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胶孢炭疽菌CgRGS2基因的克隆及生物学功能被引量：11: 2017年; 【目的】G蛋白信号调控因子(Regulators of G-protein signaling,RGS)是G蛋白的一类负调控因子,在植物病原菌生长发育及致病过程中发挥着重要的作用,然而目前还未有关于胶孢炭疽菌RGS蛋白生物学功能的研究。本试验的目的是克隆胶孢炭疽菌的一个RGS基因CgRGS2,并分析其生物学功能。【方法】利用PCR技术扩增CgRGS2的基因并进行生物信息学分析,利用同源重组的方法获得CgRGS2基因的敲除突变体,并在突变体的基础上获得互补株,通过表型分析确定该基因的生物学功能。【结果】通过PCR扩增获得了CgRGS2的基因,其编码一个574个氨基酸的蛋白,在N末端含有一个RGS功能域。该基因敲除突变体同野生型相比,表现为营养生长缓慢,气生菌丝浓密,分生孢子产量降低且孢子呈多端萌发,对氧化压力及SDS敏感,致病性减弱等。【结论】CgRGS2蛋白参与调控胶孢炭疽菌的营养生长,分生孢子产量及萌发,氧化应激反应及细胞壁完整性,对其致病性也具有一定的影响。; 吴曼莉李晓宇张楠徐爽柳志强; 关键词：胶孢炭疽菌基因敲除表型分析

大叶山楝拮抗内生真菌DYSJ3的鉴定及抑菌活性产物分析被引量：1: 2016年; 从大叶山楝体内分离得到1株内生真菌DYSJ3,发现其对香蕉炭疽病菌、橡胶炭疽病菌、香蕉枯萎病菌和芒果炭疽病菌具有较强的拮抗作用,皿内抑制率分别为61.9%、57.9%、55.3%和65.9%。通过形态学观察结合ITS序列分析,初步将菌株DYSJ3鉴定为杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。对菌株DYSJ3产生的抑菌活性物质进行了初步分析,发现菌株DYSJ3的抑菌活性物质集中于菌丝体中,其菌丝体乙酸乙酯浸提物对多种植物病原真菌具有较强的抑菌活性,且热稳定性较好,100μg/m L浸提物对香蕉炭疽病菌及苹果轮纹病菌具有明显抑制活性,抑制率分别为72.7%和62.0%。当浓度为1 000μg/m L时,浸提物对香蕉炭疽病菌、苹果轮纹病菌、黄瓜枯萎病菌、橡胶炭疽病菌、小麦赤霉病菌的抑制率均大于90%。; 吴亚腾吴曼莉柳志强李晓宇; 关键词：内生真菌抑菌活性

催吐萝芙木内生菌Bacillus subtilis LYM3的抑菌活性产物被引量：6: 2017年; 为了研究分离自催吐萝芙木的内生细菌Bacillus subtilis LYM3的抑菌谱及其产生的抑菌活性产物,利用对峙生长法测试了菌株LYM3对10种植物病原真菌的拮抗活性,利用Sephadex LH-20凝胶柱对其产生的抑菌活性产物进行了分离,并利用LCMS-IT-TOF进行了初步鉴定。结果显示:菌株LYM3对10种植物病原真菌均有较强的拮抗作用,抑制率均在60%以上,其中对香蕉炭疽病菌的抑菌活性最强,抑制率为83.5%;LYM3产生的抑菌物质主要为胞外产物,具有较好的热稳定性,在p H 6~12活性稳定;经分离发酵液获得3种抑菌活性组分A、B和C,经初步鉴定推测A属于伊枯草菌素,B和C属于表面活性素。可见,菌株LYM3具有广谱抗菌性,其产生的抑菌活性产物主要为脂肽类物质。; 柳志强李乔曼徐爽吴曼莉张楠李晓宇; 关键词：内生细菌枯草芽孢杆菌

一株德干链霉菌QY-3及其应用: 本发明公开了一株德干链霉菌QY‑3及其应用，所述德干链霉菌的拉丁名为Streptomyces deccanensis，菌株号为QY‑3，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.14467。本发明...; 李晓宇柳志强辜柳霜章程辉张楠张月凤吴曼莉; 文献传递

橡胶树胶孢炭疽菌G蛋白信号调控因子CgRGS1、CgRGS2和CgRGS7的克隆及生物学功能: 橡胶种植业在中国热区农业生产中具有举足轻重的地位,更作为海南经济的基础产业和优势产业,然而由胶孢炭疽菌引起的炭疽病是橡胶树的重大病害之一,对各时期的橡胶树叶片造成了不同程度的危害,严重降低橡胶的年产量。而导致该病害的主要...; 吴曼莉; 关键词：胶孢炭疽菌基因敲除表型分析; 文献传递

胶孢炭疽菌CgSho1基因的克隆与功能分析被引量：11: 2017年; HOG-MAPK(high osmolarity glycerol mitogen-activated protein kinase)信号途径是真菌MAPK途径中参与渗透压响应的一条重要通路,在植物病原菌生长发育及致病过程中发挥着重要的作用。Sho1(synthetic high osmolarity-sensitive protein1)是HOG-M APK信号途径上游的一个重要感受器,在不同真菌中常具有不同的功能。本研究从胶孢炭疽菌中克隆了Sho1的同源基因,命名为Cg Sho1,该基因编码一个291个氨基酸的蛋白,含有4个跨膜结构域和一个SH3功能域。利用同源重组的方法获得了该基因的敲除突变体,与野生型相比,敲除突变体表现为营养生长缓慢,菌丝稀疏且疏水性增强,产孢量下降,对氧化压力和渗透压更加敏感,致病力明显减弱。上述结果表明,Cg Sho1参与调控胶胞炭疽菌的营养生长、分生孢子产量、氧化应激反应、渗透压响应及致病性。; 张楠柳志强吴曼莉李晓宇; 关键词：胶胞炭疽菌 MAPK途径

一株德干链霉菌QY-3及其应用: 本发明公开了一株德干链霉菌QY‑3及其应用，所述德干链霉菌的拉丁名为Streptomyces deccanensis，菌株号为QY‑3，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.14467。本发明...; 李晓宇柳志强辜柳霜章程辉张楠张月凤吴曼莉

胶孢炭疽菌CgRGS4调控营养生长、渗透压响应、氧化应激反应和致病性被引量：4: 2017年; G蛋白信号调控因子(regulators of G-protein signaling,RGS)是G蛋白的一类负调控因子,在植物病原真菌生长发育及致病过程中起着重要的作用,然而目前还未有关于胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)RGS蛋白生物学功能的研究。试验利用PCR技术扩增了胶孢炭疽菌的CgRGS4基因,通过同源重组的方法获得CgRGS4基因的敲除突变体,通过表型分析初步确定了CgRGS4的生物学功能。结果表明,CgRGS4编码一个1 224个氨基酸的蛋白,包含RGS、PXA和PX功能域,该基因敲除突变体在营养相对贫瘠的条件下生长较野生型缓慢,对高渗透胁迫的耐受性增强,黑色素减少,对H_2O_2更加敏感,胞外漆酶及过氧化氢酶活性降低以及致病性减弱。由此可见,CgRGS4参与调控胶孢炭疽菌的营养生长、渗透压响应、氧化应激反应和致病性等多个过程。; 徐爽吴曼莉柯智健柳志强李晓宇; 关键词：胶孢炭疽菌基因敲除表型分析

CgRGS7调控胶孢炭疽菌分生孢子产量、附着胞形成及致病性被引量：5: 2017年; 【目的】G蛋白信号调控因子(regulators of G-protein signaling,RGS)是G蛋白信号转导通路中的负调控因子,参与多个G蛋白信号通路介导的细胞内过程,目前对于胶孢炭疽菌相关RGS蛋白的生物学功能研究较少。【方法】本研究通过同源重组获得CgRGS7基因的敲除突变体,并对其生物学功能进行初步分析。【结果】CgRGS7基因编码620个氨基酸,具有7个跨膜结构域和1个RGS功能域。CgRGS7敲除突变体与野生型菌株相比,表现为分生孢子产量降低且孢子呈多端萌发,附着胞形成率下降以及致病性减弱。【结论】CgRGS7参与调控胶孢炭疽菌分生孢子产量,同时影响芽管的形态发育、附着胞形成及致病性。; 吴曼莉胡坚张楠柯智健柳志强李晓宇; 关键词：胶孢炭疽菌分生孢子

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吴曼莉