孙莉
- 作品数：13 被引量：8H指数：1
- 供职机构：青海大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海大学中青年科研基金青海省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 细粒棘球蚴脂肪酸转运蛋白生物学特性分析被引量：1
- 2021年
- 本研究根据NCBI GenBank数据库中的Eg-FATP氨基酸序列,采用生物信息学方法分析细粒棘球蚴脂肪酸转运蛋白(Eg-FATP)理化性质,亚细胞定位、抗原表位、信号肽、跨膜区二级和三级结构、系统进化树、蛋白互作网络等,并通过qPCR方法探究其在原头蚴和包囊壁的差异表达,旨在为后期相关的研究提供理论支持和数据参考。结果显示,Eg-FATP蛋白无信号肽,无跨膜区,亚细胞定位于细胞质;该蛋白有10个B细胞线性表位和14个CTL细胞表位;系统发育分析显示:细粒棘球蚴的FATP蛋白与多房棘球蚴亲缘关系较近,细粒棘球蚴中国株和英国株之间的氨基酸序列同一性较高,为97%左右。预测的互作功能蛋白可能参与胆固醇代谢的调节、脂肪酸跨血屏障的转运等过程;GO和KEGG富集分析结果显示,Eg-FATP对长链和超长链脂肪酸具有酰基辅酶A连接酶活性;qPCR结果显示,FATP基因在原头蚴阶段转录水平较高于包囊壁,具有统计学意义(P<0.05)。本研究对细粒棘球蚴FATP基因的生物学特性进行了初步分析,为进一步揭示其生物学功能奠定了基础。
- 田美媛张耀刚李志琴樊海宁侯静李建华黄登亮孙莉江源童思贤张文诗马艳艳
- 关键词：细粒棘球蚴生物信息学抗原表位
- 一种能够精确控制气体压力与浓度的细胞组织培养装置
- 本实用新型涉及一种能够精确控制气体压力与浓度的细胞组织培养装置，属于细胞组织培养领域，包括培养室及用于实时维持培养室内气体的压力稳定在预设的压力值的压力控制系统、维持培养室温度的温度控制系统和维持培养室气体相对浓度的气体...
- 江源李建华侯静孙莉张耀刚田美媛黄登亮马艳艳
- 文献传递
- 乳酸对人非小细胞肺癌细胞A549生物学特性影响的研究
- 2023年
- 背景肿瘤的重要特征之一是代谢异常,乳酸作为代谢产物也参与肿瘤代谢。目的探讨乳酸对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549糖酵解压力、增殖、迁移和周期等生物学特性的影响。方法培养人非小细胞肺癌细胞A549,分为对照组、5 mmol/L乳酸处理组和10 mmol/L乳酸处理组。对照组不作任何处理,其他两组乳酸处理24 h后,通过Seahorse细胞代谢分析仪分析乳酸处理后A549细胞的糖酵解压力和线粒体底物选择,qPCR检测糖酵解相关基因(HK3、LDHA、LDHB、PKM)和细胞周期及迁移相关基因(CCNE1、CCND1、CCNB1、CDK2、CDH1、TWIST1、SNAI2)mRNA表达水平,Western blot检测糖酵解相关蛋白(G6PD、PKM2、HK1和LDHA)水平。利用实时无标记细胞分析(real time cellular analysis,RTCA)、流式细胞术分析乳酸对NSCLC细胞A549增殖、迁移、周期等生物学特性的影响。结果两个乳酸处理组相较对照组糖酵解降低,糖酵解最大能力及糖酵解储备均降低且10 mmol/L乳酸处理组比5 mmol/L组降低更显著(P<0.05),糖酵解关键酶在mRNA和蛋白水平下调。10 mmol/L乳酸处理组与对照组相比,对脂肪酸的依赖性增强,对谷氨酰胺的氧化能力减弱(P<0.05);RTCA结果显示两个乳酸处理组相较对照组细胞迁移降低,增殖能力降低,10 mmol/L乳酸处理组较5 mmol/L组增殖和迁移能力下降更为显著(P<0.05)。两个乳酸处理组CCNE1、CCND1、CCNB1、TWIST1基因m RNA水平下调,CDK2、CDH1基因mRNA水平上调。流式结果显示10 mmol/L乳酸处理组G0/G1期细胞增多(P<0.01),S期细胞数量降低(P<0.05),G2/M期细胞数量降低(P<0.05)。结论加入外源乳酸处理后,A549细胞糖酵解能力降低,且与乳酸浓度呈负相关,细胞氧化底物变化,随着乳酸浓度的增加其细胞增殖及迁移能力显著降低,通过细胞周期结果分析后推测加入外源乳酸可能使A549细胞抑制在G1期。
- 孙莉江源黄登亮侯静张耀刚田美媛李志琴童思贤姜军
- 关键词：乳酸非小细胞肺癌细胞肺癌糖酵解生物学特性
- 盐酸川芎嗪对低压低氧环境下大鼠海马形态学及GABAB1R与FOXP2表达的影响被引量：2
- 2018年
- 目的研究盐酸川芎嗪对低压低氧环境下大鼠海马形态学及海马中γ-氨基丁酸B1受体（GABAB1R）和叉头框蛋白P2（FOXP2）表达的影响。方法将44只SD大鼠随机分为常氧对照组（NC）、低氧对照组（HC）、低氧给药组（TMP）,其中,低氧组按照不同时间段又分为1、3、7、15、30 d组,每组4只。采用尼氏染色法观察给药后各组大鼠海马神经元形态学的变化;采用免疫组织化学法检测GABAB1R和FOXP2蛋白的表达情况。结果随着低氧干预天数的增加,大鼠海马神经元的受损程度越明显,具体表现为：尼氏小体的数量逐渐变少至难以观察,神经细胞出现水肿,细胞之间的分界逐渐模糊,细胞核从清晰到模糊;但经盐酸川芎嗪干预后,尼氏小体的数量趋于正常,细胞核清晰可见,细胞排列整齐,且水肿现象也逐渐趋于正常。第1天时,HC组和TMP组大鼠海马GABAB1R和FOXP2的表达比较无明显差异;与TMP组比较,从第3天起,HC组大鼠海马GABAB1R的表达明显减少,第7天起HC组大鼠海马FOXP2蛋白的表达明显减少;HC组与NC组之间比较大鼠海马GABAB1R和FOXP2的表达存在显著性差异;TMP组与NC组之间无显著性差异。结论盐酸川芎嗪可对低压低氧环境下大鼠大脑的认知功能起到一定的保护作用,其机制可能是增加大鼠海马GABAB1R和FOXP2蛋白的表达。
- 李晓娜孙莉靳国恩周振米国霞阮珍周玲李生花
- 关键词：盐酸川芎嗪低压低氧尼氏小体形态学
- 一种用于检测血浆中多房棘球绦虫游离DNA的试剂盒及其检测方法
- 本申请涉及疾病检测技术领域，具体公开了一种用于检测血浆中多房棘球绦虫游离DNA的试剂盒及其检测方法。一种用于检测血浆中多房棘球绦虫游离DNA的试剂盒，包括用于检测多房棘球绦虫DNA的两组U1snRNA基因和CYTB基因的...
- 马艳艳江源孙莉张灵强张耀刚张涛杨紫晗侯静
- 不同海拔下大鼠肺组织中EGLN1基因的表达及其与肺动脉压的相关性被引量：1
- 2016年
- 目的探讨不同海拔下大鼠肺组织中Eg1九同源物1（EGLN1）基因表达及其与平均肺动脉压（mPAP）的相关性。方法121只雄性Wistar大鼠用随机数字表法随机分为低海拔组（11只）、中海拔组和高海拔组，后两组又各分为低氧第1、3、7、15和30天5小组，每小组11只。低海拔组于498m地区进行生理信号采集和组织样本的收集，中海拔组置于2260m自然环境，高海拔组置于低压氧舱，模拟海拔为4500m。中海拔组和高海拔组在低氧暴露第1、3、7、15和30天进行生理信号采集和组织样本的收集。用生理信号采集系统测定mPAP；Western印迹法测定肺组织EGLNl蛋白表达水平，用Pearson相关性分析其蛋白是否与低氧下肺动脉高压的形成有关；用实时定量-PCR测定肺组织EGLN1 mRNA水平，用2^-△△ct倍数法分析PCR数据，评估低氧下EGLN1基因是否为肺动脉高压形成的初始原因。结果低海拔组mPAP为（20．0±3．2）mmHg（1mmHg=0．133kPa）；中海拔组mPAP于第15天开始有所升高，第30天为（22．7±4．1）mmHg，但与低海拔组差异无统计学意义（P〉0．05）；高海拔组mPAP于暴露低氧第7天[（28．7±7．7）mmHg]就显著高于低海拔组（P〈0．05），第30天[（42．3±9．1）mmHg]升高更明显（P〈0．001）。高海拔组EGLN1蛋白表达水平随暴露低氧时间的延长而逐渐下降，且均显著低于低海拔组和中海拔组（均P〈0．05），EGLN1蛋白表达水平与mPAP呈负相关（r=-0．662，P〈0．05）。高海拔组EGLN1 mRNA表达水平显著升高，是中海拔组的72倍和低海拔组的近300倍（均P〈0．001）。结论大鼠肺组织EGLN1基因表达随海拔升高而升高；但其蛋白水平却相反，并与mPAP呈负相关。
- 李生花李胜孙莉白振忠杨全余嘎琴靳国恩
- 关键词：高血压肺性
- 蛋白磷酸酶4在缺血性脑卒中大鼠肝、脑组织中的差异表达
- 2022年
- 目的探讨蛋白磷酸酶(PP)4在缺血性脑卒中大鼠肝、脑组织中的表达是否存在差异。方法45只健康雄性SD大鼠随机分为正常(NORMAL)组、假手术(SHAM)组、大脑中动脉阻塞(MCAO)组各15只,MCAO组再分为MCAO-2 h组、MCAO-6 h组、MCAO-12 h组3个亚组(各5只)。通过改良线栓法建立MCAO模型模拟缺血性脑卒中。采用尼氏染色观察脑组织形态学改变;经qPCR及Western印迹测定脑卒中后PP4 mRNA及蛋白水平的变化。结果尼氏染色显示MCAO组梗死区尼氏小体数量减少,随时间延长,尼氏小体数量递减,NORMAL组和SHAM组未见明显异常;MCAO-2 h组、MCAO-6 h组、MCAO-12 h组脑组织PP4C mRNA水平较NORMAL组显著降低(P<0.05,P<0.001);MCAO-2 h组肝组织PP4C mRNA水平较NORMAL组显著升高(P<0.001);MCAO-2 h、MCAO-6 h组脑肝组织PP4R2蛋白水平较NORMAL组显著降低(P<0.001,P<0.01);MCAO-2 h组、MCAO-6 h组、MCAO-12 h组肝组织PP4R2蛋白水平较NORMAL组显著升高(P<0.01);除MCAO-12 h组肝组织PPX蛋白水平较NORMAL组显著降低(P<0.01)外,各组脑组织、肝组织PPX蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论PP4在缺血性脑卒中肝、脑组织表达存在差异,提示可能参与了缺血性脑卒中缺氧的适应。
- 田美媛侯静黄登亮张耀刚江源孙莉张涛李志琴童思贤马艳艳
- 关键词：能量代谢
- 乳酸上调非小细胞肺癌细胞中总胆固醇水平的机制研究被引量：1
- 2023年
- 背景胆固醇与非小细胞肺癌发生相关并增强非小细胞肺癌细胞耐药性,研究显示乳酸能通过降低pH使SREBP2活化进而上调细胞内胆固醇水平。目的探索乳酸调节非小细胞肺癌细胞内总胆固醇水平的其他分子机制。方法分析TCGA数据库中非小细胞肺癌乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)与胆固醇合成代谢酶基因表达水平的相关性。将人肺支气管上皮细胞BEAS-2B和人非小细胞肺癌细胞H1299分为对照组(正常培养)和乳酸处理组(在培养基中添加乳酸),将人非小细胞肺癌细胞A549分为对照组(正常培养)、乳酸处理组(在培养基中添加乳酸)和盐酸处理组(在培养基中添加盐酸)。利用总胆固醇测定试剂盒测定细胞内总胆固醇水平,qPCR测定细胞内胆固醇合成代谢酶基因的mRNA水平。利用染色质免疫共沉淀分析对照组和乳酸处理组A549细胞中胆固醇合成代谢酶基因启动子区组蛋白乳酸化水平。结果Wilcoxon秩和检验分析TCGA数据结果显示,LDHA高表达的非小细胞肺癌细胞中胆固醇合成代谢酶基因HMGCR、ACAT1、ACAT2、SQLE和FDFT1表达水平升高(P<0.05)。独立样本t检验分析对照组和乳酸处理组细胞内总胆固醇水平及胆固醇合成代谢酶基因的mRNA水平,结果显示,与对照组细胞相比,乳酸处理组BEAS-2B、A549和H1299细胞内总胆固醇水平升高(P<0.01),且乳酸处理组BEAS-2B和A549细胞中HMGCR、FDPS、GGPS1和SQLE基因mRNA水平也升高(P<0.01)。与对照组相比,乳酸和盐酸处理组A549细胞内总胆固醇水平均升高(P<0.05),且HMGCR和FDFT1基因mRNA水平也升高(P<0.01),但盐酸的作用显著弱于乳酸(P<0.01)。染色质免疫共沉淀结果显示,乳酸处理组A549细胞中HMGCR、SQLE和GGPS1基因启动子区组蛋白乳酸化水平有升高趋势;与对照组相比,乳酸处理组A549细胞内总胆固醇水平升高(P<0.01),而乳酸脱氢酶抑制剂草氨酸钠能逆转乳酸上调A549细胞内总胆固醇
- 黄登亮张耀刚侯静田美媛江源孙莉李志琴童思贤郑凯曼姜军
- 关键词：乳酸非小细胞肺癌细胞胆固醇乙酰辅酶A
- 大鼠感染泡球蚴后外周血及脾脏中滤泡辅助T淋巴细胞的变化
- 2021年
- 目的分析泡球蚴感染宿主后外周血和脾脏中滤泡辅助T淋巴细胞(Tfh)水平与包虫病进展的关系。方法20只SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组10只,模型组开腹直视下在右肝接种约2000个原头节,对照组不做任何处理,3个月后麻醉处死SD大鼠,取外周血和脾脏细胞,以CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)为Tfh细胞的标记,使用流式细胞术检测外周血和脾脏中Tfh细胞的水平。使用t检验比较两组之间Tfh细胞的差异。结果大鼠感染泡球蚴3个月后,肝脏可见明显病灶,HE染色显示病灶中可见原头节。泡球蚴感染模型组外周血中CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞在CD4+细胞中的平均占比为25.63%±3.47%,正常对照组为11.12%±2.94%,2组比较差异有统计学意义(t=10.230,P<0.001),模型组CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞在所有细胞中所占的比例较正常对照组下降显著(0.08%±0.02%vs 0.18%±0.05%,t=5.520,P<0.001);在所有细胞中,模型组脾脏中CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞所占的比例(3.00%±0.42%)显著低于正常对照组(5.30%±1.40%)(t=4.769,P<0.001)。结论外周血中Tfh细胞与包虫病进展密切相关,有望成为反应泡球蚴感染的指标。
- 张耀刚李建华侯静孙莉田美媛江源黄登亮张涛张涛马艳艳
- 关键词：T淋巴细胞
- siRNA沉默EPAS1基因对低氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨应用siRNA技术沉默EPAS1(HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响。方法原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定。构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PASMCs,从3个干扰靶点中选取效果最好的靶点进行干扰;在常氧(37℃、5%CO_2、20%O_2)和低氧(37℃、5%CO_2、2%O_2)条件下分别培养24、48、72h,采用Western blotting检测PASMCs中EPAS1、VEGF蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况。结果成功分离培养原代大鼠PASMCs并经免疫荧光鉴定证实。将特异性的EPAS1 siRNA脂质体转染到PASMCs,选择干扰效果最好的靶点2进行干扰。与常氧条件比较,低氧条件下PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高;沉默EPAS1后,无论低氧还是常氧条件下,PASMCs中VEGF蛋白的表达及细胞增殖水平均明显降低。结论 EPAS1基因参与了低氧条件下大鼠PASMCs增殖的调控,其调节可能是通过VEGF介导完成的。
- 孙莉杨全余嘎琴靳国恩
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌细胞增殖
