杨潇
- 作品数:19 被引量:74H指数:5
- 供职机构:武汉大学人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省卫生厅中医药中西医结合科研项目中华医学会临床医学科研专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- lncRNA作为ceRNA在卵巢癌中的研究进展被引量:5
- 2019年
- 人类基因组中大部分为非编码区,转录产生非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)。ncRNA虽然不能翻译成蛋白,但可通过对mRNA直接或间接地调控影响人体生理、病理过程。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是ncRNA的重要分类,越来越多的研究表明lncRNA参与癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和耐药等,影响肿瘤的发生和发展,lncRNA可作为肿瘤早期诊断、治疗和判断预后的潜在靶向标记物。竞争性内源RNA(competitive endogenous RNA,ceRNA)假说的提出使人们对肿瘤发生机制有了进一步的了解。在ceRNA的形成中,lncRNA有着重要作用。近年lncRNA作为ceRNA在卵巢癌中的研究日益增多。本文就lncRNA形成的ceRNA网络在卵巢癌的发生发展过程中的研究进展进行综述。
- 张莉刘诗意王艳清杨潇程艳香
- 关键词:卵巢肿瘤长链非编码RNA微RNAS
- DNA甲基化与卵巢癌耐药关系的研究进展被引量:2
- 2018年
- 卵巢癌为女性常见的恶性肿瘤之一,其恶性程度高,预后差。目前卵巢癌患者的化疗策略是基于铂类和紫杉醇的组合。虽然大多数卵巢癌患者对化疗敏感,但仍有许多初始反应者最终发展为化疗耐药。以往的研究认为癌基因激活、抑癌基因失活主要是基因突变、缺失导致的DNA序列改变。而现有研究表明许多肿瘤的重要基因并未发生突变、缺失,基因表达的异常主要通过DNA甲基化实现,且DNA甲基化和其他表观遗传修饰可能是可逆的。这就使得表观遗传因子成为疾病预防和对化疗药物重获敏感性的候选者。大量研究也证实,在耐药和敏感卵巢癌细胞中DNA甲基化水平差异表达。亦有研究使用DNA甲基化酶抑制剂抑制DNA甲基化,以期达到逆转卵巢癌细胞耐药的目的。现综述DNA甲基化与卵巢癌耐药之间的关系。
- 王艳清杨潇鲜舒张莉程艳香
- 关键词:DNA甲基化卵巢肿瘤表观遗传
- LncRNA在宫颈癌组织中的表达谱变化及意义被引量:6
- 2017年
- 目的研究宫颈癌组织中lncRNA的表达变化情况,为探讨lncRNA参与宫颈癌发生与发展提供分子依据。方法取20例宫颈癌患者的宫颈癌组织和20例正常宫颈组织,应用高通量lncRNA芯片技术分别检测两组中lncRNA表达谱的变化情况,并应用qRT-PCR技术对结果加以验证。结果与正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中共有30586条lncRNA和13982条mRNA存在差异性表达,通过GO聚类分析表明,上调mRNA和下调mRNA分别参与多种不同的生物过程。通过进一步分析发现变化差异性最明显的10个lncRNA可能通过影响相应的mRNA来发挥其生物学功能。qRT-PCR结果与芯片检测结果一致,提示4个lncRNA(BC008359,RP11-521B24.5,BRE-AS1,和RP11-229P13.15)在宫颈癌组织中发挥重要作用。结论本实验阐述了宫颈癌组织中lncRNA的变化情况,为探讨lncRNA参与宫颈癌发生与发展以及治疗提供新的分子依据。
- 陈干涛杨潇程艳香
- 关键词:宫颈癌组织
- HPV16型E6蛋白单克隆抗体制备及检测被引量:1
- 2016年
- 目的制备人乳头瘤状病毒(human papillomavirus,HPV)16型E6蛋白单克隆抗体并对其进行检测。方法 15只Balb-c小鼠分为3组,各5只。设计3条HPV16E6抗原多肽分别对3组小鼠进行免疫,筛选得到对B细胞表位有较高活性的线性多肽HPE601,并用该组的小鼠脾脏制备杂交瘤细胞。采用间接ELISA法对小鼠血清进行阳性克隆筛选和检测抗体效价,采用考马斯亮蓝染色鉴定抗体纯度,采用标准曲线计算抗体浓度,采用Western blot法检测并采用间接免疫荧光法验证纯化E6抗体对Caski、Hela和正常宫颈上皮细胞核蛋白特异性结合情况。行宫颈组织活检患者20例,其中HPV16型宫颈组织7例,HPV18型宫颈组织6例和正常宫颈组织7例,采用免疫荧光法检测单克隆抗体对3种组织的检出率。结果制备得到单克隆抗体Whu001,经鉴定抗体纯度较好,该克隆能特异性识别HPV16型E6蛋白;Whu001对HPV16型组织的检出率(80%)明显高于HPV18型宫颈组织(15%)和正常宫颈组织(0),差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功筛选出了针对HPV16E6抗原的单克隆抗体,其对HPV16的诊断具有特异性,为在蛋白水平上检测HPV E6蛋白提供了新途径。
- 杨潇程艳香
- 关键词:单克隆抗体
- LncRNA在子宫脱垂组织中表达谱的变化被引量:2
- 2016年
- 目的筛选出与子宫脱垂相关的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),为探讨lncRNA参与子宫脱垂的发生与发展提供实验依据。方法选取2015年1~6月在武汉市人民医院进行手术的6例子宫脱垂组织和6例未脱垂的正常子宫组织,应用高通量lncRNA芯片技术检测两组子宫组织中lncRNA表达谱的变异。结果分析两组lncRNA表达谱的变化,发现与正常子宫组织相比,子宫脱垂组织中的lncRNA和mRNA表达量均表现出上调和下调。上调mRNA(Fold〉2)参与了多细胞生物过程、信号传导和细胞交流等生物过程,下调mRNA(Fold〉2)参与了细胞器形成、细胞周期和细胞分裂等生物过程。通过GO聚类分析着重分析了变化差异性最明显的10个lncRNA,寻找出了与其变化密切相关的mRNA。通过荧光定量聚合酶链反应对4个变化最明显的lncRNA(BC008359、RP11-521B24.5、BRE-AS1和RP11-229P13.15)进一步验证,与芯片检测结果一致。结论子宫脱垂组织中lncRNA的变化情况说明,4个变化最明显的lncRNA(BC008359、RP11-521B24.5、BRE-AS1和RP11-229P13.15)在子宫脱垂组织中发挥重要作用,为探讨lncRNA参与子宫脱垂的发生与发展提供实验依据和理论基础。
- 程艳香陈干涛杨潇洪莉
- 关键词:子宫脱垂荧光定量PCR
- 脂筏在Toll样受体4促进宫颈癌低氧诱导因子-1α高活性中的作用机制被引量:3
- 2017年
- 目的探讨脂筏在Toll样受体(TLR)4促进宫颈癌低氧诱导因子(HIF)-1α高活性中的作用及机制。方法采用体外细胞实验,对按照计算机随机法分为4组宫颈癌Siha细胞,分别采用4种方法进行处理:对于甲基-β-环糊精(MβCD)+脂多糖组进行MβCD处理及脂多糖刺激,siTLR4+脂多糖组进行siTLR4转染及脂多糖刺激,空白对照组不进行上述处理及刺激,脂多糖对照组仅进行脂多糖刺激。对4组宫颈癌Siha细胞,进行以下项目检测和观察:1采用MTT比色法测定宫颈癌Siha细胞悬液光密度(OD)值,并绘制Siha细胞生长抑制曲线,通过软琼脂集落培养实验,观察各组Siha细胞集落形成情况。2采用免疫细胞化学染色法和Western印迹法检测宫颈癌Siha细胞内HIF-1α蛋白阳性表达及含量变化。3光泽精化学发光法检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性,DCFH-DA探针检测宫颈癌Siha细胞内活性氧含量。4采用免疫荧光染色法检测脂筏与HIF-1α蛋白的共定位关系。统计学比较上述各项检测,于4组间或处理后不同时间点(0、12、24、36、48h)的差异。结果 1 MTT比色法和软琼脂集落培养实验结果显示,脂多糖对照组宫颈癌Siha细胞活性和集落数,均较空白对照组高或多,而MβCD+脂多糖组及siTLR4+脂多糖组,则较空白对照组或脂多糖对照组低或少,并且差异均有统计学意义(P<0.01)。2免疫细胞化学染色和Western印迹法结果显示,脂多糖对照组宫颈癌Siha细胞HIF-1α蛋白相对表达量,较空白对照组多,而MβCD+脂多糖组及siTLR4+脂多糖组,则较空白对照组或脂多糖对照组少,并且差异均有统计学意义(P<0.05)。3 MβCD+脂多糖组及siTLR4+脂多糖组Siha细胞经过相应处理后12、24、36、48h的NADPH氧化酶活性和活性氧含量,均分别较空白对照组或脂多糖对照组相应时间点低;脂多糖对照组Siha细胞经过相应处理后24、36、48h的NADPH氧化酶活性和活性氧含量
- 杨潇王艳清程艳香
- 关键词:宫颈肿瘤TOLL样受体4活性氧
- miR-216b通过靶向调控Beclin-1的表达抑制宫颈癌细胞自噬被引量:4
- 2016年
- 目的研究miR-216b影响宫颈癌He La细胞自噬的作用机制。方法转染miR-216b及应用其抑制剂后,利用GFP-LC3 sh RNA转染等方法检测He La细胞的自噬水平,Western blot检测自噬相关基因Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达变化。结果 He La细胞转染miR-216b后,He La细胞中自噬相关基因Beclin-1受到抑制,LC3-Ⅱ的表达增加,细胞自噬受抑,而抑制mi R-216b的表达,自噬水平升高。进一步研究发现,miR-216b能够通过靶结合Beclin-1 3’UTR抑制Beclin-1表达从而抑制细胞自噬的发生。结论 miR-216b能够抑制宫颈癌He La细胞发生自噬,为宫颈癌的临床治疗提供了的理论基础。
- 程艳香杨潇陈干涛
- 关键词:宫颈癌自噬BECLIN-1
- 复发性流产蜕膜组织中转化生长因子-β1的表达及意义被引量:3
- 2017年
- 目的:研究复发性流产患者蜕膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及意义。方法:选取2014年3月-2016年3月我院收治的复发性流产患者30例(复发流产组)和人工流产的健康早孕妇女32例(正常妊娠组),采用免疫组织化学法检测TGF-β1的分布和表达情况,Western Blot和RT-PCR分别检测TGF-β1蛋白和mRNA的表达水平。结果:免疫组化结果结果显示:TGF-β1主要表达于蜕膜的腺体细胞和间质细胞,与正常妊娠相比,复发性流产蜕膜组织中的TGF-β1表达明显降低(P<0.05),差异具有统计学意义。荧光定量PCR结果和Western Blot结果与免疫组织化学结果相一致,与正常妊娠相比,复发性流产蜕膜组织中的TGF-β1表达明显降低(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:复发性流产蜕膜组织中TGF-β1的表达降低,提示TGF-β1对妊娠的维持发挥重要作用。
- 杨潇王艳清鲜舒程艳香
- 关键词:复发性流产蜕膜转化生长因子-Β1
- 外泌体miRNA在卵巢癌中的研究进展被引量:6
- 2020年
- 卵巢癌(ovarian cancer,OC)致死率在女性生殖系统肿瘤中位居第一,因其早期无典型症状,大多数患者在晚期才得到诊断。此外,由于癌细胞易对化疗药物产生耐药,多数患者会出现复发,导致患者预后很差。因此寻找有效的早期诊断及治疗方法对OC的早期预测、疗效评估、预后及复发判断等具有重要意义。外泌体(exosome)是近年来研究的热点,其富含脂质、蛋白质、RNA和DNA,通过与细胞膜融合将内容物释放到细胞外环境,影响相邻或远处细胞的生物学行为。研究认为外泌体可参与肿瘤微环境中细胞间通讯,通过传递癌或抑癌信息分子,影响肿瘤的进程。微小RNA(miRNA)可被包裹在外泌体中传递至受体细胞,影响肿瘤细胞的增殖、转移、耐药等,在肿瘤进展中发挥重要作用。本文对外泌体miRNA在OC中的研究进行综述。
- 张莉袁梦琴王艳清刘诗意杨潇程艳香
- 关键词:外泌体微RNAS卵巢肿瘤
- SERPINB3、β-catenin和VEGF—C在宫颈癌中的表达被引量:11
- 2018年
- 目的探讨SERPINB3、β-连环蛋白(β-catenin)及血管生成因子(VEGF—C)在宫颈癌中的表达情况。方法应用量子点技术、免疫组织化学sP法,及Western印迹技术检测30例正常宫颈组织和30例宫颈癌组织中SERPINB3、β-catenin和VEGF—C的表达情况。结果正常宫颈组织中β-catenin在细胞膜阳性表达,SERPINB3表达阴性。宫颈癌组织中β-catenin主要在细胞核和/或细胞质异位表达,且呈强阳性.SERPINB3表达亦为强阳性。VEGF—C定位于细胞膜,在宫颈癌组织中阳性表达。结论研究发现SER—PINB3、Wnt/β-catenin在宫颈癌组织中异常表达,且SERPINB3可能参与了宫颈癌发生发展中的Wnt/β-catenin/VEGF—C通路的调节。
- 王艳清杨潇鲜舒程艳香
- 关键词:宫颈癌Β-连环素血管生成因子