细胞
- 甲苯二异氰酸酯职业暴露工人肺功能改变与血清促炎细胞因子的相关性分析被引量：1
- 2020年
- 目的分析甲苯二异氰酸酯(TDI)职业暴露工人肺功能的改变与血清促炎细胞因子的相关性,探索TDI呼吸系统毒作用的效应评价指标。方法于2014年10月,以中国西部地区某TDI生产厂中从事TDI合成工序、提纯工序、包装工序及上述生产过程的巡检工序的61名男性作业工人为TDI暴露组,主要经吸入蒸汽和气溶胶暴露;以该工厂中不接触TDI及其他已知致敏性化学物的62名男性企业管理人员作为对照组,与暴露组工人年龄匹配。问卷调查获得性别、工龄、年龄、职业史、暴露工龄等信息,检测工人肺功能指标[第一秒用力呼吸容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC]及血清中细胞因子[白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α等]水平;收集周末班后尿,测定尿液中TDI的代谢物甲苯二胺(TDA)浓度作为内暴露指标。采用Spearman秩相关分析细胞因子与肺功能指标的相关性;采用多重线性回归分析肺功能指标、细胞因子随TDI暴露浓度和时间变化的趋势。结果暴露组和对照组工人年龄M(P5~P95)分别为36.5(24.0~51.0)和38.0(24.0~50.0)岁,暴露组工龄M(P5~P95)为6.94(0.97~26.33)年,尿液TDA浓度M(P5~P95)为15.56(2.28~112.16)ng/ml。与对照组比较,暴露组肺功能3项指标FVC、FEV1、FEV1/FVC以及血清中IL-8和TNF-α水平均明显降低(P值均<0.05)。随着暴露浓度的增加和暴露时间的延长,血清TNF-α水平及FVC、FEV1均呈降低的趋势,且呈剂量-效应和时间-效应关系(P趋势值均<0.05)。血清IL-8、TNF-α均与FVC、FEV1、FEV1/FVC呈正相关(P值均<0.05)。结论TDI暴露工人血清炎性因子IL-8和TNF-α水平与肺功能指标有关联,可作为TDI致呼吸系统毒作用的早期效应评价指标。
- 牛勇苗盼盼王俊程孟涛贾强沈美丽宾萍段化伟邵华戴宇飞
- 关键词：呼吸功能试验细胞因子类甲苯二异氰酸酯
- 慢性氯乙酸接触对作业工人肺功能及淋巴细胞亚群的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨慢性氯乙酸接触对作业工人肺功能及血液学指标的影响，为氯乙酸作业工人的健康监护提供参考指标。方法采用横断面分子流行病学设计，选择121名氯乙酸作业工人作为接触组，69名非职业性氯乙酸接触工人为对照组。用便携式肺功能仪对工人的肺功能进行检测，流式细胞术检测研究对象外周血淋巴细胞亚群水平，利用线性回归模型校正研究对象的年龄、饮酒状况、及BMI指数后，比较暴露组与对照组间肺功能指标及淋巴细胞亚群的差异。结果男性和女性作业工人氯乙酸接触组FEV。dFVC与对照组相比显著降低，差异有统计学意义（P值均〈0．01）。与对照组比较，男性作业工人氯乙酸接触组的CD8＋T细胞和单核细胞明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。按吸烟分层后，与对照组比较，只有吸烟者氯乙酸接触组的CD8＋T细胞和单核细胞水平明显降低，差异有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05），而在非吸烟者中，氯乙酸接触组和对照组各项血液学指标均无明显改变，差异无统计学意义（P〉0．05）。未发现氯乙酸接触对女性作业工人血细胞计数和淋巴细胞亚群的影响。结论慢『生氯乙酸接触导致作业工人肺功能下降及免疫功能抑制，男性及吸烟者是免疫抑制效应的敏感人群。
- 孟涛贾强苗盼盼沈美丽牛勇戴宇飞
- 关键词：氯乙酸流行病学研究淋巴细胞亚群呼吸功能试验
