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刘晓明

作品数:19 被引量:68H指数:5
供职机构:宁夏医科大学更多>>
发文基金:宁夏回族自治区研究生教育创新计划项目国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 14篇中文期刊文章

领域

  • 14篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇细胞
  • 5篇间充质干细胞
  • 5篇干细胞
  • 5篇充质干细胞
  • 4篇人胎
  • 4篇人胎盘
  • 4篇生物膜
  • 3篇胎盘
  • 3篇间充质
  • 2篇直肠
  • 2篇胎儿
  • 2篇念珠
  • 2篇念珠菌
  • 2篇旁分泌
  • 2篇耐药
  • 2篇结肠
  • 2篇结肠癌
  • 2篇结直肠
  • 2篇菌素
  • 2篇环孢菌素

机构

  • 14篇宁夏医科大学
  • 1篇南京明基医院

作者

  • 14篇刘晓明
  • 9篇魏军
  • 4篇陈冬梅
  • 4篇潘红超
  • 3篇朱永朝
  • 2篇梁雪云
  • 2篇马晓娜
  • 2篇李海
  • 2篇李玉奎
  • 2篇杨银学
  • 2篇韩飞
  • 2篇张玉洁
  • 1篇严秀蕊
  • 1篇刘淑丹
  • 1篇杨勇
  • 1篇李刚
  • 1篇王利新
  • 1篇贾伟
  • 1篇马晓薇
  • 1篇王勇

传媒

  • 4篇中国病原生物...
  • 2篇中华医院感染...
  • 2篇细胞与分子免...
  • 2篇宁夏医科大学...
  • 1篇安徽医科大学...
  • 1篇临床检验杂志
  • 1篇基础医学与临...
  • 1篇中国组织工程...

年份

  • 1篇2018
  • 5篇2017
  • 7篇2016
  • 1篇2015
19 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
白色假丝酵母菌感染的临床分布与药敏及生物膜类型分析被引量:5
2016年
目的探讨白色假丝酵母菌感染的临床分布与药敏率以及产膜能力,为临床合理使用抗真菌药物提供科学依据。方法收集2013年1月-2015年8月住院患者标本分离出7 612株真菌,真菌分离培养按《全国临床检验操作规程》进行,采用法国生物梅里埃公司全自动微生物VITEK-2Compact分析仪鉴定到种,体外药敏试验采用纸片K-B法,采用WHONET 5.6软件进行统计分析,通过结晶紫染色法对白色假丝酵母菌进行生物膜定量分析。结果分离的真菌中白色假丝酵母菌1 366株,占17.9%;白色假丝酵母菌主要分离自呼吸科389株及急诊科241株,分别占28.5%及17.6%;白色假丝酵母菌的标本来源主要以痰液最多,其次为尿液及分泌物,分别占68.3%、10.5%及5.8%;白色假丝酵母菌对两性霉素B、伏立康唑、氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑的敏感率分别为100.0%、100.0%、99.9%、99.8%、98.0%;标准菌株SC5314为强产生物膜,临床分离的1 366株白色假丝酵母菌中弱产生物膜325株、中等产生物膜243株、强产生物膜798株。结论白色假丝酵母菌对两性霉素B、伏立康唑、氟康唑、氟胞嘧啶、伊曲康唑依然保持较高的敏感性,白色假丝酵母菌的临床分布不同,临床治疗应合理选择抗真菌药物,同时加强对真菌耐药性的监测有助于减少耐药菌株的产生,也推动了生物膜产生能力与白色假丝酵母菌的耐药机理及致病性之间关系的进一步研究。
商安全吴健潘红超王微微刘晓明魏军
关键词:真菌白色假丝酵母菌生物膜耐药性
人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清的抗氧化活性分析被引量:6
2017年
背景:目前关于间充质干细胞的研究大多集中于其免疫调节功能,而关于细胞和培养上清的其抗氧化能力的研究较为少见。目的:观察人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下,其上清的抗氧化能力。方法:采用无血清培养基培养胎儿侧胎盘间充质干细胞,分别于48 h收集P2-P6代细胞培养上清。在空白培养基中添加维生素C 100μmol/L作为阳性对照。检测P2-P6代人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清的总抗氧化能力、清除活性氧自由基的能力和抗氧化酶活性。结果与结论:(1)抗氧化能力:各代次人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的抗氧化能力,且不同代次间的上清具有一定的差异,其中总抗氧化能力与40-80μmol/L的维生素C相当,各代次上清均具有一定的清除二苯基苦基苯肼自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基等自由基清除能力;(2)抗氧化酶活性分析:各代次间的人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清中均可以检测到一定水平的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性;(3)结果提示,在无血清条件下培养胎儿侧胎盘间充质干细胞的上清具有一定的抗氧化能力和抗氧化酶的活性。人胎盘胎儿侧间充质干细胞的抗氧化能力与其旁分泌机制有关,但其中的抗氧化成分及分子机制有待进一步的研究。
付雪张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
关键词:干细胞胎盘间充质干细胞培养上清抗氧化旁分泌
CXCR3B在结肠癌组织中的表达及对结肠癌LOVO细胞株迁移能力的影响被引量:2
2017年
目的探讨趋化因子受体CXCR3B(CXC型趋化因子受体3变体B)在结肠癌组织中的表达及对结肠癌LOVO细胞株迁移能力的影响。方法常规收取结直肠癌及癌旁组织标本,用免疫组织化学(IHC)染色方法检测CXCR3B的表达;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测正常肠上皮细胞株NCM460及结肠癌细胞株LOVO中的CXCR3B m RNA表达,过表达CXCR3B-RFP慢病毒感染LOVO细胞株,划痕实验及transwell实验检测LOVO细胞株的迁移变化。结果免疫组织化学结果显示在结直肠癌旁组织中CXCR3B的表达显著高于癌组织(P<0.001);NCM460细胞中CXCR3B m RNA表达高于LOVO细胞表达(P<0.01)。划痕实验及transwell迁移实验显示过表达CXCR3B组(LOVO-CXCR3B)细胞迁移较阴性对照组(LOVO-NC)低(P<0.01)。结论人结直肠癌组织中CXCR3B低表达,过表达CXCR3B可抑制结肠癌细胞株LOVO的迁移。
李海荣诗阔许佳义陈冬梅刘晓明杨银学
关键词:结直肠癌迁移LOVO细胞株
群体密度感应分子对鲍曼不动杆菌生物被膜形成及菌毛集合系统的影响被引量:1
2017年
目的探讨群体密度感应系统小分子N-3-oxo-octanoyl-L-Homoserine lactone(3-oxo-C8-AHL)对鲍曼不动杆菌ATCC17978菌株菌毛集合系统基因表达以及生物被膜形成能力的影响。方法通过细菌运动性试验及生物被膜定量试验测定3-oxo-C8-AHL对ATCC17978生物膜形成的影响;结晶紫试验观察ATCC17978生物被膜形成的结构;荧光定量PCR方法测定3-oxo-C8-AHL对ATCC17978CusABCDE、BfmS、BfmR基因相对表达量的影响。结果对照组与3-oxo-C8-AHL组ATCC17978运动直径分别为(3.0±0.1)cm和(1.0±0.1)cm,差异有统计学意义(t=34.652,F=0.313,P<0.05);生物膜形成试验测得3-oxo-C8-AHL组和对照组A值分别为0.07733和0.099,差异有统计学意义(t=-7.941,F==2,P<0.05);结晶紫染色观察3-oxo-C8-AHL组细菌不易聚集形成生物被膜,而对照组易聚集、成膜;荧光定量PCR测定了3-oxo-C8-AHL组菌毛集合系统CusABCDE基因相对表达量较对照组下降34.1%以上(P<0.05),BfmS和BfmR基因表达较对照组分别下调44.1%和38.2%(P<0.05)。结论菌毛集合系统基因与生物被膜形成密切相关,群体密度感应系统小分子3-oxo-C8-AHL对菌毛集合系统等相关基因的表达具有下调作用,从而抑制鲍曼不动杆菌的运动,致使生物被膜结构形成缓慢。
乔霞杨勇刘晓明魏军
关键词:鲍曼不动杆菌生物被膜
肿瘤环境下脂肪间充质干细胞旁分泌因子促进结肠癌细胞侵袭被引量:7
2016年
目的确定肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞(h AMSCs)的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系。方法体外分离培养AMSCs,收集培养上清液制备条件培养基,用于培养HCT116细胞。利用Transwell培养板共培养AMSCs与HCT116细胞。通过检测穿透人工基底胶(Matrigel胶)的能力比较两种培养条件下HCT116细胞侵袭能力的差异。实时荧光定量PCR检测HCT116细胞上皮间质转化(EMT)相关基因的表达变化。ELISA法检测共培养后AMSCs基因表达和旁分泌因子表达变化。结果结肠癌细胞系HCT116与AMSCs的Transwell共培养系统中,HCT116细胞的侵袭能力较AMSCs条件培养液培养显著增强。同时结肠癌细胞系HCT116构成的肿瘤微环境也影响了AMSCs旁分泌因子表达的变化,其中成纤维生长因子10(FGF10)、血管内皮生长因子C(VEGFC)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)的表达较正常培养条件下显著上调。结论肿瘤微环境影响下的AMSCs旁分泌因子表达改变,这些变化能够增强结肠肿瘤细胞的侵袭能力。
陈冬梅刘淑丹马会明刘晓明梁雪云魏军
关键词:脂肪间充质干细胞结肠癌
母体和胎儿来源的人胎盘间充质干细胞抑制小鼠皮肤移植免疫排斥作用的比较被引量:4
2015年
目的研究母体来源的人胎盘间充质干细胞(m PMSC)、胎儿来源的人胎盘间充质干细胞(f PMSC)抑制不同品系小鼠皮肤移植免疫排斥作用的差异及其机制。方法分离两种来源的细胞;流式细胞术鉴定两种来源的细胞及其差异;MTT法检测其增殖能力;利用CD200抗体中和f PMSC的CD200受体;用携带CD200基因及其空载体的腺病毒感染m PMSC。将60只C57BL/6小鼠随机分为6组,每组10只:PBS组、m PMSC组、f PMSC组、f PMSC联合抗CD200抗体组、m PMSC联合CD200腺病毒组、m PMSC联合腺病毒空载体组。以ICR乳鼠为供体,C57BL/6小鼠为受体,建立异品系皮肤移植免疫排斥模型,并将上述细胞经尾静脉分别注入各组模型小鼠体内。观察小鼠状态及移植皮肤排斥情况。反转录PCR检测小鼠脾脏中白细胞介素17(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-12的mRNA水平,ELISA检测小鼠血液中IL-17、IFN-γ、TNF-α、IL-12的水平。结果 f PMSC的CD200阳性率明显高于m PMSC。m PMSC、f PMSC组和PBS组比较,f PMSC组和m PMSC、f PMSC联合抗CD200抗体组比较,m PMSC联合CD200腺病毒组和m PMSC联合腺病毒空载体组比较,前者的移植皮肤的存活时间均明显延长。m PMSC和f PMSC组IL-17、IFN-γ和TNF-α的表达量和PBS组比较明显降低;与f PMSC联合抗CD200抗体组相比,f PMSC组IL-17、IFN-γ、TNF-α和IL-12的表达量明显降低;与m PMSC联合腺病毒空载体组相比,m PMSC联合CD200腺病毒组IL-17、IFN-γ和TNF-α的表达量明显降低。结论 f PMSC抑制小鼠皮肤移植免疫排斥的作用优于m PMSC;f PMSC高表达CD200可更强的抑制免疫细胞的增殖、分化以及成熟等,从而更有效的抑制IL-17、IFN-γ、TNF-α等细胞因子的分泌;f PMSC更适于作为临床上抑制皮肤移植免疫排斥作用的种子细胞。
郝贵亮王立斌陈冬梅梁雪云王琼朱永朝马晓娜刘晓明李玉奎
关键词:胎盘间充质干细胞CD200皮肤移植免疫排斥
人胎盘胎儿来源间充质干细胞通过下调髓样分化因子88和转化生长因子β信号通路减轻小鼠肺纤维化被引量:2
2016年
目的探讨无血清培养人胎盘胎儿来源间充质干细胞(hf PMSC)对博来霉素所致小鼠肺纤维化的疗效及分子机制。方法培养并采用流式细胞术鉴定hf PMSC,取无特定病原体级雄性6周龄C57BL/6J小鼠随机分为博来霉素组、hf PMSC治疗组和阴性对照组。博来霉素组和hf PMSC治疗组分别经气管内注入50μL博莱霉素(1 g/L)制备肺纤维化模型,阴性对照组经气管内注入50μL PBS。hf PMSC治疗组,在造模3 d后,经尾静脉注射200μL含5×105个hf PMSC。第21天全部处死各实验组小鼠,取肺组织进行HE染色、Masson染色以及胶原蛋白含量测定;提取各组肺组织总蛋白,Western blot法检测髓样分化因子88(My D88)、转化生长因子β(TGF-β)的表达;ELISA检测各组血清中TGF-β的浓度。结果所培养具有典型的间充质干细胞形态特征并表达表面标志分子CD73、CD90和CD105,而不表达CD14、CD34和CD45。与博来霉素组比较,HE和Masson染色显示,hf PMSC治疗组可显著性降低肺组织纤维化程度、降低肺组织胶原蛋白含量以及My D88和TGF-β蛋白水平。结论hf PMSC可通过My D88下调TGF-β的表达减轻小鼠肺纤维化。
陶金李庆伦马晓薇韩飞刘晓明魏军朱永朝
关键词:人胎盘间充质干细胞肺纤维化
亚胺培南耐药的鲍氏不动杆菌OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜的研究被引量:6
2016年
目的通过对临床分离的亚胺培南耐药和敏感鲍氏不动杆菌OXA、AdeABC、CarO基因及生物膜形成分布进行调查,进一步分析鲍氏不动杆菌对亚胺培南的耐药机制。方法对2014年11月-2015年10月医院临床分离106株亚胺培南耐药和102株亚胺培南敏感的鲍氏不动杆菌运用PCR技术分别进行OXA、AdeABC、CarO基因的检测;采用96孔微量滴定板法体外构建生物膜并对其进行定量。结果在所有检测菌株中亚胺培南耐药和敏感菌株OXA-23检出率分别为99.1%和2.9%,差异有统计学意义(P<0.05);OXA-24基因仅在1株耐药菌株中检出;OXA-51基因均为阳性,而OXA-58基因均为阴性;而AdeABC基因在耐药和敏感菌株分布具有较大差异。结论 OXA-23基因是最流行的基因,是医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌的最主要OXA亚型;临床鲍氏不动杆菌所引发的感染多数与生物膜的形成有关,对医院临床治疗提供了有效的科学依据。
潘红超商安全张康见刘晓明王利新刘红军赖有国魏军
关键词:鲍氏不动杆菌OXA生物膜
双酶切法构建CRISPR-Cas9载体系统的研究
2018年
目的以pet41a质粒为载体骨架,通过酶切连接法构建crispr-cas9载体系统,建立一种简单有效的基因编辑载体,为研究细菌耐药基因的敲除提供方法。方法选择质粒pet41a、pwt-cas9和pgRNA,分析核酸序列,选择合适酶切位点。使用XhoI和BgiII两种限制性内切酶分别酶切pet41a和pwt-cas9,形成带有相同粘性末端的线性载体片段,回收并用T4DNA连接酶连接,连接产物转化DH5α感受态细胞,转化菌涂布含卡那霉素的固体LB培养基平板进行阳性单克隆筛选并测序,构建的质粒命名为pet41-cas9。使用BgiII和XbaI两种限制性内切酶分别酶切pet41-cas9和pgRNA,经回收纯化、连接和转化后筛选阳性单克隆菌落并测序,重组质粒命名为pet41a-cas9-gRNA。分别将重组质粒pet41-cas9和pet41a-cas9-gRNA转化BL-21(DE3),IPTG诱导后提取蛋白进行SDS-PAGE分析。结果测序证实质粒pet41-cas9、pet41a-cas9-gRNA连接正确,载体构建成功。重组质粒粒转染DE3后经IPTG诱导4h,表达相对分子质量为160×103的重组蛋白,与cas9蛋白理论分子质量相符。结论成功构建CRISPR-Cas9载体系统质粒pet41acas9-gRNA并表达重组cas9蛋白,为细菌基因的编辑研究奠定了实验基础。
杨勇乔霞刘晓明魏军
关键词:限制性内切酶
群体感应分子Farnesol联合CSA对白色念珠菌生物膜作用的实验研究被引量:3
2016年
目的探讨群体感应分子法尼醇(Farnesol)联合钙调神经磷酸酶抑制剂环孢菌素A(CSA)对白色念珠菌的生物膜形成、形态转换、生长及活性、耐药性、凋亡反应和氧化应激反应的作用及其相关机制。方法体外构建生物膜状态白色念珠菌,分别经CSA、Farnesol、Farnesol联合CSA处理后,用qRT-PCR法检测生物膜状态白色念珠菌中生物膜形成过程中的相关基因CDR1、CEK1、CPH1、EFG1、ERG11、GPR1、HAT1、MDR1、HWP1、ALS3、TUP1mRNA表达水平的变化。结果白色念珠菌均具有不同程度的产膜能力,且单用CSA、Farnesol抗真菌药物对白色念珠菌生物膜的抑制率很低,而联合使用时,受试菌生物膜生长状态受到明显抑制。从临床血流感染中分离获得1株强产生物被膜白色念珠菌,命名为CA NX05;经不同药物组处理后生物膜状态白色念珠菌中的生物膜菌丝形成相关基因CEK1、CPH1、EFG1、ERG11、GPR1、HAT1、HWP1、ALS3、TUP1与其耐药性相关基因CDR1、MDR1的mRNA表达量与空白处理组相比均显著降低(F_(CEK1)=15.725,F_(CPH1)=6.230,F_(EFG1)=87.817,F_(ERG11)=17.527,F_(GPR1)=21.793,F_(HAT1)=65.318,F_(HWP1)=550.531,F_(ALS3)=10.514,F_(TUP1)=16.580,F_(CDR1)=8.089,F_(MDR1)=7.228;F>P,P<0.05)。结论群体感应分子Farnesol联合CSA处理较CSA及Farnesol处理能更有效地抑制白色念珠菌生物膜的形成,从而使其对抗真菌药物的敏感性增加,为临床合理使用抗真菌药物提供了科学导向。
商安全魏军潘红超张玉洁刘晓明吴健王微微陆文英
关键词:白色念珠菌生物膜环孢菌素A
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