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周晶: 作品数：12 被引量：17H指数：3; 供职机构：南华大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省医药卫生科研计划课题更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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胃癌相关miRNA的鉴定及miR-7在胃癌组织中的表达: 目的本研究通过鉴定与人胃癌密切相关的miRNA，探讨胃癌可能的发病机制，并初步筛选出不同分化程度胃癌细胞株miRNA差异表达谱，为进一步研究胃癌发生、发展的机制以及发现胃癌诊断和治疗相关的分子标志物奠定基础。方...; 周晶; 关键词：微小RNA 胃癌 MIRNA芯片实时荧光定量PCR; 文献传递网络资源链接

EGFR基因G719S和T790M突变与宫颈癌的相关性研究被引量：8: 2019年; 目的探讨高保真聚合酶介导的分子开关突变检测技术对于筛查宫颈癌患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因G719S、T790M突变的价值,并分析上述突变与宫颈癌的相关性,以指导小分子酪氨酸激酶抑制剂类药物(tyrosine kinase inhibitor,TKI)的合理使用。方法设计两个位点的野生型与突变型序列的特异性引物,并硫化修饰引物的3′末端。以实验室构建的重组质粒为对照模板,进行高保真酶介导的PCR反应。将上述方法应用于临床样本的突变检测,并辅以测序验证。结果在80例宫颈癌组织以及31例癌旁组织的DNA样本中均未检测出EGFR基因的G719S、T790M突变,与DNA测序的结果一致。病例组的基因型分布频率与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立了检测EGFR基因G719S、T790M突变的分子开关技术平台。EGFR基因的G719S、T790M突变可能与宫颈癌无关。; 向花花周晶彭华董巍檑龚咏晴张宏全郭紫芬; 关键词：宫颈癌 EGFR基因靶向药物

ATM基因rs175048位点单核苷酸多态性与湖南衡阳地区汉族人群肺癌易感性的相关性: 2019年; 目的:探讨肺癌易感性与毛细血管扩张性共济失调突变基因(ATM) rs175048 位点单核苷酸多态性(SNP)之间的相关性。方法:选取2015 年10 月至2016 年8 月在南华大学附属第一医院及衡阳市中医院就诊的汉族肺癌患者血液样本225 例(病例组),同时收集在院体检的健康人血液样本128 例作为对照组。采用高保真聚合酶介导的单核苷酸多态性敏感性分子开关结合PCR技术检测肺癌患者与健康体检者ATM基因rs175048A/T多态位点的多态性,统计其基因型及等位基因频率,比较其在病例组与对照组的分布差异,并且分析其与肺癌临床病理特征的相关性。结果:ATM基因rs175048 多态位点的AA、AT、TT 3 种基因型的频率在病例组分别为24.9%、52.9%、22.2%,对照组为42.2%、42.2%、15.6%(均P<0.01);病例组等位基因A、T 的频率为51.0%、49.0%,对照组为63.0%、37.0%(均P<0.01);TT基因型可能会增加、而AT基因型可能减少肺癌发病风险。rs175048 单核苷酸多态位点与吸烟、年龄、性别和家族史等临床病理特征明显相关(均P<0.05)。结论:ATM基因rs175048 位点单核苷酸多态性与肺癌的发生明显相关,且TT基因型可以增加肺癌发病的风险。; 肖正午向花花周琛张宏全周晶彭华郭紫芬; 关键词：单核苷酸多态性位点汉族人群肺癌易感性

ATM基因rs227060位点单核苷酸多态性与肺癌易感性的相关性被引量：5: 2017年; 目的:探讨共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia telangiectasia mutated,ATM)rs227060位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与肺癌易感性之间的相关性。方法:采用聚合酶链反应–SNP敏感性分子开关方法,检测225例肺癌患者和128例健康体检者ATM基因rs227060多态位点等位基因以及基因型频率分布特点;并应用非条件Logistic回归法统计分析rs227060单核苷酸多态性与肺癌的相关性。结果:rs227060多态位点共检测出CC,CT,TT三种基因型和C,T两种等位基因,其在肺癌组与对照组的基因型分布频率为:CC基因型17.3%与29.7%、CT基因型61.4%与59.3%、TT基因型21.3%与11%,两组间基因型频率和等位基因频率分布差异均有统计学意义(P<0.05)。在对ATM rs227060基因型的多态性分析过程中发现:吸烟史在肺癌组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而年龄、性别、肿瘤家族史在肺癌组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);且以CC基因型作为对照,携带TT基因型的个体患肺癌的风险是携带CT基因型个体的3.49倍(OR=1.829;95%CI:1.045~3.199)。结论:ATM基因rs227060位点单核苷酸多态性与肺癌易感性存在相关性,且携带TT基因型可增加肺癌的发病风险。; 彭华董巍檑龚咏晴周晶郭紫芬; 关键词：肺癌易感性单核苷酸多态性 ATM基因

重叠PCR法构建宫颈癌相关的EGFR基因G719S和T790M融合重组载体被引量：3: 2018年; 目的构建包含与宫颈癌相关的EGFR基因G719S和T790M位点重组p MD19-exon18-exon20载体,为制备突变型EGFR基因重组载体提供模板。方法以健康人全血基因组DNA作为模板,设计2对有重叠互补区的特异性引物,对EGFR基因的exon18和exon20两片段分别进行扩增,用重叠PCR技术将exon18和exon20片段进行连接,再将连接产物exon18-exon20片段插入p MD19-T质粒,构建成野生型p MD19-exon18-exon20载体,转入至大肠埃希菌感受态细胞DH5α中进行表达,利用菌液PCR和基因组测序进行鉴定。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示,exon18和exon20两位点扩增片段在778 bp和596 bp处有清晰的目的条带,两片段的融合产物exon18-exon20片段可在1 374 bp处见一清晰目的条带;经菌液PCR和基因组测序结果鉴定,EGFR基因融合重组质粒均与预期结果一致。结论利用重叠PCR法将exon18和exon20片段进行融合,且成功构建了EGFR基因重组表达载体。; 董巍檑向花花彭华龚咏晴周晶张宏全郭紫芬; 关键词：EGFR基因宫颈癌重叠PCR

孕激素受体基因多态性与子宫内膜癌的相关性研究: 目的：　　建立筛查孕激素受体基因+331G/A与G1978T多态性的技术平台用于子宫内膜癌患者的基因分型，研究孕激素受体基因启动子+331G/A多态性对PRA、PRB的mRNA与蛋白表达的影响，探索+331G/A多态性与...; 周晶; 关键词：子宫内膜癌孕激素受体基因多态性蛋白表达病理机制

十二指肠乳头针形刀开窗术和辅助法在困难性ERCP中的应用: 2011年; 目的探讨困难性内镜下逆行性胰胆管造影(ERCP)的操作技巧。方法 2005年1月～2010年3月,本院共行ERCP 556例,分别采用下列方法进行插管:(1)采用双腔乳头切开刀常规插管;(2)捻导丝辅助法;(3)预备性切开后插管;(4)十二指肠乳头针形刀开窗术。结果 556例采用双腔乳头切开刀常规插管,成功467例,成功率84.0%;未成功89例采用捻导丝辅助法,成功33例,总成功率89.9%;余下56例采用预备性切开后插管36例,成功31例,总成功率95.5%;余25例未成功者采用十二指肠乳头针形刀开窗术14例,成功13例,总成功率97.8%。共12例未成功者,其中1例因担心大出血和十二指肠穿孔停止开窗术,采用外科手术治疗,余下11例因无预备性切开及开窗术指征,ERCP失败。与常规插管方法比较,十二指肠乳头针形刀开窗术和辅助法插管总成功率明显升高(P<0.05)。术后无穿孔及死亡病例,高淀粉酶血症、PEP等并发症在ERCP术后总的发生率与插管成功者比较,差异无显著性(P>0.05)。结论在困难性胆管插管的ERCP病例中,应用十二指肠乳头针形刀开窗术和辅助法可以有效提高ERCP诊治的成功率,而并不增加并发症的发生率和死亡率。; 谢娟李国庆陈宏辉钟大志雷国英周晶; 关键词：内镜逆行胰胆管造影术开窗术成功率并发症

重叠PCR法构建PTEN基因3位点的融合重组载体被引量：1: 2016年; 目的构建包含与子宫内膜癌相关的PTEN基因3位点的重组p MD19-exon 5-exon 8载体。方法以健康人全基因组DNA为模板,设计2对有重叠区的特异性引物分别扩增PTEN基因的exon 5和exon 8片段,利用重叠PCR技术,将exon 5和exon 8片段进行连接,再将连接产物exon 5-exon 8片段插入p MD19-T质粒,构建成重组p MD19-exon 5-exon 8载体,转化入大肠埃希菌感受态细胞DH5α进行表达,利用菌液PCR和基因组测序进行鉴定。结果 exon 5-exon 8片段经凝胶电泳检测,可在1 253 bp处见一清晰的目的条带,PTEN基因融合重组质粒经菌液PCR及测序结果鉴定,均与预期结果一致。结论应用重叠PCR法将exon 5和exon 8片段进行融合,并成功构建了PTEN基因融合重组表达载体。; 龚咏晴彭华周晶张宏全郭紫芬; 关键词：PTEN基因重叠PCR 子宫内膜癌

突变敏感性分子开关检测线粒体DNA A1555G位点的条件优化被引量：2: 2016年; 目的对高保真酶介导的突变敏感性分子开关技术检测线粒体DNA（mt DNA）A1555G位点条件进行优化。方法利用3＇硫代磷酸化修饰的突变型引物和野生型引物作为下游引物,在其上游设计一条公共引物分别构成突变引物对和野生引物对,以构建好的包含mt DNA A1555G位点的突变型质粒和野生型质粒为模板,进行高保真聚合酶介导的双向引物延伸反应,对PCR体系中的退火温度、引物浓度、模板浓度等条件优化,通过凝胶成像系统对其PCR结果进行分析确定最佳反应条件。结果分子开关技术检测mt DNA A1555G位点的最佳PCR条件：退火温度为61.0℃,引物浓度为0.6μmol/L,检测模板浓度为103~106copies/μL。结论确定了分子开关技术检测mt DNA A1555G位点的最佳反应条件,为该技术在线粒体DNA的突变筛查中的应用提供依据。; 龚咏晴董巍檑陈方方彭华周晶郭紫芬; 关键词：线粒体DNA

EGFR基因G719S和T790M突变载体的构建及临床应用研究被引量：1: 2018年; 目的构建与宫颈癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因G719S和T790M位点突变型重组载体,利用其建立分子开关平台检测宫颈癌EGFR基因突变。方法以野生型重组质粒为模板,利用重叠PCR技术,得到突变型融合目的 DNA片段,再将此目的片段连接入p MD19-T质粒中,构建成突变型重组载体,将其转化入大肠埃希菌E.coli DH5α感受态细胞进行表达,用菌液PCR和基因组测序进行鉴定。设计特异性检测引物,建立分子开关检测平台用于临床宫颈癌样本的检测。结果通过基因组测序证实G719S和T790M突变位点成功引入,定点突变载体构建成功。成功建立了分子开关检测平台用于宫颈癌组织DNA的检测。结论利用重叠PCR技术简便、高效地构建了EGFR基因突变重组载体,并建立了分子开关检测平台,为基因定点突变及临床上检测EGFR基因突变提供了新的技术手段。; 周晶向花花肖正午彭华张宏全郭紫芬; 关键词：宫颈癌表皮生长因子受体基因定点突变重叠PCR

周晶

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