宋彩霞
- 作品数：8 被引量：40H指数：5
- 供职机构：郑州师范学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划郑州市科技攻关计划项目郑州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 蝴蝶兰几丁质酶基因的克隆及表达特性分析被引量：5
- 2016年
- 利用RT-PCR及RACE技术,克隆到蝴蝶兰1个几丁质酶基因PhCHT(GenBank登录号为KT992851),该基因cDNA全长1 210bp,包含37bp的5′-UTR、933bp开放阅读框和240bp 3′-UTR,编码310个氨基酸;该蛋白为糖苷水解酶第19家族成员,兼具有溶菌酶活性;生物信息学分析显示,该蛋白具N-端信号肽和跨膜结构,为胞外分泌蛋白;该蛋白与海枣、谷子、油棕和拟南芥的几丁质酶类似蛋白相近,并且在系统进化树上与甘蔗和陆地棉的Ⅶ类几丁质酶同属一个分支。PhCHT基因的表达分析表明,PhCHT在蝴蝶兰营养器官和生殖器官中均有表达,根中表达量最高;13℃/8℃低温处理3、6、9和15d时该基因的表达被抑制,4℃低温处理1、2和4h表达量升高。研究表明,PhCHT基因能够响应短期的冷胁迫。研究结果为进一步研究蝴蝶兰几丁质酶的系统进化及抗性育种奠定了基础。
- 袁秀云许申平宋彩霞崔波魏博
- 关键词：几丁质酶低温胁迫
- 菊花几丁质酶基因ChCHI的克隆及表达分析被引量：5
- 2017年
- 根据GenBank发布的几丁质酶基因的保守序列设计简并引物,采用RT-PCR和RACE技术,克隆到菊花1个几丁质酶基因ChCHI(GenBank登录号为KX881373)。ChCHI基因cDNA全长为1 385 bp,包含960 bp开放阅读框,编码319个氨基酸。ChCHI属于亲水性蛋白,相对分子质量约为35.5 k D,等电点为6.38,为稳定蛋白,二级结构预测表明该蛋白以α螺旋和无规则卷曲为主。蛋白序列比对和进化树分析表明,ChCHI基因编码的蛋白属于糖苷水解酶19家族几丁质酶,与薇甘菊(ACO25187.1)几丁质酶蛋白的亲缘关系最近,序列一致性为87%。qRT-PCR分析结果显示,SA处理可以明显提高贡菊叶片中ChCHI的表达量。菊花ChCHI在对抗环境胁迫的分子调控中起重要作用。
- 崔波宋彩霞王莹博王若斓蒋素华梁芳叶永忠
- 关键词：菊花几丁质酶基因克隆
- 铁皮石斛DORCA基因的克隆及表达分析被引量：5
- 2016年
- 为了研究铁皮石斛的光合特性,根据Rubisco活化酶(RCA)基因的保守序列设计兼并引物,采用RT-PCR和RACE方法从铁皮石斛叶中分离到一个RCA基因,命名为DORCA(GenBank登录号KT205841)。DORCA基因cDNA全长为1 724bp,包含1 317bp开放阅读框(ORF),编码438个氨基酸。系统进化分析显示,DORCA与马蹄莲ZaRCA(AAK25801.1)亲缘关系最近。生物信息学分析表明,DORCA与其他植物的RCA蛋白具有较高一致性,属于RCA的β亚基。DORCA蛋白具有定位于叶绿体的N端转运肽,2个保守的ATP结合结构域和多个磷酸化位点。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,DORCA基因在茎、叶中表达;在自然光周期条件下,DORCA基因在8:30时表达量最高,20:30时表达量最低,具有明显的光诱导表达特性。
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- 关键词：铁皮石斛RUBISCO活化酶分子特征
- 菊花几丁质酶CmCHI基因及其应用
- 本发明属于转基因工程技术领域，具体涉及菊花几丁质酶<I>CmCHI</I>基因及其在抗低温及抗真菌活性方面的潜在应用的专利申请。该基因包含1385个碱基，具体序列如SEQ ID NO.1所示。该基因所编码的菊花几丁质酶，...
- 袁秀云梁芳宋彩霞王莹博魏颖坤刘建松
- 文献传递
- 萼脊兰EF1α基因片段的克隆及序列分析被引量：4
- 2016年
- 为探明萼脊兰EF1α基因在生长发育过程中的生理功能和作为内参基因的稳定性及适用性,根据NCBI中植物翻译延长因子同源核苷酸保守序列设计简并引物,以萼脊兰叶片为试验材料,采用RNAprep多糖多酚植物总RNA提取试剂盒提取RNA,利用RT-PCR技术克隆翻译延伸因子EF1α,并进行生物信息学分析。结果表明:EF1α基因长620bp,编码206个氨基酸,编码的蛋白为亲水性蛋白,相对分子质量为23.16KD,等电点为8.50;经二级结构分析,α-螺旋占29.61%,延伸链占31.55%,无规则卷曲占38.83%;亚细胞定位在细胞质;EF1α基因与朵丽蝶兰杂交品种翻译延伸因子蛋白的一致性较高,进化距离最近。在GenBank登录号为KT223116。
- 蒋素华王默霏宋彩霞梁芳李艳辉崔波
- 关键词：基因克隆
- 蝴蝶兰SOC1基因的克隆及表达分析被引量：15
- 2016年
- 为了研究蝴蝶兰SOC1基因的功能,为蝴蝶兰分子育种等方面的研究提供一定的理论依据。本研究以蝴蝶兰"聚宝"盛花期的花瓣为材料提取总RNA,采用RT-PCR方法克隆蝴蝶兰SOC1基因的编码区序列,片段长度为682 bp,共编码219个氨基酸,该基因命名为SOC1,登录号为:KT852838。对蝴蝶兰SOC1基因进行同源分析及构建系统发育树,分析结果显示,与SOC1核苷酸序列同源性最高的是小兰屿蝴蝶兰(Phalaenopsis equestris),达到93.72%,SOC1基因与兰科植物小兰屿蝴蝶兰及石斛的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析表明,SOC1基因在的不同时期不同部位都有表达,但表达丰度不一致。在根中,营养生长期表达量最高;在叶中,抽葶期表达水平最高;在花葶中,抽葶期、开花期和子房发育期的表达水平相当;在花器官中,以蕊柱的表达量最高,其次是子房,而花萼、唇瓣、侧瓣中只有微量表达。研究认为SOC1基因在蝴蝶兰生长发育中既调控营养生长,又调控生殖生长;在花器官中主要参与蕊柱和子房的发育。
- 崔波王洁琼宋彩霞蒋素华梁芳袁秀云马杰
- 关键词：克隆实时荧光定量
- 菊花几丁质酶CmCHI基因及其应用
- 本发明属于转基因工程技术领域，具体涉及菊花几丁质酶<I>CmCHI</I>基因及其在抗低温及抗真菌活性方面的潜在应用的专利申请。该基因包含1385个碱基，具体序列如SEQ ID NO.1所示。该基因所编码的菊花几丁质酶，...
- 袁秀云梁芳宋彩霞王莹博魏颖坤刘建松
- 文献传递
- 三种甘薯病毒多重RT-PCR检测技术的建立被引量：10
- 2017年
- 本文根据GenBank中甘薯G病毒(SPVG)、甘薯卷叶病毒(SPLCV)和甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)外壳蛋白(CP)基因序列设计特异引物,对多重RT-PCR退火温度、延伸温度、模板浓度、引物浓度进行改良优化,建立能同时检测3种甘薯病毒的多重RT-PCR方法。该方法能同时扩增出SPVG、SPLCV和SPFMV特异片段,其大小分别是800、276和570bp。测序结果表明,扩增出的3种病毒序列与相应参考序列相似性达到98%以上。灵敏度分析结果表明,多重RT-PCR方法能够检测cDNA的量为0.1ng。应用建立的多重RT-PCR检测方法对田间样品进行检测,结果显示该方法可以特异、快速、灵敏地同时检测3种甘薯病毒。这些研究结果可为甘薯病毒检测提供参考。
- 蒋素华程喜梅宋彩霞许申平梁芳崔波
- 关键词：甘薯病毒多重RT-PCR
