张荷
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐带间充质干细胞分离和初步鉴定被引量：5
- 2016年
- 目的寻找一种高效获得稳定人脐带间充质干细胞的方法。方法采集3例足月剖宫产健康胎儿脐带,剥离血管及外膜得到Wharton’s胶。贴壁培养脐带Wharton’s胶,收集爬出的细胞进行传代,观察细胞形态;取第3代细胞采用流式细胞学检测细胞表面抗原的表达情况;使用成骨、成脂诱导分化的方法对第3代细胞进行分化潜能的鉴定,成骨诱导细胞用茜素红染液染色,成脂诱导细胞用油红O染液染色,并与未诱导分化的细胞进行比较。结果 Wharton’s胶培养10d左右可见梭形细胞从脐带组织逸出,贴壁培养细胞,可见呈放射状或螺旋状生长;流式细胞仪检测结果显示细胞表面抗原CD29、CD44呈高表达,CD34、CD45呈低表达;成脂诱导培养基中细胞油红O染色可见红色脂滴,成骨诱导培养基中细胞茜素红染色可见红色钙质结节,未诱导的细胞未见脂滴及结节样改变。结论贴壁培养的细胞符合间充质干细胞生长的形态,有向成骨、成脂分化的能力;贴壁法培养脐带Wharton胶可得到稳定的间充质干细胞。
- 赵琳刘广芝张荷张丽敏
- 关键词：间充质干细胞成骨诱导分化
- 卵巢癌细胞中CD117^+细胞群分离及其意义被引量：3
- 2016年
- 目的从人卵巢癌细胞株HEY中筛选出CD117^+细胞亚群,探讨其体内、外增殖、呈瘤和分化能力。方法卵巢癌细胞株HEY采用流式细胞仪分选,筛选出CD117^+细胞亚群,分为CD117^+细胞组和CD117^-细胞组,2组分别取100个细胞接种在6孔板中培养2周,采用平板克隆实验检测克隆形成率;分别取100个细胞在无血清DMEM培养基中培养1周,显微镜下观察细胞成球情况;分别取2×10~4个细胞接种在6孔板中培养2周,采用流式分选法检测细胞中CD117^+细胞比例,检测细胞体外分化能力。BALB/c裸鼠16只,根据接种细胞密度分为10~3组和10~4组,每组8只。10~3组将1×10~3个CD117^+细胞和CD117^-细胞分别接种于裸鼠背部的左侧和右侧皮下,10~4组将1×10~4个CD117^+细胞和CD117^-细胞分别接种于裸鼠背部的左侧和右侧皮下,比较2组肿瘤形成情况和肿瘤体积。结果 HEY细胞中CD117^+细胞占1.23%;培养2周后,CD117^+组细胞克隆形成率[(44±4)%]和CD117^+细胞比例(31.4%)高于CD117^-组[(25±3)%、0](P<0.05);培养1周后,CD117^+组细胞可形成状态良好、连接紧密的细胞球,生长速度较快,每个细胞球由40~50个细胞组成,CD117^-组细胞呈悬浮、球形生长,不能增殖成细胞球;接种CD117^+细胞4周后,103组裸鼠皮下移植瘤肿瘤体积[(0.300±0.042)cm^3]小于10~4组[(0.490±0.031)cm^3](P<0.05),接种CD117^-细胞后,10~3组和10~4组裸鼠均未成瘤。结论卵巢癌细胞株HEY中仅小部分表达CD117^+抗原标记,但该亚群细胞具有较强增殖和分化能力,可在无血清悬浮培养中形成细胞球。
- 张荷张丽敏崔海涛赵琳刘广芝
- 关键词：卵巢癌CD117肿瘤干细胞
- 沉默β-catenin对卵巢癌干细胞特性的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨β-catenin蛋白对卵巢癌干细胞特性及细胞增殖的影响。方法:采用β-catenin siRNA技术沉默SKOV3中β-catenin基因,形成SKOV3-RNAi细胞。转染空载体siRNA的SKOV3-NC细胞作为对照。流式细胞技术测定CD44、CD117表达;通过卡铂作用后细胞的平板克隆计数及MTT法检测沉默β-catenin基因后细胞增殖能力,通过裸鼠背部皮下移植瘤实验检测细胞的体内成瘤能力。结果:与SKOV3-NC细胞相比,SKOV3-RNAi细胞在无血清培养条件下细胞球形成明显减少(P<0.05),且CD44、CD117荧光强度均明显降低(P<0.05)。卡铂作用于细胞后,SKOV3-RNAi细胞克隆数的减少量比SKOV3-NC细胞更为显著,同时细胞生长速度明显减慢;裸鼠体内,SKOV3-RNAi的成瘤能力较SKOV3-NC细胞明显降低。结论:沉默β-catenin基因后,卵巢癌细胞系SKOV3的干细胞特性明显减弱,细胞增殖也受到抑制。
- 张荷张纳袁蒙蒙刘广芝
- 关键词：卵巢癌Β-CATENIN肿瘤干细胞细胞增殖
- 高表达ALDH1对卵巢癌HEY细胞株干细胞特性的影响被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨通过无血清悬浮培养的方法培养卵巢癌HEY细胞株,富集悬浮细胞球并检测悬浮细胞中乙醛脱氢酶1(ALDH1)表达的情况,评价ALDH1是否可作为卵巢癌干细胞的标志物。方法:1用含有生长因子的无血清培养基对卵巢癌HEY细胞株进行悬浮培养获得细胞球,与贴壁生长的细胞进行比较。2通过流式细胞检测技术筛选出ALDH1阳性(ALDH1^+)及ALDH1阴性(ALDH1^-)细胞,通过软琼脂克隆形成实验、裸鼠移植瘤实验检测两组细胞的自我复制、增殖、克隆形成及侵袭能力。3通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)方法检测两组细胞经卡铂药物处理后体外增殖能力。4Western blotting检测两组细胞中的β-连环素(β-catenin)的表达情况。结果:1悬浮细胞中ALDH1^+细胞比例明显高于贴壁细胞(P<0.05)。2显微镜下观察,ALDH1^+细胞球克隆形成率高于ALDH1^-(P<0.05);ALDH1^+裸鼠瘤体积大于ALDH1^-移植瘤(P<0.05)。3经卡铂药物处理后,ALDH1^+细胞球从第4天开始增殖情况明显高于ALDH1^-组(P<0.05)。4Western blotting检测示,ALDH1^+中β-catenin的表达明显高于ALDH1^-(P<0.05)。结论:用含有生长因子的无血清培养基培养卵巢癌HEY细胞株能够形成卵巢癌干细胞球并高表达ALDH1,ALDH1^+细胞恶性程度更高,化疗耐药性能更强,ALDH1可作为一种卵巢癌干细胞标志物。
- 张荷张纳袁蒙蒙刘广芝
- 关键词：肿瘤干细胞卵巢癌
- 斯钙素1对卵巢癌干细胞特性调节作用的实验研究
- 卵巢癌位于盆腔深部，病变早期不易被发现，且发病机制复杂，使其已成为威胁女性生命和健康的主要肿瘤之一，5年生存率徘徊在40％左右。尽管中外学者对卵巢癌的发生发展机制已经进行了大量的研究，但是30年来卵巢癌治疗效果并未明显改...
- 张荷
- 关键词：卵巢癌发病机制斯钙素肿瘤干细胞
