马圣明
- 作品数：7 被引量：13H指数：3
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- MDV Meq基因簇miRNAs基因缺失株的致病性被引量：1
- 2016年
- 为了探讨Meq基因簇microRNAs（Meq-clusteredmiRNAs）对马立克氏病病毒（Marek’Sdiseasevirus，MDV）致病性的影响．本研究将MDVMeq—clusteredmiRNAs基因缺失株GX0101AMeq—miRNAs感染1日龄SPF鸡，并于感染后90d内进行毒株致死率、致肿瘤率、鸡体质量、免疫器官指数和鸡血液中病毒含量等方面的检测。结果显示：1日龄SPF鸡在接种Gxol01AMeq—miRNAs后90d内累计死亡率和眼观肿瘤发生率分别为4％和8％，与亲本株GX0101BAC相比分别下降了23．5倍和2．5倍；与鸡胚成纤维细胞（chickenfibroblastcells，CEF）阴性对照相比，GX0101△Meq—miRNAs感染鸡在整个试验期间体质量差异均不显著（P〉0．05）；在感染后14～21d，GX0101△Meq—miRNAs组的法氏囊指数和胸腺指数均显著降低（P〈0．05）；与亲本株相比，GX0101／XMeq—miRNAs在血液中的含量及导致的显微肿瘤发生率均下降。结果表明：MDVMeq—clusteredmiRNAs基因的缺失降低了MDV的致病性，Meq—clusteredmiRNAs具有调控MDV致病性的功能。
- 余祖华丁轲滕蔓马圣明贾艳艳郁川何雷程相朝
- 关键词：马立克氏病病毒
- 马立克氏病病毒编码的miR-M12-5p对鸡HVCN1基因表达的靶向调控被引量：5
- 2016年
- 为研究miR-M12-5p在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)感染过程中的调控作用,利用生物信息学方法对其候选靶基因进行预测分析,发现4个miR-M12-5p的结合靶点。体外双荧光素酶报告试验结果表明,miR-M12-5p可结合宿主鸡的氢离子电压门控通道1(HVCN1)基因mRNA的3'-UTR相应位点并发生特异性相互作用。实时荧光定量PCR分析进一步证实,miR-M12-5p能够在体内下调HVCN1基因的表达水平。上述结果表明,miR-M12-5p可以靶向调控宿主基因HVCN1的表达。
- 李会珍滕蔓党露冯丽丽马圣明赵朴罗俊张改平
- 关键词：马立克氏病病毒靶基因
- 马立克病病毒miR-M4-5p宿主靶基因cDNA文库的构建及鉴定被引量：1
- 2018年
- 马立克病病毒(MDV)是少数感染自然宿主后可诱发淋巴瘤的疱疹病毒之一,是研究肿瘤发生及发展的理想动物模型。目前已报道MDV可编码数十种miRNA,其中MDV-1编码的miR-M4-5p被鉴定为宿主细胞miR-155的同源物,由于miR-155与人类多种肿瘤性疾病密切相关,这意味着miR-M4-5p可能在MDV的致瘤过程中扮演重要角色。本研究旨在构建miR-M4-5p的宿主靶基因文库并进行初步鉴定。提取鸡胚成纤维细胞(CEF)总RNA,反转录合成cDNA,用hybrid-PCR扩增候选靶基因片段连接到pMD19-T载体,转化大肠杆菌JM109感受态细胞后挑选单克隆进行PCR鉴定及测序,通过BLAST比对分析,共获得88个宿主候选靶基因序列。优先选择miRNA结合靶点位于mRNA 3′-UTR且与miR-M4-5p种子序列(2~7nt)完全互补配对的29个候选靶基因,构建报告基因载体进行双荧光素酶报告试验,通过三轮双荧光素酶报告试验最终初步鉴定5个宿主靶基因:PRICKLE1、COLA、BCAT1、ANTXR1和TECPR1,为进一步揭示miR-M4-5p的分子调控机制奠定了重要基础。
- 薛正飞滕蔓李会珍马圣明马圣明张雅罗俊张改平
- 关键词：马立克病病毒CDNA文库肿瘤发生
- 马立克病病毒超强毒株GX0101感染宿主部分病毒基因表达水平及致病阶段分析被引量：3
- 2016年
- 旨在探讨马立克病病毒（MDV）超强毒株GX0101对宿主的感染过程及致病阶段,即＂Cornell模型＂,为进一步使用该毒株研究MDV的致病或致瘤机制奠定基础。用GX0101接种1日龄SPF鸡,建立了感染宿主的动物模型;然后用RT-qPCR分析10个具有代表性的MDV蛋白编码基因在感染不同时间点的动态基因转录水平。结果显示,GX0101感染发病鸡的临床症状及剖检病变与典型的马立克病一致;MDV编码的结构蛋白基因gB、gE和UL6、非结构蛋白基因UL42和UL52、立早期基因ICP4、水平传播相关基因UL13以及磷酸化蛋白基因pp38具有相似的转录水平和趋势,均在GX0101感染后7d上升至第一个峰值,10d降至低谷,14d又逐渐升高并在21d达到第二个峰值,30~60d逐渐下降并处于较低的转录水平;MDV编码的原癌基因meq和毒力相关基因RLORF6在GX0101感染7d即持续升高,并在14~60d的试验周期内较长时间处于高转录水平。结合作者此前研究及本文结果分析,GX0101感染宿主的＂Cornell模型＂：早期增殖性-限制性感染期为1~7d,潜伏感染期约为10d前后,晚期溶细胞性感染及免疫抑制期发生于14~21d,而T细胞转化及淋巴瘤形成阶段可能在14d前后就已经开始。
- 马圣明滕蔓余祖华党露李会珍丁轲邓瑞广罗俊
- 关键词：马立克病病毒超强毒株实时荧光定量PCR
- 河南土鸡群马立克病病毒流行毒株的分离鉴定及分子进化分析被引量：5
- 2018年
- 本研究旨在分离鉴定河南鸡群马立克病病毒（Marek’s disease virus，MDv）流行毒株，了解当前MDV分子进化特征并为鸡马立克病（MD）的有效防控提供参考。根据MDV基因组设计了meq、gE、gI、gB、pp38以及132～bp重复序列基因的特异性引物，应用PCR扩增和DNA测序分析对河南焦作土鸡群8份MD疑似病例进行了确诊，并通过鸡胚成纤维细胞（CEF）盲传培养和间接免疫荧光试验（IFA）分离鉴定了3个流行毒株，分别命名为HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103。结果显示，3个MDV分离株均为血清1型（MDV1）毒株，未发生禽网状内皮增生症病毒（REV）共感染，并且132-bp重复序列基因均为双拷贝。meq、gE和gI基因核苷酸序列比对分析发现，临床病例样本及3个MDV新分离株的meq基因与国内外温和毒或疫苗毒株的meq基因核苷酸序列同源性仅为64．7％～78．8％，但与MDV强毒株的同源性高达98．9％～100．0％；gE和gJ基因的核苷酸序列同源性均较高，分别为99．1％～99．9％和99．3％～100．0％。系统发生树分析结果表明，HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103与绝大多数此前分离的河南毒株及国内MDV强毒株同处于一个大的进化分支。研究结果表明，3个分离株HNJZ101、HNJZ102和HNJZ103很可能是当前河南土鸡群中流行的致病性MDV—1毒株，其确切的致病型及导致免疫失败的原因仍有待进一步深入研究。
- 马圣明滕蔓李会珍党露党露郅玉宝郅玉宝邓瑞广
- 关键词：马立克病病毒病毒分离MEQ进化分析
- 马立克病病毒miR-M4对病毒致病性的影响被引量：1
- 2016年
- 为了研究马立克病病毒(M D V)-m i R-M4对超强毒MDV(vv MDV)致病性的影响,采用细菌人工染色体(bacterialartificial chromosome,BA C)技术和Red/ET重组突变技术构建了缺失MDV-mi R-M4基因的MDV感染性BAC克隆株G X 0101Δmi R-M4,然后将GX0101Δmi R-M4感染1日龄SPF鸡,通过对生长性能、免疫器官发育、死亡率和致瘤率的研究来评价其对致病性的影响。结果显示,GX0101Δmi R-M4毒株在整个试验周期对鸡的生长均无显著影响(P>0.05),但可诱导法氏囊和胸腺发生萎缩;接种后第90天感染鸡的累计死亡率为18%,肿瘤发生率为22%,与亲本株GX0101 BAC相比分别降低了82%和6%,且眼观无可见肿瘤的肝的显微肿瘤发生率也低于GX0101 BAC组。以上结果表明,MDV-mi R-M4基因的缺失可降低vv MDV的致死率和致瘤率,MDV-mi R-M4在MDV的致病性方面具有重要的调控作用。
- 余祖华丁轲马圣明滕蔓贾艳艳郁川何雷张春杰
- 关键词：马立克病病毒
- MDV流行毒株分离鉴定及GX0101感染宿主的病毒动态转录组学研究
- 鸡马立克病（Marek‘s disease，MD）是由马立克病病毒（Marek‘s disease virus，MDV）感染鸡引发的一种重要的免疫抑制病及肿瘤病。近年来，随着鸡群MD疫苗长期而广泛的应用，在免疫压力选择下...
- 马圣明
- 关键词：转录组基因表达致病因子
- 文献传递
