罗莉
- 作品数：15 被引量：12H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 胍丁胺对脂多糖诱导RAW264.7细胞氧化应激损伤的保护作用被引量：1
- 2016年
- 目的探讨胍丁胺(agmatine,AGM)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7氧化应激的抑制作用及其机制。方法 RAW264.7细胞经LPS(10μg/m L)刺激发生氧化应激,同时AGM(1 mmol/L)对其进行干预。分为对照组、LPS组、LPS+AGM组、AGM组。药物作用24 h,以2,7-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorofluoresce in diacetate,DCFH-DA)为荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;Griess法检测细胞内一氧化氮(NO)水平;Western blot检测细胞内的iNOS蛋白及细胞质细胞核内Nrf2蛋白表达;RT-PCR检测Nrf2下游抗氧化酶血红素氧合酶(heme oxygenase-1,HO-1)mRNA的表达。结果与对照组相比,LPS可显著增加RAW264.7细胞中ROS、NO以及iNOS蛋白水平,而AGM干预后上述指标含量均明显降低(P<0.05)。AGM干预组中细胞核的Nrf2表达及其下游分子HO-1 mRNA表达水平较LPS单独刺激组显著升高,表明Nrf2信号通路在AGM的作用下被活化。结论 AGM可通过活化转录因子Nrf2促进抗氧化酶HO-1的表达,进而减轻细胞内的氧化应激损伤。
- 侯凤艳罗莉朱俊宇康文渊范霞柴鉴深卢中秋梁华平
- 关键词：胍丁胺RAW264.7细胞氧化应激NRF2
- 活性氧与细胞核共染影响因素的实验研究
- 2016年
- 目的利用二氯荧光黄二乙酸酯(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针和4',6'-二脒基-2-苯基吲哚(4',6'-diamidino-2-phenylindole,DAPI)探讨影响活性氧(reactive oxidative species,ROS)和细胞核共染的因素,以优化最佳的研究方案。方法以RAW 264.7细胞株为研究对象,首先采用不同浓度的多聚甲醛分别固定10、30 min,1、2、4 h,进行ROS和DAPI检测;再用不同的固定试剂分别在ROS检测前和后固定,检测ROS荧光强弱;将DAPI在DCFH-DA探针加入前12、4、2、1 h,20 min加入和两者同时加入,检测DAPI染色情况;最后,DAPI在ROS检测前12 h加入,以不加DAPI组为对照,分别用LPS和H_2O_2刺激产生ROS并检测,计算其荧光数和平均荧光强度,利用SPSS18.0软件进行t检验分析。结果不同固定浓度、固定试剂、固定顺序的结果均表明,固定虽然会增强DAPI的染色,但同时会减弱ROS的荧光强度;活细胞DAPI染色时,随着染色时间的延长,核着色强度和均匀度都更好;DAPI染色12 h后检测ROS,对ROS的荧光数和平均荧光强度都没有统计学影响(P>0.05)。结论 DCFH-DA探针法检测ROS荧光时不能与细胞固定连用;DAPI在DCFH-DA探针孵育前12 h加入,并不影响ROS荧光的产生和检测,该研究方案可有效实现ROS与DAPI的共染。
- 罗莉侯凤艳严军梁华平
- 关键词：活性氧细胞核影响因素
- 12-脂氧合酶抑制剂ML355对小鼠经脂多糖诱导炎症反应的拮抗效应
- 2020年
- 目的探讨12-脂氧合酶(12-LOX)抑制剂ML355对小鼠经脂多糖(LPS)诱导的炎症反应的拮抗效应及其分子机制。方法①体内实验:将24只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组〔腹腔注射100μL二甲亚砜(DMSO)后1 h再给予0.9%的生理盐水〕、LPS组(腹腔注射LPS 20 mg/kg)、ML355预处理组(给予LPS前1 h腹腔注射ML35515 mg/kg、30 mg/kg进行预处理)。制模后12 h处死小鼠,收集外周血、腹腔灌洗液和腹腔巨噬细胞(PMs),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血浆和腹腔灌洗液中12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)含量、腹腔灌洗液中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL-1β、IL-6、IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血清中IFN-γ、IL-1β水平,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组小鼠PMs中IFN-γ、IL-1β及花生四烯酸-15-脂氧合酶(Alox15)的mRNA表达。②体外实验:体外培养小鼠原代PMs,按随机数字表法分为对照组(加入终浓度为0.3%的DMSO)、LPS组(给予LPS 20 mg/L)、ML355预处理组(给予LPS前1 h加入25μmol/L、50μmol/L的ML355预处理)。于LPS作用不同时间点收集各组细胞上清液和细胞团块,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测ML355对PMs细胞存活率的影响,采用ELISA法检测各组PMs中12-HETE、IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10的含量,用qRT-PCR检测各组细胞中IFN-γ、IL-1β及Alox15的mRNA表达,用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测12/15-脂氧合酶(12/15-LOX)及丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)的蛋白表达。结果①体内实验:作用12 h,LPS组血浆和腹腔灌洗液中12-HETE以及腹腔灌洗液中炎性因子、血清中IFN-γ、IL-1β含量均较对照组显著增加。与LPS组比较,15 mg/kg和30 mg/kg ML355预处理后血浆和腹腔灌洗液中12-HETE及血清中IFN-γ含量均明显减少〔12-HETE:血浆(mg/L)为11.59±1.80、11.58±1.75比18.59±1.68,腹腔灌洗液(μg/L)为355.80±59.47、196.30±88.98比712.10±44.55;血清中IFN-γ(ng/L):147.60�
- 王星玉唐婉琦陈涛罗莉梁华平
- 关键词：脂多糖巨噬细胞
- 聚丙烯安瓿和玻璃安瓿的临床便捷性和安全性比较被引量：1
- 2017年
- 目的:比较聚丙烯和玻璃两种材质安瓿的临床配制便捷性和安全性。方法:18名护士分别配制20ml、10ml规格的聚丙烯安瓿和玻璃安瓿的输液产品各10袋评价其安全性。结果:聚丙烯安瓿配制时间明显短于玻璃安瓿(P<0.05);聚丙烯安瓿空投破损率明显低于玻璃安瓿(P<0.05)。结论:聚丙烯安瓿比玻璃安瓿更便捷,更安全,更适合临床应用。
- 罗莉朱俊宇孙宇夏晚秋唐婉琦梁华平
- 关键词：便捷性安全性安全输液
- 咪唑克生对内毒素攻击小鼠体内及体外活化巨噬细胞炎性介质释放的抗炎效应被引量：3
- 2016年
- 目的观察咪唑克生（IDA）对内毒素脂多糖（LPS）攻击小鼠体内以及体外活化巨噬细胞的抗炎效应，探讨其可能的分子机制。方法体内实验：将30只成年雄性C57BL／6小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组及IDA低、中、高剂量组（IDA—L、IDA—M、IDA—H组），每组6只。采用腹腔注射LPS10mg／kg制备炎症模型，对照组注射等量生理盐水；IDA各组制模同时相应注射IDA0．3、1．0、3．0mg／kg进行干预。于制模后6h取血备检。体外实验：收集20只成年雄性C57BL／6小鼠原代腹腔巨噬细胞，分为空白组、LPS组（10mg／L）及LPS＋IDA—L、IDA—M、IDA—H组（10mg／LLPS＋5、25、100μmol／LIDA），于24h收集培养上清备检。检测方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）、单核细胞趋化因子-1（MCP-1）及一氧化氮（NO）含量；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）测定IDA对巨噬细胞核转录因子-κB（NF-κB）表达的影响。结果①体内实验：模型组血清TNF-α（ng／L：403．96±40．98比17．50±8．68）、IL-6（ng/L：61400．31±7826．61比2436．30±448．89）均较对照组显著升高（均P〈0．01）；IDA能剂量依赖性地抑制炎性因子的升高，以IDA—H组尤甚[TNF—α（ng／L）：170．09±28．53比403．96±40．98，IL-6（ng／L）：16570．81±1083．65比61400．31±7826．61，均P〈0．01]。②体外实验：与空白组比较，LPS组巨噬细胞分泌炎性因子量明显增加（TNF—α（ng／L）：7259．14±320．70比28．50±27．08，IL-6（ng／L）：14809．60±5852．73比1113．47±465．53，MCP-1（ng，L）：20847．37±1788．33比447．37±395．69，NO（μmol／L）：1900．00±144．31比603．03±102．18，均P〈0．01]；IDA能剂量依赖性地抑制上述因子的分泌，以LPS＋IDA—H组作用尤甚[TNF—α（ng／L）：784．40±281．90比7259．14±320
- 李香琴朱俊宇马娓罗莉梁华平
- 关键词：咪唑克生巨噬细胞
- 外源性胍丁胺抑制脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞活化及损伤被引量：1
- 2018年
- 目的研究胍丁胺对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞活化及损伤的影响,并探究其与NF-κB、MAPK通路及活性氧(ROS)的产生是否相关。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。MTT法检测0~4 mmol/L胍丁胺作用24 h对HUVECs细胞活力的影响。HUVECs细胞机分为:(1)空白对照组;(2)脂多糖(10μg/m L)组;(3)胍丁胺干预组:脂多糖(10μg/m L)+胍丁胺(0.125、0.5、1 mmol/L)。ELISA法检测24 h细胞上清中可溶性细胞间粘附分子-1(s ICAM-1)、可溶性血管间粘附分子-1(s VCAM-1)、可溶性E-选择素(s E-selectin)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)水平,确定胍丁胺最适干预浓度(1 mmol/L)。后续实验中HUVECs细胞随机分为:对照组、脂多糖(10μg/m L)组、胍丁胺(1 mmol/L)组及脂多糖(10μg/m L)+胍丁胺(1 mmol/L)共同组,作用1、6、24 h;抑制剂组即在脂多糖刺激前1 h,用10μmol/L NF-κB(PDTC)、ERK1/2(PD98059)及p38(SB203580)抑制剂进行预处理。q RT-PCR法检测ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、MCP-1、血红素氧合酶(HO-1)、醌氧化还原酶(NQO1)m RNA表达水平;DCFH-DA作为荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平;Western blot法检测细胞VCAM-1、ICAM-1、p65、磷酸化-p65(p-p65)、IκBα、p-IκBα、ERK、p-ERK、p38、p-p38、JNK、p-JNK蛋白表达水平。结果 (1)HUVECs经10μg/m L脂多糖刺激24 h后,上清s VCAM-1、s ICAM-1、s E-选择素、MCP-1含量明显升高(P<0.05),细胞内ROS明显增加(P<0.05);刺激6 h后各因子m RNA水平升高(P<0.05);(2)胍丁胺(1 mmol/L)干预后上述指标显著下调(P<0.05),这与p38、ERK及NF-κB信号通路抑制剂预处理细胞后的抑制效应相似;(3)胍丁胺干预组6 h HO-1 m RNA表达较脂多糖组明显增加(P<0.05),而NQO-1无明显变化;(4)胍丁胺明显抑制脂多糖刺激引起的细胞内p38、ERK、核内p65(Ser536)与胞浆IκBα磷酸化,并上调胞浆IκBα蛋白水平。结论胍丁胺可能通过抑制NF-κB、MAPK通路的激活下调粘附分子及趋化因子水平,并增强HO-1表达
- 殷商启朱俊宇罗莉杨霞梁华平罗艳
- 关键词：胍丁胺MAPK人脐静脉内皮细胞脂多糖
- 胍丁胺对脓毒症小鼠血管内皮损伤的保护作用
- 目的：探究胍丁胺对脓毒症小鼠血管内皮功能的影响.方法：本实验采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建脓毒症小鼠模型.将42只6-8周成年雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(14只,腹腔注射磷酸盐缓冲液)、CLP模型组(14只...
- 朱俊宇杨霞罗莉康文渊殷商启严军梁华平
- 关键词：胍丁胺脓毒症血管内皮
- 胍丁胺对脓毒症小鼠血管内皮损伤的保护作用
- 目的 探究胍丁胺对脓毒症小鼠血管内皮功能的影响。方法 本实验采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建脓毒症小鼠模型。将42只6-8周成年雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(14只,开腹但不进行CLP,术后腹腔注射磷酸盐缓冲液...
- 朱俊宇杨霞罗莉康文渊殷商启严军梁华平
- 关键词：胍丁胺脓毒症血管内皮损伤
- 一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤被引量：1
- 2015年
- 目的探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3(i CORM3)组;LPS组、CORM3组和i CORM3组采用LPS气管内滴注建立新生鼠ALI模型,分别腹腔注射生理盐水、CORM3和i CORM3;对照组不建立ALI模型,腹腔注射生理盐水。于建模后12 h取肺组织,苏木素-伊红染色观察肺组织病理改变,湿干(W/D)比值测定,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白含量测定。体外培养A549细胞,LPS诱导细胞凋亡。MTT检测细胞活性,Tunel染色观察组织、细胞凋亡变化。结果 1与对照组相比,LPS组肺组织形态结构明显紊乱,肺泡压缩,肺间质大量炎性细胞浸润;CORM3组肺组织形态结构基本正常,间质炎性细胞浸润少;i CORM3组见肺组织水肿及大量炎性细胞浸润。2与对照组相比,LPS组肺组织W/D比值、BALF细胞数及蛋白含量明显升高,肺泡上皮细胞凋亡率明显增多[(37.3±4.5)%vs(3.0±1.0)%];A549细胞活力下降,凋亡率明显升高[(29.6±4.1)%vs(3.6±1.0)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。CORM3组肺组织W/D比值、BALF细胞数和蛋白含量较LPS组显著下降,肺泡上皮细胞凋亡率减少[(19.3±4.6)%];A549细胞活力回升,凋亡率[(15.3±4.5)%]明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS组与i CORM3组间上述指标差异均无统计学意义。结论 CO通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻新生鼠ALI。
- 蔡康兴汪丽王婷罗莉陈龙王楠史源
- 关键词：脂多糖肺损伤肺泡上皮细胞
- 阿奇霉素粉-液双室袋与传统粉针配制的比较研究被引量：1
- 2017年
- 目的通过实验系统评价新型阿奇霉素粉-液双室袋的便利性,安全性和准确性。方法采用计算配制时间来评价双室袋的便利性;通过对配制过程中出现的刺伤、划伤等伤害人次,和配制后不溶性微粒数来评价双室袋的安全性;通过高效液相色谱法检测配制浓度和残留量来评价双室袋配制的准确性。结果双室袋配制时间明显少于粉针配制时间[(22.5±4.7)s vs(89.2±15.5)s,P<0.05];配制过程中不会造成人员伤害,配制后的不溶性微粒数明显少于粉针配制(P<0.05);由于双室袋配制过程中不产生药物残留,故其药物浓度更接近理论值。结论新型阿奇霉素粉-液双室袋在便利性、安全性和准确性上都明显优于粉针配制,具有显著的临床应用优势。
- 罗莉孙宇夏晚秋唐婉琦余静李子阳梁华平
- 关键词：阿奇霉素
