谢兰兰
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
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- 银杏内酯B对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响被引量:1
- 2016年
- 目的观察银杏内酯B(GB)对H_2O_2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法将对数生长期的H9C2心肌细胞随机分为5组:对照组、H_2O_2(200μmol/L)干预组、GB(50、100和200μmol/L)+H_2O_2(200μmol/L)干预组,每组设10个复孔。经药物干预16 h后,采用MTT法检测细胞存活率;测定培养液中心肌酶(AST、CPK、LDH)活性;检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞中AKT mRNA、Bcl-2mRNA、Bax mRNA表达,计算Bcl-2/Bax表达比值,Western blot法检测细胞核因子-κB(NF-κB)蛋白表达并进行半定量分析,比色法检测细胞中Caspase-3、Caspase-9活性。结果与H_2O_2干预组比较,GB(100、200μmol/L)+H_2O_2(200μmol/L)干预组细胞存活率显著升高(P<0.01),培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01);GB干预组细胞凋亡状况明显好转,其中GB(100、200μmol/L)+H_2O_2(200μmol/L)干预组细胞凋亡率显著降低(P<0.01),AKT mRNA和bcl-2 mRNA表达显著上调(P<0.05或P<0.01),Bax mRNA表达显著下调(P<0.01),Bcl-2/Bax表达比值显著升高(P<0.01),细胞中NF-k B蛋白表达量和Caspase-3、Caspase-9活性显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论 GB对H_2O_2诱导损伤H9C2心肌细胞凋亡具有抑制作用;其作用机制可能与GB能够有效改善抗氧化酶活性、降低氧化应激损伤,下调NF-κB蛋白表达,上调抗凋亡基因AKT和bcl-2表达、下调促凋亡基因Bax表达,提高Bcl-2/Bax表达比值,降低Caspase-3、Caspase-9活性有关。
- 李亮彭辉孙立峰田延冰孟剑锋谢兰兰
- 关键词:银杏内酯BH9C2心肌细胞过氧化氢凋亡