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陈宝剑: 作品数：69 被引量：148H指数：7; 供职机构：广西壮族自治区畜牧研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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沼泽型水牛促卵泡素基因β亚基的克隆与序列分析被引量：7: 2009年; 根据GenBank公布的奶牛FSHβ亚基的编码序列设计1对特异性引物,成功克隆出广西沼泽型水牛FSHβ亚基cDNA,并将其序列提交到GenBank,获得接受号为EF710660。以DNA Star生物分析软件对其同源性进行分析,结果表明,广西沼泽型水牛与已公布的印度水牛(Bubalus bubalis)的FSHβ亚基cDNA序列的同源性最高,达99%,与绵羊(Ovis aries)为96%、牛(Bovine)为95%、山羊(Capra hircus)为95%、梅花鹿(Cervus nippon)为95%。; 陈宝剑蒋钦杨毛献宝郭亚芬韦英明; 关键词：RT-PCR 克隆水牛

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对核移植胚胎体外发育效果影响的研究进展: 2020年; 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)是一类化合物,通过干扰组蛋白去乙酰化酶来控制DNA缠绕于组蛋白的松紧程度从而发挥作用,它可以通过增加细胞内组蛋白的乙酰化程度提高乙酰化相关基因的表达水平。近年来,关于HDACi促进供体细胞及核移植重构胚的表观遗传重编程以及调控高等动物机体基因的表达等相关研究备受关注。主要阐述了HDACi对核移植胚胎体外发育效果的影响,旨在为提高克隆胚胎的生产效率提供参考依据。; 吕玲燕吴永绍张家庆孙如玉汪燕玲潘天彪陈宝剑谢炳坤; 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂核移植胚胎

饮水中添加复合益生菌对仔猪生长性能及免疫指标的影响被引量：6: 2020年; 为进一步研究益生菌对仔猪生长性能、腹泻率和血清生化指标、免疫指标的影响,选取1000头健康状况良好、平均始重(8.31±0.33)kg、(35±2)日龄的三元杂交断奶仔猪,随机分成对照组和试验组2组,对照组不添加任何益生菌和抗生素,试验组每1000 kg饮水中添加1 L的益生菌。结果表明:饮水中添加复合益生菌能够较好地改善仔猪的生长性能,提高仔猪的日增重,降低料重比(P<0.05),降低仔猪腹泻率(P<0.05),提高仔猪的免疫力(P<0.05)。; 陈宝剑陈少梅潘天彪吴永绍张冰陈钊覃兆鲜关志惠谢炳坤; 关键词：益生菌免疫指标血清生化指标

不同电融合参数对猪手工克隆重构胚胎发育效果的影响被引量：2: 2016年; 为探讨不同融合参数对猪手工克隆(HMC)重构胚发育效果的影响。本试验比较了胞质与胞质之间不同黏合方式以及不同的电融合参数对融合效率的影响,以及融合参数对HMC重构胚胎发育的影响。结果表明,卵-供体-卵的黏合方式有利于提高胞质的融合率;融合参数3(2 k V/cm,80μs,1次)和参数4(2.2 k V/cm,80μs,1次)的对胞质的融合率显著高于其他参数,两个参数对HMC重构胚卵裂率的影响差异不显著,而参数3的囊胚率以及囊胚细胞总数显著高于参数4。参数3更适合用于HMC重构胚的融合,并能提高重构胚的囊胚发育率以及囊胚的细胞个数。; 吕玲燕陆杏蓉吴永绍汪燕玲陈宝剑蓝晞潘天彪

陆川猪GPR1基因真核表达载体构建及组织表达谱分析: 2018年; 试验旨在构建陆川猪G蛋白偶联受体1(G protein-coupled receptor 1,GPR1)基因真核表达载体,并对其组织表达谱进行分析。采用RT-PCR技术从10周龄陆川猪皮下脂肪组织中扩增出GPR1基因CDS区后,使用常规分子克隆手段构建含GPR1基因片段的真核表达载体pEGFP-N1-GPR1,利用双酶切和测序对重组质粒pEGFPN1-GPR1进行鉴定,并以脂质体法将重组质粒转染3T3-L1细胞24h后观察细胞荧光表达情况。收集所转染3T3-L1细胞并提取其总RNA,实时荧光定量PCR进一步检测GPR1真核表达载体表达情况;提取6头10周龄陆川猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、皮下脂肪总RNA,实时荧光定量PCR检测GPR1基因mRNA在陆川猪各组织中的表达量。结果表明,陆川猪GPR1基因CDS全长1 068bp,成功将其连接至pEGFP-N1真核表达载体,重组表达载体pEGFP-N1-GPR1质粒和空载pEGFP-N1质粒所转染3T3-L1细胞均能表现出绿色荧光,且空白对照组并未表现出绿色荧光。实时荧光定量PCR结果证实,GPR1基因在重组质粒试验组的表达量极显著高于空载质粒组(P<0.01)。GPR1基因在10周龄陆川猪肝脏中表达量最高,在心脏、脾脏、肺脏、肾脏、皮下脂肪中均有表达,在背最长肌中几乎不表达。本试验成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-GPR1,并获得了GPR1基因组织表达谱,为进一步研究GPR1基因对陆川猪脂肪沉积的影响提供参考。; 谢婉何剑雄夏攀洁吴延军焦迪陈宝剑关志惠兰干球郭亚芬谢炳坤; 关键词：陆川猪表达谱

一种牛体内胚胎抽取装置: 本实用新型公开了一种牛体内胚胎抽取装置，包括收集瓶、三通管A、钢芯、冲卵管、注射器A，所述收集瓶上部设有盖体，三通管A呈T字形结构，三通管A的下端从盖体上部穿过后延伸到收集瓶中，所述注射器A与三通管A一端连接，三通管A另...; 王启芝吴思谦陈宝剑黄光云吴柱月何仁春肖正中贾银海易显凤谢炳坤廖海洪周志扬罗鲜青黄香文信旺梁琪妹李秀良刘征李绍波周俊华温斌华关志惠彭夏云朱文黄春花黄丽霞唐承明

陆川猪PDK4基因序列分析、真核表达载体构建及组织表达分析被引量：7: 2020年; 试验旨在了解陆川猪丙酮酸脱氢激酶4(pyruvate dehydrogenase kinase 4,PDK4)基因CDS区序列信息及其所编码蛋白的结构和功能,构建PDK4基因的真核表达载体,分析PDK4基因在陆川猪不同组织中的表达情况,以期为阐明PDK4基因在陆川猪生长发育过程中的分子机制奠定基础。采用RT-PCR技术扩增陆川猪皮下脂肪PDK4基因CDS区,利用生物信息学软件预测分析其结构与功能,并利用常规分子克隆技术将其插入真核表达载体中获得pEGFP-N1-PDK4,用脂质体法将重组质粒转染3T3-L1细胞并观察荧光,用实时荧光定量PCR检测PDK4基因mRNA在陆川猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、皮下脂肪中的表达情况。结果显示,陆川猪PDK4基因CDS区全长1224 bp,编码407个氨基酸,与NCBI上公布的野猪PDK4基因CDS区同源性达99.8%。对陆川猪PDK4基因所编码的蛋白进行生物信息学分析发现,其分子质量约为46.144 ku,原子总数为6509个,理论等电点(pI)为7.21,带正电荷和负电荷的氨基酸数均为42个。PDK4蛋白可能有2个N-糖基化位点、33个磷酸化位点。亚细胞定位结果发现,PDK4蛋白有34.8%存在于线粒体,30.4%存在于细胞质,26.1%存在于细胞核,质膜和液泡膜各占4.3%。细胞试验发现,对照组和试验组均发出荧光,相较于对照组,试验组中PDK4表达量极显著升高(P<0.01),PDK4基因在皮下脂肪中表达丰度最高,随之为肝脏、肺脏、心脏、脾脏和肾脏,在背最长肌中表达量最低,而且在皮下脂肪中的表达量极显著高于背最长肌(P<0.01)。本试验成功扩增出PDK4基因CDS区并构建了真核表达载体,成功对其结构和功能进行预测分析,为研究陆川猪皮下脂肪沉积的遗传改良提供了参考依据。; 潘鹏丞温斌华谢婉姜长津焦迪陈宝剑关志惠谢炳坤; 关键词：陆川猪克隆真核表达载体

一种养猪猪栏内底板冲水装置: 本发明申请属于猪栏清洁技术领域，具体公开了一种养猪猪栏内底板冲水装置，包括设有斜面的中空壳体，壳体斜面上垂直设有第一固定架、第二固定架、第一套管和第二套管，第一套管和第二套管内转动连接有圆柱型的操控杆，操控杆两端分别设有...; 刘明君覃兆鲜陈宝剑谢炳坤梁旦吕玲燕农素群潘星辰秦谦涛蓝晞王崇洲

育肥猪粪便菌群结构及其与生长速度的相关性分析: 2022年; 【目的】研究育肥猪的生长速度与粪便微生物之间的作用关系,寻找与猪生长速度相关的微生物菌群。【方法】选取50头出生重相近的仔猪,在相同饲养环境中进行饲养管理,生病猪及时转出试验组,125日龄时按体重由高到低排序,把体重最高和最低的4头猪分别分为体重高(51.30 kg±2.57 kg,HW)、低(36.90 kg±2.50 kg,LW)组,通过16S rRNA测序,对125日龄生长育肥猪的粪便微生物区系多样性、群落组成及与生长速度的关联性进行分析。【结果】Alpha多样性分析显示,两组间均无显著差异(P>0.05)。主成分分析结果显示,HW和LW组中能够明显区分菌群结构。粪便微生物结构组成分析表明,HW和LW组的优势菌门均为厚壁菌门、拟杆菌门和螺旋体门,优势菌属为密螺旋体属、乳杆菌属、链球菌属和未被培养菌属Muribaculaceae菌。LW组中拟杆菌门丰度极显著高于HW组(P<0.01),纤维杆菌门丰度显著高于HW组(P<0.05),而髌骨细菌门丰度显著低于HW组(P<0.05)。对粪便微生物结构组成进行差异分析发现,HW组检测到16个特有菌门,LW组检测到1个特有菌门和24个特有菌属。将肠道菌群与生长速度进行相关性分析,共发现10个菌门,18个属与体重(BW)和平均日增重(ADG)呈正相关,7个菌门和12个属与BW和ADG呈负相关。【结论】相同日龄不同生长速度的猪粪便微生物的区系结构存在显著差异,差异菌群可能对猪的生长速度起到了一定的调控作用,本研究结果为研发益生菌和提高猪生长速度提供了参考依据。; 姜长津陈云潘鹏丞陈宝剑关志惠卢慧林谢炳坤覃兆鲜; 关键词：粪便微生物

犊牛卵泡液多肽信息分析被引量：1: 2013年; 【目的】了解成年牛和犊牛卵泡液中多肽的信息表达差异,为完善犊牛卵泡液基础研究及犊牛卵母细胞体外培养体系奠定基础。【方法】采用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)对超排成年牛和超排犊牛卵泡液中的肽段进行分析,根据多肽的信号峰信息,通过MASCOT数据库进行蛋白检索。【结果】从成功构建的成年牛与犊牛卵泡液质谱多肽信号峰模型图谱可知,超排犊牛卵泡液多肽表达图谱中有60～80个信号峰,而超排成年牛的有30～40个信号峰;其中成年牛卵泡液有两个特有信号峰,质荷比为1218.58和1509.77 m/z,犊牛有1个特有信号峰,质荷比为953.54 m/z。利用MASCOT数据库对获得的卵泡液多肽信息进行蛋白检索,发现成年牛卵泡液中有18种蛋白,犊牛卵泡液中有11种蛋白。【结论】犊牛卵泡液中蛋白多肽信息峰数量多于成年牛,但卵泡液中总蛋白数量少于成年牛,这种差异可能是导致犊牛卵母细胞发育能力低于成年牛的重要原因之一。; 赵海峰柯浩张飒陈东峰陈集成陈宝剑沈创韦英将蒋钦杨陆凤花韦英明; 关键词：犊牛卵泡液超数排卵多肽

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