王怡倩
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 建立检测产气肠杆菌的TaqMan荧光定量PCR和普通PCR方法被引量：2
- 2016年
- 目的建立敏感、特异的普通聚合酶链反应（PCR）方法和Taq Man荧光定量PCR方法对产气肠杆菌进行快速检测。方法以产气肠杆菌组氨酸脱氢酶基因（hdc）为靶基因设计引物以及Taq Man FAM探针,建立对产气肠杆菌进行检测的普通PCR方法和Taq Man荧光定量PCR方法,并评价该方法的特异性、灵敏性和稳定性。结果普通PCR和Taq Man荧光定量PCR方法均能对产气肠杆菌进行特异检测;普通PCR方法对质粒标准品和粪便模拟标本的检测下限分别为100 copies/μl和1.0×105cfu/g,Taq Man荧光定量PCR方法对质粒标准品和粪便模拟标本的检测下限分别为33copies/μl和1.0×104cfu/g;Taq Man荧光定量PCR方法对质粒标准品和粪便模拟标本检测的扩增曲线良好;在稳定性评价试验中,普通PCR方法的重复性良好,Taq Man荧光定量PCR方法对质粒标准品检测Ct值的组内差异为0.15%~0.98%,组间差异为0.55%~1.63%。结论本研究建立的检测产气肠杆菌的普通PCR方法和Taq Man荧光PCR方法特异性好、灵敏度高,能够用于产气肠杆菌的快速检测。
- 王怡倩叶长芸
- 关键词：产气肠杆菌
- 某医院72株阴沟肠杆菌临床菌株分子型别与耐药特征分析
- 2018年
- 目的分析72株阴沟肠杆菌临床菌株分子型别和耐药特征,为流行病学及临床研究提供参考依据。方法通过热休克蛋白基因和肽指纹图谱进行分子分型;采用琼脂药敏纸片法分析耐药表型;利用PCR扩增法对20个耐药基因进行检测;运用SAS软件对数据进行统计学分析。结果 72株阴沟肠杆菌临床菌株分为2个分支9个基因群,以分支1(基因群Ⅲ、Ⅵ和Ⅷ)菌株为主(50株,69.4%)。临床菌株对一至三代头孢、氨苄西林/舒巴坦具有较高的耐药率,对另外9种抗生素较为敏感。共检测到8个耐药基因(mir-act、dha、shv、tem、ctx-M、qnr A、qnr B和qnr S)。通过组内统计学分析发现,各型别菌株的临床分布、耐药率和耐药基因携带率不完全相同,差异有统计学意义。结论通过两种分型方法,阴沟肠杆菌临床菌株中存在优势型别,不同型别的菌株在耐药率和耐药基因携带率上存在差异。
- 王怡倩付宝庆熊衍文叶长芸
- 关键词：药敏试验耐药基因
- 医院临床标本中阴沟肠杆菌遗传多样性分析及应用TaqMan荧光定量PCR方法快速检测阴沟肠杆菌的研究（英文）
- 2017年
- 目的调查医院临床标本中阴沟肠杆菌基因群的构成比例,并建立TaqMan荧光定量PCR方法对阴沟肠杆菌进行特异、灵敏、快速检测。方法通过hsp60基因分型分析临床标本中基因群的构成,并以外膜蛋白基因(ompX)为靶基因设计引物及FAM探针,建立TaqMan荧光定量PCR方法对阴沟肠杆菌基因群检测,并评价该方法的特异性、灵敏性和稳定性。结果 237株临床标本共归为10个基因群。其中群III,VI和VIII菌株数量最多,占总菌株数的71%;群I占11%;其他6个群总共占18%。无基因群VII,X和XII。TaqMan荧光定量PCR方法能对阴沟肠杆菌不同基因群进行特异检测:对十个基因群和群I的质粒标准品的检测下限分别为36拷贝/μL和21拷贝/μL,对粪便模拟标本的检测下限为104个菌落形成单位/μL;TaqMan荧光定量PCR方法对质粒标准品和粪便模拟标本检测的扩增曲线良好;结论医院临床标本中可以检测到十个基因群,具有遗传多样性的特征。本研究建立的TaqMan荧光PCR方法特异性好、灵敏度高,能够用于阴沟肠杆菌的快速检测。
- 王怡倩刘凯李培京熊衍文叶长芸
- 关键词：热休克蛋白60
- 中国单增李斯特菌的基因组特征研究被引量：8
- 2021年
- 目的分析我国146株单增李斯特菌的基因组特征,了解不同家系和克隆群菌株遗传特征的差异。方法从NCBI数据库收集我国146株不同来源、省份和分离时间的单增李斯特菌基因组数据,利用生物信息学分析软件分别对其进行基因组注释、系统发育树构建和遗传元件分析。结果本研究中相同家系、血清型和克隆群的单增李斯特菌在系统发育进化树上聚在一起,这种分布与菌株的来源和分离省份无关,提示单增李斯特菌基因组结构具有一定的稳定性。单增李斯特菌均携带毒力岛LIPI-1,部分家系Ⅰ菌株(如CC3和CC87)携带毒力岛LIPI-3和LIPI-4,具有潜在的致病风险。大多数家系Ⅱ菌株携带质粒和环境抗性基因,有助于提高对不良环境的耐受力。食品来源的菌株中inlA基因提前终止突变发生率较高,可能减弱菌株的毒力。结论我国单增李斯特菌主要以家系Ⅰ和家系Ⅱ菌株为主,两者在毒力基因、环境抗性基因和质粒携带方面均具有差异,显示不同亚型菌株的毒力和环境适应性存在差异,为我国单增李斯特菌的监测和李斯特菌病的防控提供了参考数据。
- 宋泽萱纪顺师王艳王怡倩毛盼李玲玲叶长芸
- 关键词：单增李斯特菌毒力质粒
- 1例产后哺乳期腹泻患者分离单增李斯特菌的生物学特征分析被引量：5
- 2020年
- 目的分析1例单增李斯特菌所致产后哺乳期腹泻患者的临床特征、病原学、菌株的毒力基因携带及分子特征。方法搜集病例的临床相关信息;采用选择性增菌和显色培养基分离单增李斯特菌,用VITEK-2 COMPACT30全自动细菌分析仪鉴定分离菌株,采用单增李斯特菌诊断血清对分离株进行血清分型,使用脉冲场凝胶电泳技术及多位点序列分型技术进行分子分型,应用PCR检测毒力基因,并用E-test方法检测分离菌株对5种抗生素的药物敏感性。结果产后哺乳期患者食用甜瓜和冰箱冷藏的酸奶后引起不能自限的腹泻,检测结果证实病原为4b血清型、ST145序列型单增李斯特菌。分离菌株携带毒力基因plcB、act、hly、iap、prfA、inlA,对青霉素、氨苄西林、美罗培南、红霉素和复方磺胺均敏感。结论单增李斯特菌引起的腹泻患者容易漏诊,加强孕妇等高危人群腹泻患者粪便标本中单增李斯特菌的检测,对于单增李斯特菌病病人的及时治疗,预防不良预后具有重要的公共卫生意义,尤其对这一特殊型别单增李斯特菌在我国引起的病例感染应引起重视,其可能的感染来源和致病风险值得进一步的研究。
- 张敬蕊刘力王怡倩杨如刚许彩虹刘菁菁叶长芸
- 关键词：单增李斯特菌腹泻生物学特征
- 围产期李斯特菌感染6例的临床及分子特征被引量：6
- 2020年
- 目的分析围产期李斯特菌感染6例的临床及其分子流行特征,为围产期李斯特菌感染的治疗、预防和控制提供参考依据。方法回顾性分析李斯特菌母婴感染病例的临床信息,对分离的病原菌进行血清学分型、脉冲场凝胶电泳分析、多位点序列分型及毒力基因检测。结果 6例孕妇出现发热、腹痛、胎动异常等症状;2例胎死宫内,4例新生儿出现胃肠炎、血流感染和脑膜炎等感染症状,其中1例新生儿出生2 d后死亡。6株产单核细胞李斯特菌有3种血清型(4b、1/2b和1/2a)、4种ST型(ST1、ST2、ST5和ST91)和5种PT型(pulsotype)。毒力基因(plcB、actA、hly、iap、prfA、inlA)检测均为阳性。结论 6例围产期李斯特菌感染病例症状较为严重,胎儿/新生儿预后差。分离的产单核细胞李斯特菌以血清型4b型和ST2型为主,携带6个毒力基因,致病力强。
- 贾忠兰叶长芸许丽风王怡倩
- 关键词：产单核细胞李斯特菌围产期感染分子特征
