罗瑞琼
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 吸烟对中老年男性心血管疾病患者代谢综合征的影响
- 罗瑞琼荣曦韦芳刘红
- 原代大鼠胰岛细胞分离纯化及单细胞培养初探
- 2016年
- 目的:探讨获得高质量、数量多的原代大鼠胰岛细胞的有效可靠的方法。方法:以Ⅴ型胶原酶顺行灌注大鼠胆总管消化胰腺,以Histopaque 1077等密度区带离心法分离胰岛和胰腺腺泡组织。以双硫腙染色及免疫组化法分别鉴定提取物,胰岛素释放试验鉴定胰岛的活性。结果:经Histopaque 1077等密度区带离心法分离纯化,每只大鼠平均获取(251±26)枚胰岛。双硫腙染色后完整胰岛呈猩红色细胞团。胰岛单细胞培养及胰岛素释放试验起始2.8 mmol/L低糖培养胰岛素分泌量为(23.53±5.946)pmol/L,16.7mmol/L高糖刺激后胰岛素分泌量为(32.61±4.085)pmol/L,最后恢复2.8mmol/L低糖培养胰岛素分泌量为(27.81±3.616)pmol/L,3者之间比较差异均有统计学意义(P<0.05),提示胰岛细胞活性良好。结论:用Histopaque 1077等密度区带离心法分离纯化原代大鼠胰岛细胞兼具有数量多、活性好、纯度高的优点,可继续用于研究。
- 罗瑞琼韦芳荣曦刘红
- 关键词:分离纯化胰岛细胞
- 激光拉曼光谱系统无损鉴别大鼠原代胰岛α、β细胞被引量:1
- 2016年
- 目的:利用激光拉曼光谱系统无损区分贴壁生长的大鼠原代胰岛α、β细胞,并比较该方法与传统方法的优劣。方法:收集贴壁生长于定位格子培养皿中大鼠胰岛细胞的拉曼光谱、坐标及照片后应用免疫组化结合培养皿坐标定位确定胰岛细胞的分类,用主成分分析结合线性判别分析(PCA-LDA)对两种胰岛细胞拉曼光谱进行分析,用线性判别分析法对两种细胞大小进行分析,两组间光谱及面积差异则采用两独立样本t检验。结果:贴壁生长的胰岛β细胞体积较α细胞大,差异具有统计学意义(P=0.001);然而单纯利用面积胰岛α细胞及胰岛β细胞正确区分率分别为84.5%、50.0%;胰岛α细胞与胰岛β细胞的拉曼光谱有共同特征峰同时也存在显著差异的波峰,即二者有不同的"细胞分子指纹",且将该特点结合PCA-LDA的方法对胰岛α、β细胞进行区分正确率均为100%。结论:激光拉曼光谱系统可以成为快速无损区分胰岛α、β细胞的有效方法。
- 韦芳岳惠芬罗瑞琼荣曦刘红
- 关键词:胰岛细胞拉曼光谱