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刘海云
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
上海海洋大学水产与生命学院
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发文基金:
国家现代农业产业技术体系建设项目
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
农业科学
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合作作者
张娅楠
上海海洋大学水产与生命学院
宗乾坤
上海海洋大学水产与生命学院
喻飞
上海海洋大学水产与生命学院
王浩
上海海洋大学水产与生命学院
吕利群
淡水水产健康养殖湖北省协同创新...
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上海海洋大学
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宗乾坤
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张娅楠
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刘海云
传媒
1篇
水产学报
年份
1篇
2016
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草鱼呼肠孤病毒GCRV VP56相互作用蛋白的鉴定
被引量:5
2016年
为研究Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒外纤维蛋白VP56与宿主蛋白的相互作用,实验采用酵母双杂交Gal4系统鉴定与VP56相互作用的草鱼蛋白。首先利用RT-PCR技术从Ⅱ型GCRV感染的草鱼肾细胞中扩增目的基因VP56,构建p GBKT7-VP56诱饵表达载体;在酵母菌株中检测其自激活性后,以VP56为诱饵在草鱼酵母双杂交文库中筛选阳性菌株,并对阳性克隆的序列进行分析。实验也克隆了草鱼JAM-A(Gc JAM-A)基因,并构建p GADT7-Gc JAM-A载体,在酵母中研究草鱼Gc JAM-A与病毒蛋白VP56相互作用的可能性。研究表明构建的诱饵质粒p GBKT7-VP56无自激活作用,可以应用于酵母双杂交筛选;从草鱼肾细胞文库中筛选得到9株阳性克隆,基因测序及序列分析确定其中包含草鱼7个细胞内蛋白和1个细胞外基质蛋白;VP56蛋白与Gc JAM-A蛋白在酵母中不能发生相互作用。本研究初步确定了与Ⅱ型GCRV蛋白VP56存在潜在相互作用的宿主蛋白,为深入探讨VP56蛋白在Ⅱ型GCRV感染宿主过程中的生物学功能奠定了基础。
喻飞
王浩
宗乾坤
张娅楠
刘海云
陈百朋
吕利群
关键词:
草鱼
呼肠孤病毒
酵母双杂交
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