王文涛
- 作品数：8 被引量：8H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市教育委员会科学技术研究项目国家自然科学基金重庆市渝中区科技计划项目更多>>
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- 促红细胞生成素通过激活Akt通路促进胶质瘤的快速增殖被引量：1
- 2018年
- 目的研究促红细胞生成素(EPO)是否通过Akt信号通路促进胶质瘤的快速增殖。方法通过免疫组化法检测EPO在人各病理级别胶质瘤中的表达差异;采用胶质瘤U87细胞系建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为对照组和EPO处理组,监测肿瘤生长速度差异及瘤体中EPO与p-Akt表达变化;体外实验分为对照组、EPO处理组及EPO+Akt抑制剂组,分别使用Western blot测各组间p-Akt及cyclinD1的表达变化、CCK-8法测生长曲线、克隆形成实验检测增殖速度差异、流式细胞术检测细胞增殖周期的变化。结果人胶质瘤标本中,高病理级别组比低级别组EPO的表达量高(P=0.0002);裸鼠移植瘤过程中,EPO处理组比对照组瘤体中EPO及p-Akt表达显著增高(P_(EPO)=0.0006,P_(P-Akt)=0.0003),瘤体生长明显增快(P_(volume)<0.0001,P_(weight)=0.0003);体外实验:与对照组相比,EPO处理组细胞中p-Akt及cyclinD1的表达水平均明显升高(P_(P-Akt)=0.0020,P Cyclin D1=0.0022),细胞生长速度明显增快(P3天/5天=0.020/0.028,P克隆=0.0010),增殖指数明显升高(P=0.0028),EPO+Akt抑制剂组细胞中p-Akt及cyclinD1的表达水平较EPO组明显降低(P_(P-Akt)<0.0001,P Cyclin D1<0.0001),同时细胞生长速度及增殖指数均显著下降(P3天/5天=0.003/0.001,P克隆=0.0017,P增殖指数=0.0036)。结论本研究发现EPO可通过激活Akt信号通路上调cyclinD1的表达,加快胶质瘤增殖速度。
- 刘自力唐兆华霍钢陈飞兰王文涛曾纹鑫陈鸿李欣陈宸
- 关键词：AKT信号通路促红细胞生成素胶质瘤移植瘤细胞增殖
- EPO通过调节Akt通路及细胞周期关键蛋白CyclinD1促进胶质母细胞瘤快速增殖
- 唐兆华霍钢孙晓川王文涛刘自力
- EPO及EPOR在不同病理级别星形胶质细胞瘤中的表达差异及意义
- 目的 研究内源性促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)及其受体(erythropoietin receptor,EPOR)在不同级别人脑星形胶质细胞瘤组织中的表达差异,并探讨其意义.方法 纳入标准:使用临...
- 唐兆华王文涛霍钢孙晓川
- 促红细胞生成素抑制大鼠创伤性脑水肿形成被引量：1
- 2020年
- 目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠创伤性脑水肿的影响及其的潜在分子机制。方法取SD大鼠90只,随机分为假手术组,创伤组和EPO组。创伤组:制作改进式Feeney's脑创伤模型;EPO组:伤后给大鼠腹腔注射重组人促红细胞生成素(5000 IU/kg)。伤后24 h,72 h和120 h,使用平衡木法评定各组大鼠行为学评分。伤后72 h时,检测各组大鼠脑含水量,脑组织胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)的磷酸化水平、水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)mRNA和蛋白表达水平。结果在伤后各时间点,EPO组大鼠神经功能障碍的行为学评分也较创伤组有明显降低(均P<0.05)。伤后脑组织含水量由假手术组的78.76%±0.65%上升至创伤组的81.26%±0.40%(P<0.01),EPO组脑含水量则降低至79.71%±0.59%(与创伤组比较P<0.01)。与假手术组比较,创伤组ERK磷酸化的水平在伤后72 h明显上升(P<0.01),EPO组伤后ERK磷酸化水平则明显低于创伤组(0.369±0.046 vs.0.815±0.127,P<0.01);AQP4 mRNA和蛋白在伤后的表达水平均较假手术组明显增高(均P<0.01),EPO组AQP4 mRNA和蛋白的表达水平较创伤组均显著下降(均P<0.01)。结论EPO可抑制大鼠脑创伤后ERK信号通路的过度激活及下游AQP4的过表达,减轻大鼠的创伤性脑水肿。
- 唐兆华霍钢孙晓川刘自力廖正步陈飞兰王文涛郑履平杨刚
- 关键词：促红细胞生成素细胞外调节蛋白激酶水通道蛋白4脑水肿创伤性脑损伤
- EPO通过调节Akt通路及细胞周期关键蛋白CyclinD1促进胶质母细胞瘤快速增殖
- 唐兆华霍钢孙晓川王文涛刘自力
- EPO通过调节Akt通路及细胞周期关键蛋白CyclinD1促进胶质母细胞瘤的快速增殖
- 唐兆华霍钢孙晓川王文涛
- EPO通过上调CyclinD1表达促进胶质母细胞瘤的体外增殖被引量：1
- 2016年
- 目的:研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对胶质母细胞瘤体外增殖的影响,并探讨其机制。方法:体外培养胶质母细胞瘤U87细胞株,实验分为对照组、EPO处理组及EPO+细胞周期素D1(Cyclin D1)拮抗剂组。对照组:用等体积PBS替代EPO;EPO处理组:在U87细胞的培养基中加入EPO(0.1 U/ml)处理7d;EPO+cyclin D1拮抗剂组:U87细胞的培养基中同时加入EPO(0.1 U/ml)及Cyclin D1拮抗剂(5μmol/L)共处理7 d。用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测细胞增殖情况,细胞倍增时间检测各组细胞增殖速度,RT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光法(immunofluorescence,IF)测定细胞周期关键蛋白Cyclin D1的m RNA和蛋白表达变化,流式细胞仪检测各组细胞周期。结果:与对照组相比,EPO处理组中U87细胞生长速度明显增快(CCK8:第3天P=0.014,第5天P=0.029,倍增时间:P=0.012),细胞中Cyclin D1的m RNA及蛋白表达水平也明显升高,差异有统计学意义(m RNA:P=0.001,蛋白:P=0.002,荧光定量:P=0.005),流式细胞仪检测发现U87细胞的增殖指数也明显升高(P=0.000);与EPO处理组相比,EPO+cyclin D1拮抗剂组细胞Cyclin D1 m RNA及蛋白的表达水平明显降低(m RNA:P=0.009,蛋白:P=0.000,荧光定量:P=0.013),流式细胞仪检测细胞增殖指数则有显著下降(P=0.000),同时细胞增殖能力和速度较EPO处理组明显降低(CCK8:第3天P=0.000,第5天P=0.000,倍增时间:P=0.001)。结论:本研究发现EPO可显著促进胶质母细胞瘤的体外增殖,上调细胞周期关键蛋白Cyclin D1的表达,加快细胞增殖周期可能是其重要的分子机制。
- 王文涛唐兆华霍钢李英王海全叶小琳刘自力谭赢石爽
- 关键词：促红细胞生成素胶质母细胞瘤CYCLIND1增殖
- Syndecan-1基因沉默抑制胶质瘤A172细胞增殖和侵袭被引量：5
- 2016年
- 目的探讨多配体蛋白多糖-1(Syndecan-1,SDC1)在不同胶质瘤细胞株中的表达水平及其沉默对A172细胞的增殖和侵袭的影响。方法通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western Blotting分析SDC1在不同胶质瘤细胞株中的表达水平;将携带SDC1 sh RNA的慢病毒载体感染A172细胞,稳定沉默的细胞株为干扰组,未转染为阴性对照组,转染scramble序列为空白对照组;采用MTT法、台盼蓝拒然法和流式细胞术检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭力;q RT-PCR和Western Blotting检测相关蛋白变化。结果SDC1在不同的胶质瘤细胞株中表达强度不同,差异具有统计学意义(P<0.05)。成功构建稳定沉默SDC1的A172细胞株;与阴性对照组和空白对照组相比,干扰组细胞增殖受到抑制(P<0.05),迁移力(58.40±5.24 vs.255.8±16.09、226.5±22.84,F=126.4,P<0.05)和侵袭力(61.67±16.26 vs.233.70±17.24、244.30±28.15,F=69.87,P<0.05)明显抑制;SDC1、PCNA和MMP-9 m RNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论沉默SDC1基因的表达可抑制胶质瘤A172细胞的增殖、迁移和侵袭,提示SDC1可能成为胶质瘤生物治疗的新靶点。
- 石爽钟东王兵王文涛张福安黄浩洋
- 关键词：胶质瘤SYNDECAN-1
