李丹丹
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市渝中区科技计划项目国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA沉默FOXM1基因表达对人鼻咽癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响被引量：11
- 2018年
- 目的:研究特异性siRNA沉默转录因子叉头框M1(forkhead box M1,FOXM 1)基因表达对人鼻咽癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响,并探讨其相关的分子机制。方法:将特异性靶向FOXM 1基因的siRNA(FOXM1-siRNA)转染至鼻咽癌5-8F细胞后,采用RT-PCR、实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测FOXM 1基因表达沉默效果。然后采用MTT法、FCM法、AnnexinⅤ-FITC/PI双染法和蛋白质印迹法分别检测FOXM 1基因表达沉默后鼻咽癌细胞增殖、周期分布、凋亡和紫杉醇敏感性的变化,以及相关蛋白的表达。结果:FOXM1-siRNA转染后5-8F细胞中FOXM1 mRNA及蛋白的表达水平明显降低(P值均<0.01)。FOXM 1基因表达沉默后,5-8F细胞的增殖活性明显降低(P<0.05),增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达水平明显降低(P<0.01);同时,G1期细胞所占比例明显升高(P<0.01),S期细胞所占比例降低(P<0.05),Cyclin D1表达下调(P<0.01);细胞凋亡率明显升高(P<0.01),Bcl-2表达下调(P<0.01),Bax表达上调(P<0.01);细胞对紫杉醇的敏感性明显增强(P<0.01),多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)表达水平降低(P<0.01)。结论:特异性siRNA沉默FOXM 1基因表达可抑制鼻咽癌5-8F细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并提高细胞对紫杉醇的敏感性;其机制可能与下调PCNA、Cyclin D1、MRP1和Bcl-2表达,以及上调Bax表达有关。
- 雷越万婕文韬宇李丹丹陈鸿雁
- 关键词：鼻咽肿瘤
- 磷脂转运蛋白在烟草诱导RLE-6TN细胞株发生上皮间质转化中的作用
- 2016年
- 目的探讨磷脂转运蛋白（PLTP）在烟草提取物（CSE）诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN发生上皮间质转化（EMT）中的作用。方法体外培养RLE-6TN细胞株24h，分为4组，每组3孔，分别加入0％、0，25％、0．5％和1％CSE培养2d，检测E-钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达以及细胞和CSE共培养3d检测PLTP、EMT相关蛋白（E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白）的表达量。将siRNA．PLTP转染入RLE-6TN中，Westernblot法检测CSE对转染后PLTP和EMT相关蛋白的影响。结果不同浓度的CSE作用后，E-钙黏蛋白mRNA分别为1．01±0．05、0．74±0．05、0．65±0．03、0．30±0．08，呈浓度依赖下降；波形蛋白mRNA在1％CSE组（1．88±0．49）表达与对照组（1．01±0．20）相比增加。PLTP蛋白含量分别为0．42±0．02、0．89±0．25、1．08±0．18、1．61±0．06；E-钙黏蛋白蛋白含量分别为1．61±0．04、1．08±0．10、0．63±0．08、0．68±0．17；N-钙黏蛋白蛋白含量分别为0．60±0．15、0．57±0．26、0．88±0．30、1．94±0．54；波形蛋白蛋白含量分别为0．61±0．05、0．98±0．16、1．07±0．14、1．34±0。19。1％组与对照组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。siRNA．PLTP和CSE处理细胞后，E-钙黏蛋白蛋白表达量较对照组明显增加（P〈0．05），N-钙黏蛋白和波形蛋白蛋白表达量较对照组明显降低（P〈0．05），siRNA—PLTP可部分逆转CSE诱导RLE-6TN细胞发生上皮间质转化。结论PLTP能促进烟草诱导RLE-6TN发生上皮间质转化。
- 巫凤苹陈亚娟余秀英廖科李丹丹陈虹
- 关键词：上皮间质转化
- 下调FoxM1通过激活JNK/线粒体通路增加人鼻咽癌细胞对紫杉醇的敏感性被引量：2
- 2018年
- 目的探讨特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默转录因子叉头框M1(FoxM1)对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖、凋亡、紫杉醇敏感性的影响及可能的分子机制。方法采用siRNA靶向沉默鼻咽癌HONE-1细胞FoxM1表达并通过RT-PCR、实时定量PCR、Western blot检测转染后FoxM1的表达水平。siRNA转染后细胞的增殖和对紫杉醇的敏感性采用MTT法检测,流式细胞仪检测细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。Western blot检测Ki67、CyclinE1、多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)及c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。结果转染后FoxM1 mRNA及蛋白的表达均被下调(P<0.01)。siRNA转染组细胞增殖速率减缓(P<0.05),Ki67表达降低(P<0.05)。siRNA转染组G_1期细胞比例增加(P<0.01),S期比例减低(P<0.05),CyclinE1低表达(P<0.01)。同时,siRNA+紫杉醇组凋亡率明显高于阴性及空白对照+紫杉醇组(P<0.01)。siRNA转染组细胞MDR1水平下降(P<0.05),对紫杉醇的敏感性较两对照组明显增强(P<0.01)。siRNA+紫杉醇组与阴性对照+紫杉醇组相比p-JNK1、p-c-Jun、Bax表达上调(P<0.01),Bcl-2表达下调(P<0.01)。结论特异性siRNA沉默FoxM1表达可以影响JNK/线粒体通路活性,抑制鼻咽癌HONE-1细胞增殖,促进其凋亡,提高其对紫杉醇的敏感性。
- 雷越万婕李丹丹叶琳刘亚男祝琳陈鸿雁
- 关键词：鼻咽癌紫杉醇
- 血管内皮钙黏蛋白对非小细胞肺癌侵袭转移的影响及其作用机制被引量：3
- 2016年
- 目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)的表达和其对细胞侵袭迁移能力的影响及作用机制。方法采用免疫组织化学、RT-PCR法检测VE-cadherin在人NSCLC组织和癌旁组织中的表达;Western blot法检测VE-cadherin在NSCLC细胞株中的表达;Transwell实验检测VE-cadherin对NCI-H460细胞侵袭迁移能力的影响;免疫荧光检测VE-cadherin与P120ctn在NCI-H460细胞上的定位;免疫共沉淀检测VE-cadherin与P120ctn的连接情况。结果 VE-cadherin在肺癌组织中表达水平较癌旁组织上调,其表达与NSCLC有无吸烟史、有无淋巴结转移有关(P<0.05)。VE-cadherin在PG、NCI-H460、A549细胞株表达水平不同,干扰VE-cadherin表达后,NCI-H460细胞侵袭迁移能力下调,低氧可诱导VEcadherin在NCI-H460细胞表达增强,VE-cadherin与P120ctn存在结构上的连接。结论 VE-cadherin可能通过缺氧信号活化及P120ctn介导参与NSCLC侵袭、转移。
- 李丹丹周俊豪陈虹
- 关键词：血管内皮钙黏蛋白非小细胞肺癌P120连环蛋白
- FoxM1通过Wnt/β-catenin信号通路对鼻咽癌细胞5-8F增殖、迁移的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨FoxM1对鼻咽癌细胞5-8F恶性生物学行为的影响及其可能机制。方法将化学合成的靶向FoxM1的siRNA转染鼻咽癌细胞5-8F(FoxM1-siRNA组),并设立空白对照组、阴性对照组,采用RT-PCR及Western blot检测FoxM1表达变化。采用MTT法、FCM法、Transwell法分别检测下调FoxM1表达对细胞增殖、周期、凋亡、迁移的影响。Western blot检测下调FoxM1表达后β-catenin、C-Myc、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达变化。结果转染FoxM1-siRNA的5-8F细胞FoxM1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。下调FoxM1表达可抑制5-8F细胞增殖(P<0.05),FoxM1-siRNA组的凋亡率为(22.68±0.67)%,较阴性对照组[(11.74±1.36)%]和空白对照组[(10.94±1.52)%]显著增加(P<0.05),细胞周期阻滞于G_0/G_1期。FoxM1-siRNA组细胞穿膜数(100.00±10.97)明显低于阴性对照组(246.00±6.66)和空白对照组(233.70±12.41),细胞迁移能力降低(P<0.05)。下调FoxM1的表达可抑制β-catenin细胞核表达,抑制C-Myc、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9总蛋白表达(P<0.001)。结论 FoxM1表达下调抑制鼻咽癌细胞5-8F的增殖,诱导细胞凋亡,降低细胞迁移能力,使细胞周期阻滞于G_0/G_1期。其机制可能是通过抑制Wnt通路关键蛋白β-catenin细胞核表达从而抑制Wnt通路活性实现的。
- 万婕祝琳雷越刘亚男文韬宇李丹丹叶琳陈鸿雁
- 关键词：鼻咽癌FOXM1WNT/Β-CATENIN信号通路细胞增殖细胞迁移
