韩杨
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 产耐高温木聚糖酶菌株的筛选及其产酶条件优化被引量：4
- 2013年
- 从牛粪堆肥中分离、筛选到1株产耐高温木聚糖酶的细菌NF1,经形态特征和16S rDNA序列分析,鉴定菌株NF1为类芽孢杆菌,命名为类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)NF1。采用响应面法对该菌种产木聚糖酶的发酵条件进行优化。首先利用Plackett Burman试验设计筛选出影响产酶量的3个主要因素,即牛肉膏浓度、NaCl浓度和初始pH值。在此基础上使用Design-Expert软件进行Box-Behnken试验设计,通过响应面分析得出菌株NF1发酵产酶的最佳条件为玉米芯20g/L、牛肉膏28.2g/L、K2HPO45g/L、MgSO40.5g/L、NaCl 7.1g/L、初始pH值为6.9;装液量40mL、转速160r/min、接种量2%、温度28℃。经过验证试验,优化后粗酶液酶活达到160.6IU/mL,与响应面预测结果一致,较优化前木聚糖酶酶活提高了51.4倍。
- 孙明哲郑宏臣孙君社裴海生刘逸寒张璟韩杨路福平
- 关键词：菌种筛选类芽孢杆菌发酵优化
- 毕赤酵母表达蒜酶及其体外抗氧化功能研究
- 2016年
- 从大蒜鳞茎中克隆蒜酶基因,构建蒜酶真核表达载体,并在毕赤酵母系统中诱导表达,探讨重组蒜酶的活性及其催化蒜氨酸分解产生蒜素的抗氧化活性。利用RT-PCR方法克隆大蒜鳞茎蒜酶基因,通过p PIC9K载体构建p PIC9K-alliinase真核表达质粒,电转化法导入毕赤酵母GS115,筛选阳性克隆,经甲醇诱导后取发酵上清液进行SDSPAGE分析。利用丙酮酸法检测重组蒜酶的活性。并采用DPPH·法,分别研究有氧及无氧条件下蒜酶催化蒜氨酸分解产生蒜素的抗氧化活性。从大蒜中克隆出蒜酶基因,重组酶存在于毕赤酵母表达上清液中,形成糖蛋白,酶的比活力为(115.81±1.93)U/mg;无氧条件下蒜酶催化蒜氨酸分解产生蒜素的抗氧化能力高于有氧条件。克隆了蒜酶编码基因,并成功实现在毕赤酵母中的有效表达。无氧条件下蒜酶催化蒜氨酸分解产生蒜素抗氧化能力比有氧条件下高,为体内利用蒜酶和蒜氨酸制备高抗氧化能力的制剂提供基础。
- 韩杨孙同韦刘会杰郭伟王洪彬刘逸寒路福平
- 关键词：毕赤酵母蒜氨酸抗氧化
- 碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究被引量：7
- 2012年
- 从造纸厂周边碱性土壤中分离、筛选到一株产碱性木聚糖酶的细菌G1-3,根据形态和生理、生化特性并结合16SrDNA序列分析,鉴定菌株G1-3为短小芽孢杆菌,命名为Bacillus pumilusG1-3。利用克隆表达载体pET-22b(+),实现了Bacillus pumilusG1-3碱性木聚糖酶基因XynG1-3在E.coliBL21中的表达。经氨基酸序列分析,木聚糖酶XynG1-3属于GH11家族的小分子木聚糖酶。重组木聚糖酶XynG1-3经镍离子亲和层析一步纯化后,获得凝胶电泳条带单一的蛋白样品,经SDS-PAGE检测其分子量为24 kD。对酶学性质进行分析,重组酶XynG1-3最适作用温度为55℃,最适作用pH为8.0;该酶在60℃保温1 h,残余酶活保持为原来的56%,pH作用范围较广,在pH10.0下保存1 h,残余酶活仍能保持75%,为耐碱性木聚糖酶。
- 郑宏臣刘逸寒刘晓光韩杨王建玲路福平
- 关键词：短小芽孢杆菌碱性木聚糖酶酶学性质
