黄小龙
- 作品数：14 被引量：59H指数：5
- 供职机构：浙江中医药大学更多>>
- 发文基金：浙江省中医药科技计划项目浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 羟基磷灰石复合二氧化锆泡沫陶瓷的理化性能与细胞化性能被引量：2
- 2019年
- 背景:研究已证实羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料具有良好的促骨再生能力,但关于其遗传毒性还未见报道。目的:检测羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料的孔隙率与抗压强度,以及遗传毒性与细胞毒性,探索人工诱导多能干细胞来源间充质干细胞在羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料上的成骨分化能力。方法:在添加造孔剂的情况下,采用高温烧结法制备羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料,检测其孔隙率与抗压强度。采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变实验检测羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料的遗传毒性。分别采用羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料浸提液(实验组)、苯酚溶液(阳性对照组)、生理盐水(阴性对照组)培养L929细胞,24h后,采用CCK-8法检测细胞毒性。将人工诱导多能干细胞来源间充质干细胞接种于羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料上,培养第3,7,10,14天,检测细胞碱性磷酸酶分泌量;培养第14天,免疫组织化学法检测复合体细胞Ⅰ型胶原表达,扫描电镜观察细胞黏附情况。结果与结论:①羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料的孔隙率为(76.72±0.75)%,抗压强度为(11.60±1.35) MPa;②鼠伤寒沙门氏菌回复突变实验显示,羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料的代谢产物无致突变、无致癌作用;③CCK-8实验显示,实验组的细胞存活率与阴性对照组比较差异无显著性意义(P> 0.05),但明显高于阳性对照组(P <0.05);④随着培养时间的延长,细胞碱性磷酸酶分泌量逐渐增加,各时间点间两两比较差异均有显著性意义(P <0.05);⑤培养第14天,大量人工诱导多能干细胞来源间充质干细胞均匀分布于羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料表面,细胞形态及生长良好,并且Ⅰ型胶原表达较多;⑥结果表明,羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷材料具备一定的抗压能力,无致突变作用和细胞毒性,可促进人工诱�
- 柴乐全仁夫吕建兰黄小龙张灿任伟凡钱建胜
- 关键词：羟基磷灰石二氧化锆遗传毒性细胞毒性细胞毒性检测
- 电针秩边穴和水道穴对急性脊髓不完全损伤大鼠脑皮质代谢物的影响被引量：7
- 2016年
- 目的：观察电针秩边穴和水道穴对急性脊髓不完全损伤大鼠脑皮质代谢物的影响。方法：将36只雄性 SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组，每组12只。采用改良 Allens 法将模型组和电针组大鼠制成 T10急性脊髓不完全损伤模型，假手术组大鼠手术摘除 T10椎板暴露硬脊膜后立即缝合。造模结束后，假手术组和模型组大鼠仅进行抓取和固定；电针组大鼠予以电针秩边穴和水道穴，每天1次，连续治疗1周。电针干预结束后断头处死所有大鼠，采集大鼠脑皮质和 T9～T10椎体对应节段脊髓1 cm。将取得的脊髓组织制成切片，HE 染色后光镜下观察脊髓组织形态；对取得的脑皮质进行磁共振波谱分析，比较3组大鼠脑皮质代谢物的浓度。结果：至处死前各组均无大鼠死亡。假手术组大鼠脊髓结构完整，神经细胞形态正常、分布均匀，细胞膜、细胞核及组织间隙均正常；模型组大鼠脊髓形态不完整，损伤区域有神经组织残缺，存在较多出血，组织疏松水肿，部分细胞核固缩，神经细胞数量明显减少，细胞周围基质消失呈空泡状；电针组大鼠脊髓形态结构基本完整，组织中散在血细胞，组织水肿较轻，神经细胞形态基本正常，空泡变性较轻。3组大鼠脑皮质中异亮氨酸、谷氨酸、N －乙酰天门冬氨酸、甘油磷脂胆碱、肌醇、维生素 C、乳酸、苏氨酸、肌苷浓度比较，组间差异均有统计学意义（1．63±0．20，1．13±0．12，1．35±0．01，F ＝43．195，P ＝0．000；9．51±0．40，8．66±0．74，9．94±1．25，F ＝6．728，P ＝0．004；2．54±0．22，2．21±0．19，2．38±0．45，F ＝3．332，P ＝0．048；9．47±1．26，8．10±1．34，9．38±0．88，F ＝5．070，P ＝0．012；3．66±1．10，3．17±0．89，4．55±1．81，F ＝3．365，P ＝0．047；2．45±0．33，2．15±0．21，2．34±0．17，F ＝4．388，P �
- 全仁夫胡华辉黄小龙刘飞杨宗保许晶晶
- 关键词：电针代谢组学
- 电针夹脊穴治疗脊髓损伤机制的实验研究进展被引量：18
- 2016年
- 通过对近年来电针夹脊穴治疗脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)相关实验研究文献进行整理和分析,从改善神经修复的微环境、抑制细胞凋亡和促进神经修复三方面论述电针夹脊穴治疗SCI的机制,并尝试探讨其未来可能的发展方向。
- 胡华辉黄小龙刘飞全仁夫
- 关键词：电针脊髓损伤
- BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统复合羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷与诱导多能干细胞来源MSCs的体外研究被引量：4
- 2019年
- 目的构建BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统,与诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)来源MSCs复合种植至羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)/二氧化锆(zirconium dioxide,ZrO2)生物多孔泡沫陶瓷材料,体外共培养,探索缓释系统对iPS-MSCs成骨分化的作用。方法运用油包水相溶液制备BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶微球,检测微球的药物包封率、载药率和体外缓释速率。建立HA/ZrO2多孔生物泡沫陶瓷材料复合iPS-MSCs及BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统共培养体系,作为实验组;以未复合BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统的细胞-支架复合物作为对照组。两组培养3、7、10、14 d,检测细胞的ALP分泌量,RT-PCR检测核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfa1)、Ⅰ型胶原和锌指结构转录因子(Osterix,OSX)基因表达水平;培养14 d时行免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原表达,并通过扫描电镜观察细胞爬行及黏附状态。结果 BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统具有较好的药物包封率及载药率,可延长BMP-2的活性时间。共培养体系体外培养各时间点实验组ALP分泌量及Cbfa1、Ⅰ型胶原、OSX基因相对表达量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色观察示,实验组荧光数量明显多于对照组,即Ⅰ型胶原表达水平高于对照组;细胞能较均匀地分布于材料上,细胞形态良好。扫描电镜观察示缓释系统能较好地黏附于细胞之间。结论 iPS-MSCs具有促成骨分化能力,在BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统作用下其促成骨能力显著增强。iPS-MSCs与缓释系统结合后能良好黏附于材料上,且细胞活性较好。
- 柴乐全仁夫胡劲涛黄小龙吕建兰张灿邱锐蔡兵兵
- 关键词：二氧化锆诱导多能干细胞MSCS缓释系统
- 标本兼治法治疗肩周炎60例被引量：4
- 2016年
- 目的观察水针疗法联合中药内服外敷治疗肩周炎的临床疗效。方法选取60例符合诊断标准的肩周炎病人,给予水针疗法联合中药内服外敷,7天一次,为一个疗程,治疗三个疗程后进行功能评分。结果治疗有效共51例,治疗总有效率为85%。结论水针疗法联合中药内服外敷治疗肩周炎疗效显著,值得进一步推广。
- 胡华辉潘宁芳黄小龙刘飞
- 关键词：水针中药内服外敷标本兼治
- HLA-B2704基因型强直性脊柱炎患者来源的人诱导多能干细胞体系的建立被引量：1
- 2017年
- 目的:建立人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-B2704基因型强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者来源的人诱导多能干细胞(human-induced pluripotent stem cells,hiPSCs)体系。方法:采用逆转录病毒介导的感染系统把OCT4、SOX2、c-MYC、KLF4这4个外源转录因子导入HLA-B2704基因型AS患者的尿液细胞中,重编程获得hiPSCs。通过形态观察、碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色、内源多能性相关基因检测、体外拟胚体(embryoid bodies,EBs)分化检测、EBs三胚层基因检测以及畸胎瘤形成实验,鉴定获得的hiPSCs。结果:病毒感染尿液细胞后第4天至第5天细胞核质比增大,第14天左右出现克隆,第24天后形成与人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,h ESCs)相似的克隆。碱性磷酸酶染色显示,hiPSCs和h ESCs-H1一样,均被染成紫红色,呈阳性。免疫荧光染色显示,h ESCs阶段特异性胚胎抗原4及ESCs转录因子OCT4、SOX2均呈阳性。hiPSCs内源多能性基因OCT4、SOX2、NANOG和REX1的表达与H1内源多能性相关基因的表达比较,差异均无统计学意义(1.006±0.208,1.000±0.340,t=0.038,P=0.972;1.061±0.140,1.000±0.387,t=0.431,P=0.689;1.386±0.354,1.000±0.032,t=1.467,P=0.303;1.280±0.283,1.000±0.013,t=1.398,P=0.235)。EBs高表达内胚层基因AFP、GATA4,中胚层基因MEX1、TBX1,外胚层基因PAX6、SOX1;EBs三胚层基因AFP、GATA4、TBX1、MSX1、PAX6、SOX1的相对表达量均高于hiPSCs(60.695±8.746,1.000±0.245,t=9.647,P=0.011;3.724±0.144,1.000±0.417,t=12.136,P=0.007;4.224±0.869,1.000±0.130,t=4.988,P=0.038;684.800±63.326,1.000±0.211,t=15.270,P=0.004;131.561±15.785,1.000±0.232,t=11.700,P=0.007;98.507±40.443,1.000±0.215,t=16.000,P=0.004)。hiPSC体内形成畸胎瘤,HE染色可见内、中、外3个胚层的组织细胞;其中内胚层为小肠上皮组织细胞,中胚层为肌肉组织细胞,外胚层为神经上皮组织细胞。结论:采用逆转录病毒介导的感染系统把OCT4、SOX2、c-MYC、KLF4这4个�
- 黄小龙全仁夫胡华辉李伟李强邱锐孙亚萍杨迪生
- 关键词：HLA抗原诱导多能干细胞
- 梯度复合羟基磷灰石/二氧化锆组织工程骨:应用现状及进展
- 2016年
- 背景:羟基磷灰石/二氧化锆组织工程骨可黏附成骨细胞、骨髓间充质干细胞及软骨细胞等多种细胞,诱导、促进骨折愈合或替代缺损骨质。目的:综述羟基磷灰石/二氧化锆组织工程骨的发展历史及应用。方法:应用计算机以"泡沫陶瓷、骨组织工程、骨形态发生蛋白、诱导性多能干细胞或porous bioceramic,bone tissue engineering,bone morphogenetic protein-2,induced pluripotent stem cells"为检索词,检索CNKI和Pub Med数据库1971年1月至2014年12月发表的关于羟基磷灰石/二氧化锆组织工程骨应用的文章,最终选择54篇文章进行综述。结果与结论:多孔羟基磷灰石/二氧化锆组织工程骨可引导新生骨组织长入三维孔隙内部,达到组织工程骨材料与自体骨组织的完美整合;用二氧化锆作为羟基磷灰石的增强体,通过调节材料的比例和孔隙率得到与人体骨弹性模量和断裂韧性均相似、结构相仿的高仿真人工骨材料;新型羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷组织工程骨负载成骨诱导因子骨形态发生蛋白2壳聚糖凝胶缓释系统和i PSCs来源的骨髓间充质干细胞,可望明显提高其成骨性能和骨融合率。
- 邵荣学黄小龙胡华辉全仁夫谢尚举李希
- 关键词：硬羟基磷灰石生物材料泡沫陶瓷诱导性多能干细胞
- iPS-MSCs复合HA/ZrO2多孔泡沫陶瓷材料构建组织工程骨研究
- 目的:1、逆转录病毒法构建人诱导多能干细胞（hiPSCs）体系;2、hiPSCs定向分化为间充质干细胞（iPS-MSCs）,并进行生物学鉴定;3、添加造孔剂高温烧结法制备二氧化锆和羟基磷灰石（HA/ZrO2）梯度复合多孔...
- 黄小龙
- 关键词：诱导多能干细胞成骨分化骨组织工程种子细胞
- 羟基磷灰石构建组织工程骨支架的研究进展被引量：6
- 2018年
- 组织工程骨支架作为组织工程骨研究的关键点之一,是目前骨科及创伤外科研究的热点。羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)是骨组织的主要无机成分,具有良好的生物相容性和骨诱导性。单纯的HA存在机械强度和韧性差等问题,不能满足人体承重部分骨代替的要求,因此人们开始转向HA复合材料支架的研究。目前已研制出了HA复合金属镁、HA复合胶原蛋白、HA复合丝素蛋白、HA复合乳酸、HA复合二氧化锆、HA复合聚己内酯等多种具有良好生物特性的HA复合材料组织工程骨支架,同时已开始应用3D打印技术制作更加复杂、具有更优异生物特性的HA组织工程骨支架。虽然HA复合材料组织工程骨支架在实验研究中已获得了成功,但要将其应用于临床还有很长的路要走。
- 柴乐全仁夫黄小龙
- 关键词：羟基磷灰石类组织工程骨骨缺损
- 不同部位电针刺激对脊髓损伤性膀胱功能障碍影响的研究进展被引量：12
- 2017年
- 对不同部位电针在脊髓损伤后神经源性膀胱功能障碍影响作用的研究进行归纳总结。根据国内近10年来干预部位的不同,分为阳脉选穴、阴脉选穴、阴阳脉选穴、全息选穴4部分进行分述,发现电针对该疾病的影响作用显著,并对深入研究机制提出展望。
- 杜伟斌陈荣良俆亦生黄小龙鲍关爱全仁夫
- 关键词：电针脊髓损伤膀胱功能障碍
