范红丽
- 作品数：4 被引量：9H指数：3
- 供职机构：宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 发状念珠藻醛酮还原酶基因NfAKR的克隆与表达被引量：1
- 2016年
- 以发状念珠藻细胞为试材,采用PCR技术克隆了醛酮还原酶基因的开放阅读框(ORF)序列,命名为NfAKR。对基因序列特征进行了生物信息学分析,根据其编码氨基酸序列预测了NfAKR蛋白的三维结构,同时探讨了PEG-6000胁迫下NfAKR的表达特性。结果表明:NfAKR基因的编码序列长912bp,编码304个氨基酸,预测其编码蛋白的相对分子量为33.51kD,理论等电点为4.94,具有醛酮还原酶超家族保守结构域。NfAKR蛋白主要由10个α-螺旋和11β-折叠组成,中间形成一个疏水穴,作为酶的催化活性中心。NfAKR与点形念珠藻处在同一进化枝上,具有较近的亲缘关系。qRT-PCR分析显示,PEG-6000胁迫下NfAKR基因上调表达,当PEG-6000浓度为8%时,其相对表达量为5.66并达到峰值。依据NfAKR基因响应干旱胁迫上调表达的特性,推测醛酮还原酶可能参与发状念珠藻抵御干旱胁迫过程。
- 岳思君李治学范红丽周娟梁文裕郑蕊
- 关键词：发状念珠藻醛酮还原酶基因克隆干旱胁迫
- 发状念珠藻过氧化物还原酶NfPrx基因的克隆与表达分析被引量：4
- 2016年
- 过氧化物还原酶(peroxiredoxin,Prx)属抗氧化蛋白超家族,为了探究Prx在发状念珠藻抗逆过程中所具有的生物学功能,从发状念珠藻细胞中克隆了NfPrx基因的完整开放阅读框(ORF),并对基因序列特征进行了生物信息学分析,根据氨基酸序列预测了该蛋白的三维结构,在此基础上构建了基因的融合表达载体并诱导其表达,同时探讨了PEG-6000胁迫下NfPrx的表达特性。结果表明,NfPrx包含612 bp的ORF,编码203个氨基酸,NfPrx具有PRX_Typ2cys结构域,属于硫氧还蛋白超基因家族,与点形念珠藻、丝状蓝藻7507、微毛藻7126、池生念珠藻CENA21等物种的Prx氨基酸序列一致性高达94%以上。NfPrx与点形念珠藻处在同一进化枝上,具有较近的亲缘关系。利用所构建的原核表达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳,证实诱导表达的NfPrx蛋白与预期结果大小一致。qRT-PCR分析结果显示,NfPrx的表达随干旱胁迫程度的增加先增后降,PEG-6000浓度为8%时,表达量达到峰值,根据表达特性,推测过氧化物还原酶可能参与响应发状念珠藻逆境胁迫过程。
- 岳思君周娟郑蕊范红丽苏建宇
- 关键词：发状念珠藻基因克隆
- 发状念珠藻干旱胁迫响应基因NfGR的克隆与鉴定被引量：3
- 2016年
- 该研究采用PCR技术,从发状念珠藻细胞中克隆了谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)基因,命名为NfGR,其开放阅读框长1 374bp,编码458个氨基酸,蛋白相对分子量为49.42kD,理论等电点为5.49。氨基酸序列分析表明,NfGR蛋白具有NADPH结合位点超家族(NADB-Rossmann superfamily)和吡啶氧化还原酶二聚体超家族(Pyr_redox_dim superfamily)2个结构域,与点形念珠藻(Nostoc punctiforme)的相似性达93%。系统进化树分析表明,NfGR与点形念珠藻处在同一进化枝上,亲缘关系较近。qRT-PCR表达分析表明,在不同浓度PEG-6000处理下,NfGR基因均保持上调表达,其中,PEG-6000浓度为8%时,NfGR基因的相对表达量达到峰值(32.69)。研究推测,谷胱甘肽还原酶可能参与了发状念珠藻对干旱胁迫过程的响应。
- 岳思君范红丽郑蕊周娟苏建宇
- 关键词：发状念珠藻谷胱甘肽还原酶基因克隆荧光定量PCR
- 模拟干旱胁迫对发状念珠藻抗氧化酶系统和渗透调节物质的影响被引量：3
- 2016年
- 【目的】探讨模拟干旱胁迫对发状念珠藻抗氧化酶系统和渗透调节物质的影响。【方法】以发状念珠藻细胞为实验材料,用2%、4%、6%、8%、10%浓度的PEG-6000模拟干旱胁迫,测定发状念珠藻氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性及胞外多糖(EPS)和脯氨酸(Pro)含量的变化。【结果】与对照处理相比,随着干旱胁迫程度的增加,发状念珠藻细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性均呈现先上升后下降的趋势,细胞胞外多糖(EPS)和脯氨酸(Pro)含量呈增加趋势,但在高浓度的胁迫下,脯氨酸的含量呈现下降趋势。【结论】发状念珠藻在中度干旱胁迫下能够激活自身的抗氧化酶类以提高藻细胞的抗氧化能力,从而能消除或减轻活性氧毒害,而在重度干旱胁迫下,酶活降低,标志活性氧清除机制受到破坏,抗氧化能力降低。在干旱胁迫下,作为渗透调节物质的胞外多糖和脯氨酸表现出缓解干旱胁迫的效果,累积的脯氨酸和胞外多糖能够维持细胞内渗透平衡,保证细胞内正常的物质代谢,从而提高发状念珠藻对干旱胁迫的适应性。
- 周娟范红丽白丽甜郑蕊岳思君
- 关键词：发状念珠藻干旱胁迫抗氧化酶系统渗透调节物质
