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田新利
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
北京军区总医院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王慧芳
大同市第五人民医院
田新瑞
山西医科大学第二医院
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郑国平
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作者
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郑国平
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常琴
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田新瑞
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田新利
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王慧芳
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2016
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β-连环素通路对转化生长因子β1致肺纤维化的调控作
被引量:5
2016年
目的探讨β-连环素通路对转化生长因子β1(TGF-β1)致肺纤维化的调控作用。方法体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN细胞)分为四组:A1.对照组;B1.加5 μg/L TGF-β1的TGF-β1组;C1.转染真核表达载体pcDNA3.0(pcDNA)后加5 μg/L TGF-β1的pcDNA+TGF-β1组;D1.转染β-连环素敲除载体[F-(β-TrCP)-Ecad]后加5 μg/L TGF-β1的F-(β-TrCP)-Ecad+TGF-β1组。24 h后,显微镜下观察各组细胞形态,Western印迹法检测各组细胞上皮钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(Fn)表达;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞培养上清液中促纤维化转录产物Snail mRNA的表达。体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞(CRL-2192细胞)分为五组:A2.对照组;B2.加20 μg/L干扰素γ的干扰素γ组;C2.加10 μg/L TGF-β1和20 μg/L干扰素γ的TGF-β1+干扰素γ组;D2.转染F-(β-TrCP)-Ecad后加入C2组相同试剂的F-(β-TrCP)-Ecad+TGF-β1+干扰素γ组;E2.转染野生型β-连环素表达载体(WTβ-连环素)后加入C2组相同试剂的WTβ-连环素+TGF-β1+干扰素γ组。24 h后,Western印迹法检测A2、B2、C2组中β-连环素蛋白的表达;RT-PCR检测各组细胞培养上清液诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达。结果B1、C1组RLE-6TN细胞形态变为梭形,D1组细胞形态基本呈铺路石样;B1、C1组RLE-6TN细胞纤维细胞特征蛋白α-SMA、Fn蛋白及下游促纤维化转录产物Snail mRNA表达均显著高于A1组,而上皮细胞特征蛋白上皮钙黏素蛋白表达显著低于A1组;D1组细胞α-SMA、Fn蛋白、Snail mRNA表达均显著低于C1组(0.352±0.076比0.937±0.303、0.319±0.072比0.903±0.211、3.675±0.642比9.708±2.031),而上皮钙黏素蛋白表达显著高于C1组(1.482±0.227比0.604±0.121)(均P〈0.05)。CRL-2192细胞中,β-连�
田新瑞
田新利
王慧芳
常琴
霍如婕
殷得莉
郑国平
关键词:
肺纤维化
Β连环素
转化生长因子Β1
巨噬细胞
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