郭姗
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
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- 抗菌肽对肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM增殖和耐药性影响被引量：6
- 2019年
- 目的检测抗菌肽对耐药细胞Bel-7402/ADM增殖和耐药性的影响,为探讨抗菌肽在肝癌治疗方面的前景和应用价值提供参考依据。方法采用阿霉素浓度梯度递增法体外诱导建立人肝癌多药耐药细胞系Bel-7402/ADM,检测细胞对化疗药物的敏感性;提取家蝇幼虫抗菌肽,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测抗菌肽对肝癌细胞的抑制作用,流式细胞仪检测抗菌肽对细胞周期分布和进入细胞内阿霉素浓度的影响,并采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测抗菌肽对Bel-7402/ADM细胞多药耐药基因MDR1表达的影响。结果建立了对阿霉素以及多种化疗药物均耐药的肝癌细胞系Bel-7402/ADM,Bel-7402/ADM对5–氟尿嘧啶、长春新碱、紫杉醇和阿霉素的耐药指数(RI)分别为15.94、8.45、8.11和10.96。抗菌肽对Bel-7402/ADM细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为(463.67±16.93)μg/mL,低于对Bel-7402细胞IC_(50)的(596.34±19.27)μg/mL(t=8.959,P <0.001)。抗菌肽作用后,Bel-7402和Bel-7402/ADM细胞均出现G_0/G_1期比例升高,S期比例下降;Bel-7402/ADM细胞对阿霉素的RI由10.96降至7.10,而Bel-7402细胞对阿霉素的敏感性无明显变化;Bel-7402/ADM细胞内阿霉素的平均荧光强度由(24.16±3.53)增高至(48.27±5.50)(t=6.390,P=0.003),而Bel-7402细胞荧光强度增高不明显;Bel-7402/ADM细胞多药耐药基因1(MDR1)的相对表达量由(1.749±0.020)降至(1.071±0.044)(t=24.297,P <0.001)。结论肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM对抗菌肽不耐药,且抗菌肽可逆转Bel-7402/ADM细胞的耐药性。
- 郭姗赵瑞君程璟霞
- 关键词：抗菌肽多药耐药细胞增殖耐药性肝癌
- 家蝇幼虫抗菌肽粗提物对人肝癌HepG2细胞凋亡、钙离子浓度及线粒体膜电位变化的影响被引量：3
- 2017年
- 本文从肿瘤细胞凋亡及作用机制的角度出发初步探讨了家蝇幼虫抗菌肽粗提物对人肝癌HepG2细胞的影响。采用Hoechst33258荧光染色法在荧光显微镜下观察家蝇抗菌肽对HepG2细胞形态学的影响。并通过流式细胞术分别观察家蝇抗菌肽粗提物对HepG2细胞凋亡、钙离子浓度及线粒体膜电位变化的影响。Hoechst33258荧光染色法结果显示家蝇抗菌肽粗提物作用于HepG2细胞48h后能够引起细胞核发生核凝聚、染色质趋边化、核碎裂等凋亡形态学的改变；流式细胞仪检测结果显示家蝇抗菌肽粗提物能够诱导HepG2细胞发生凋亡、线粒体膜电位下降、细胞内钙离子浓度增加的现象。因此，我们推测家蝇抗菌肽可能通过增加HepG2细胞内钙离子，降低线粒体膜电位，进而诱导细胞凋亡的发生。
- 邢佳欣郭姗赵瑞君朱爱玉刘娟娟
- 关键词：家蝇幼虫肝癌HEPG2细胞
- 刚地弓形虫棒状体蛋白17激活活化蛋白1信号抑制小鼠巨噬细胞凋亡
- 2016年
- 目的检测刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)棒状体蛋白17(rhoptry protein 17,ROP17)对γ干扰素(IFN-γ)诱导的小鼠单核巨噬细胞(J774A.1)凋亡的调控作用。方法将重组质粒p3×Flag-CMV-14/Tg ROP17和p3×Flag-CMV-14空质粒(对照组)转染J774A.1细胞后,加入重组IFN-γ诱导细胞凋亡,通过流式细胞术和蛋白质印迹(Western blotting)检测ROP17对细胞凋亡的调控作用,检测c-Jun磷酸化水平及活化形式的半胱天冬酶3(Caspase 3)、Bcl-2、Bcl-x L和Bcl-3等凋亡相关蛋白的表达情况。J774A.1细胞共转染p3×FlagCMV-14/Tg ROP17和c-Jun sh RNA,加入重组IFN-γ诱导细胞凋亡,Western blotting检测ROP17对凋亡的调控作用及凋亡相关蛋白Bcl-3的表达。结果流式细胞术显示,过表达ROP17组细胞凋亡率为(3.73±0.51)%,明显低于对照组的(7.78±1.10)%(P<0.05)。Western blotting结果显示,过表达ROP17组磷酸化c-Jun蛋白相对表达量为0.196±0.028,对照组为0.075±0.010(P<0.05);Bcl-3相对表达量为0.461±0.063,对照组为0.108±0.013(P<0.05)。活化形式的Caspase 3相对表达量为0.015±0.004,对照组为0.174±0.026(P<0.05)。Bcl-2在过表达ROP17组和对照组中的相对表达量分别为0.119±0.013和0.117±0.018,Bcl-x L则分别为0.124±0.015和0.121±0.023,差异均无统计学意义(P>0.05)。在c-Jun sh RNA有效抑制c-Jun及其磷酸化表达的条件下,活化形式的Caspase 3在RNA干扰组和对照组的相对表达量分别为0.147±0.024和0.087±0.010(P<0.05),Bcl-3则分别为0.085±0.010和0.162±0.011(P<0.05)。结论ROP17抑制IFN-γ诱导的J774A.1细胞凋亡依赖于c-Jun的磷酸化及Bcl-3的表达。
- 王海龙邢佳欣郭姗李佳洁刘红丽孟晓丽刘娟娟赵瑞君殷国荣
- 关键词：刚地弓形虫细胞凋亡活化蛋白1
- 昆虫抗菌肽在抗肿瘤方面的研究与应用被引量：2
- 2018年
- 昆虫抗菌肽是生物防御体系的重要组成部分,具有一定的抗肿瘤效果,在细胞选择性、理化性质的稳定性及耐药性方面具有明显优势。本文从昆虫抗菌肽的分类、活性检验、作用机制等方面对昆虫抗菌肽的研究现状进行了综述,并讨论了利用基因工程技术制备抗菌肽并用于肿瘤治疗的前景。
- 王瑜琼李沛哲王琪郭姗赵瑞君程璟侠
- 关键词：昆虫抗菌肽肿瘤
- 家蝇幼虫抗菌肽对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM的影响
- 目的:阿霉素诱导建立人肝癌多药耐药细胞系,检测家蝇幼虫抗菌肽对耐药细胞的抑制作用,探究抗菌肽对肝癌细胞耐药性的逆转作用及机制。方法:1.采用阿霉素小剂量持续培养、浓度梯度递增法建立人肝癌耐药细胞系。2.培养细胞,绘制细胞...
- 郭姗
- 关键词：抗菌肽多药耐药P-糖蛋白逆转
- 文献传递
- 肝癌耐药细胞株Bel-7402/ADM的建立以及家蝇幼虫抗菌肽对其耐药性逆转作用的研究被引量：2
- 2017年
- 本研究通过建立人肝癌多药耐药细胞系,研究家蝇抗菌肽对该耐药细胞耐药性的逆转作用。采用阿霉素浓度梯度递增体外诱导法建立人肝癌耐药细胞株Bel-7402/ADM;采用MTT法检测阿霉素、顺铂、吉西他滨以及抗菌肽对细胞的毒性作用,并计算Bel-7402/ADM细胞对阿霉素、顺铂、吉西他滨耐药指数(RI);荧光显微镜观察细胞内阿霉素的荧光强度;采用流式细胞术检测细胞周期及细胞表面P-糖蛋白的含量。细胞毒性检测结果显示Bel-7402/ADM对阿霉素、顺铂和吉西他滨耐药指数分别为10.96、1.74和8.14,周期分析结果显示Bel-7402/ADM细胞的细胞周期较Bel-7402细胞发生改变:G0/G1期细胞比例明显升高,S期的细胞比例下降,荧光显微镜观察Bel-7402/ADM细胞内阿霉素量明显低于Bel-7402细胞,流式细胞术检测结果显示,Bel-7402/ADM细胞表面P-gp含量明显高于Bel-7402细胞,表明建成的Bel-7402/ADM细胞对多种药物耐药。抗菌肽对细胞的毒性作用检测显示,抗菌肽对Bel-7402/ADM细胞抑制作用呈剂量依赖性,但耐药细胞对抗菌肽并无耐药性。小剂量(100 mg/m L)的抗菌肽作用后,Bel-7402/ADM细胞的耐药指数减小至7.1,荧显微镜观察Bel-7402/ADM细胞内阿霉素荧光强度增强,流式细胞术检测Bel-7402/ADM细胞表面P-gp表达降低。结果表明,抗菌肽有可能通过降低细胞表面P-gp的表达起到逆转Bel-7402/ADM细胞耐药性的作用。
- 郭姗邢佳欣赵瑞君程璟侠
- 关键词：抗菌肽肝癌多药耐药逆转P-糖蛋白
- 家蝇幼虫抗菌肽对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响？
- 2016年
- 为了更全面的探究家蝇抗菌肽的抗肿瘤作用，本文从肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移的角度研究家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用。通过针刺诱导家蝇三龄幼虫、低温离心、固相萃取后冻干获取抗菌肽粗提物，将所获抗菌肽调整至不同浓度进行CCK8细胞增殖实验。并通过细胞划痕实验和细胞侵袭实验判断家蝇抗菌肽对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响。实验结果显示家蝇抗菌肽能够明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖，且作用效果与浓度呈剂量依赖特点。低浓度的抗菌肽（60μg／mL）能有效抑制肝癌HepG2细胞迁移及侵袭。
- 邢佳欣刘娟娟聂守民郭姗赵瑞君程璨侠
- 关键词：家蝇幼虫抗菌肽肝癌HEPG2细胞迁移
