杨磊
- 作品数：21 被引量：92H指数：5
- 供职机构：天津市南开医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金中西医结合科研计划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血根碱通过调控PI3K/Akt信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制被引量：13
- 2018年
- 目的：探讨血根碱对胰腺癌细胞凋亡的影响及其信号通路调控机制。方法：不同浓度血根碱（2,4,6μmol·L-1）处理小鼠胰腺癌Panc02细胞不同时间（24,48,72 h）后,采用噻唑蓝（MTT）比色法检测血根碱对细胞生长抑制作用的影响;采用磷脂结合蛋白V/碘化丙啶（Annexin V/PI）双染色试剂盒通过流式细胞仪检测血根碱对Panc02细胞凋亡影响;采用花青染料（JC-1）探针试剂盒荧光染料分析检测线粒体膜电位的变化;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）,总蛋白激酶B（Akt）,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）,总磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）,磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）的表达情况。结果：与空白组比较,不同浓度的血根碱作用同一时间后,随着药物浓度的增加细胞生长抑制率逐渐升高（P〈0.05）,与空白组比较,同一浓度作用不同时间后,随着时间的增加细胞生长抑制率逐渐升高（P〈0.05）;与空白组比较,血根碱2μmol·L-1组的细胞凋亡率无明显升高,与空白组比较,血根碱4,6μmol·L-1组的细胞凋亡率均明显升高（P〈0.05）;与空白组比较,血根碱2μmol·L-1组时红绿荧光无变化,血根碱4,6μmol·L-1组红色荧光减弱,绿色荧光增强,Panc02细胞线粒体膜电位降低;与空白组比较,血根碱2μmol·L-1组处理的Bax,Bcl-2,p-PI3K,p-Akt,Akt和PI3K蛋白表达均无变化,血根碱6μmol·L-1组Bax蛋白表达增高,Bcl-2及PI3K/Akt信号通路中关键蛋白p-PI3K,p-Akt表达降低（P〈0.05）。结论：血根碱通过抑制PI3K/Akt信号通路有效地诱导小鼠胰腺癌Panc02细胞经线粒体凋亡途径发生凋亡。
- 田龙夫张琦王波涛崔立华杨磊马波崔云峰
- 关键词：胰腺癌细胞凋亡
- 马鞭草苷通过激活GPR18受体对脓毒症诱导的急性肺损伤的保护作用及机制探究
- 2023年
- 目的 探讨马鞭草苷(Verbenalin)是否对脓毒症诱导的急性肺损伤具有保护作用及潜在机制。方法 实验动物采用C57BL/6小鼠,应用体内盲肠结扎穿孔(CLP)手术建立脓毒症急性肺损伤模型,将30只小鼠随机分为三组,分别为:对照组(Cont组)、模型组(CLP组)和马鞭草苷治疗组(CLP+Verbenalin组);体外采用脂多糖(LPS)刺激小鼠单核细胞RAW264.7细胞构建巨噬细胞M1极化模型;采用HE染色法检测肺组织的病理变化;采用流式细胞仪检测肺组织中巨噬细胞的M1极化;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)细胞上清及外周血中IL-1β、TNF-α和IL-6的含量;采用蛋白印迹法(Western blotting)法检测目的蛋白的表达。结果 在体内,与对照组比较,模型组出现肺泡壁增厚、炎症细胞浸润数目明显增加的改变;同时肺组织中M1型巨噬细胞的比例增加;与模型组相比,马鞭草苷可以显著改善肺组织病理损伤和外周血中IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌及抑制巨噬细胞的M1极化。在体外,LPS刺激诱导IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌增加,以及促进NF-κB信号通路活化;马鞭草苷干预后,炎症因子的分泌和P-NF-κB的磷酸化水平均显著降低;同时,给予O1918预处理抑制G蛋白偶联受体18(GRP18)后,马鞭草苷的抑制M1极化的作用减弱。结论 马鞭草苷可以通过激活GPR18受体抑制NF-κB信号通路的活化,进而降低巨噬细胞M1极化和减轻脓毒症诱导的肺损伤。
- 于鑫董铮杨磊杨文杰
- 关键词：脓毒症急性肺损伤
- 凉血活血方通过抑制NLRP3炎性小体活化保护脓毒症急性肺损伤小鼠的实验研究被引量：5
- 2022年
- 目的:观察凉血活血方对脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用并探索其作用机制。方法:将72只雄性C57BL/6小鼠72只,采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备ALI小鼠模型,将小鼠随机分为3组:假手术组、模型组和凉血活血方组。凉血活血方组灌胃给予凉血活血方水煎剂(6 g/kg)连续2 d(1次/d),假手术组和模型组给予同等剂量生理盐水灌胃。术后24 h麻醉取材。HE染色观察肺组织病理变化;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平;Western blotting检测肺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、核因子(NF)-κB、信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路相关蛋白表达;检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;检测肺组织湿干重比(W/D)。结果:HE染色发现模型组肺组织损伤严重,肺组织结构紊乱,肺泡壁增厚,有明显炎性细胞浸润或出血,经凉血活血方治疗能明显减轻肺组织损伤程度,炎性细胞浸润减少;与假手术组比较,模型组肺组织MPO活性增加,水肿明显,给予中药治疗后可以明显抑制MPO增加,并且减轻肺组织水肿;ELISA检测发现凉血活血方能够降低ALI小鼠BALF中TNF-α、IL-6、IL-1β等炎性因子的水平(P<0.05)。Western blotting检测证实凉血活血方能够降低ALI小鼠肺组织NLRP3、ASC、Caspase 1 P20、IL-18、IL-1β等NLRP3炎性小体相关蛋白表达水平(P<0.05),也能降低NF-κB、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.05)。结论:凉血活血方对脓毒症所致ALI小鼠具有明显的保护作用,其作用机制可能是通过抑制NLRP3炎性小体活化和NF-κB、STAT3通路激活,从而减少下游相关炎性因子的释放,减轻肺组织损伤。
- 卓玉珍杨磊鹿燕敏李棣华刘俊红李彩霞崔立华钟成梁
- 关键词：凉血活血方脓毒症急性肺损伤核因子-ΚB信号传导与转录激活因子3
- 鹅掌楸苷及其苷元在制备防治脓毒症所致肺损伤药物中的用途
- 本发明公开了一种鹅掌楸苷及其苷元在制备防治脓毒症所致肺损伤药物中的用途，属于含有来自植物的药物制剂。本发明将从大血藤中提取的鹅掌楸苷经纤维素酶酶解获得鹅掌楸苷苷元（+）‑丁香脂素；再通过小鼠实验，采用口服给药途径，应用小...
- 高宏伟杨磊李棣华张淑坤吕沅珊
- 文献传递
- 凉血活血方对脓毒症急性肾损伤小鼠肠道菌群及NLRP3/caspase-1/GSDMD焦亡通路的影响被引量：2
- 2023年
- 目的:探讨凉血活血方对脓毒症急性肾损伤(AKI)小鼠肠道菌群、肠道屏障及肾组织NOD样受体蛋白3/天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1/焦孔素D(NLRP3/caspase-1/GSDMD)细胞焦亡信号通路的影响。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)、脓毒症+凉血活血方组(CLP+LXHX组),每组10只。通过盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症AKI小鼠模型;Sham组仅进行开腹处理。制模前2 h,CLP+LXHX组给予凉血活血方水煎剂(6 g/kg)灌胃治疗;Sham组及CLP组给予等体积生理盐水灌胃。制模后24 h,麻醉处死小鼠,取结肠和肾组织及结肠内新鲜粪便。光镜下观察小鼠肾组织和结肠组织的病理变化;采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测小鼠肾脏组织炎症因子白细胞介素(IL-1β和IL-18)的mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测小鼠肾组织中NLRP3、caspase-1和GSDMD的蛋白表达;采用16S rDNA高通量测序检测小鼠肠道菌群的变化。结果:与Sham组比较,CLP组肾脏组织炎症细胞浸润增加,肾脏空泡化,肾脏组织中IL-1β和IL-18的mRNA表达及NLRP3、caspase-1和GSDMD的蛋白表达均明显升高;结肠组织病理损伤显著,肠道菌群的物种丰富度显著降低,肠球菌和埃希菌-志贺菌的相对丰度显著增加,回肠杆菌属、拟普雷沃菌属、毛螺菌属、克雷伯菌属和副萨特菌属的相对丰度显著升高。与CLP组比较,凉血活血方可以显著减轻脓毒症小鼠肾脏组织和结肠组织病理损伤,并降低病理评分(分:肾脏组织为1.75±0.43比3.50±0.50,结肠组织为1.25±0.43比4.50±0.50,均 P<0.05),改善肠道菌群组成,降低肠球菌和埃希菌-志贺菌的相对丰度,并显著增加乳酸杆菌和阿克曼菌属的相对丰度,显著降低肾脏组织中IL-1β和IL-18的mRNA表达〔IL-1β mRNA(2 ^(-ΔΔCt)):1.59±0.05比4.61±0.88,IL-18 mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.69±0.17比2.86±0.63,均 P<0.05〕及NLRP3、caspase-1和GSDMD的蛋白
- 周旻杨磊卓玉珍李棣华张兰秋崔凌志李家瑞
- 关键词：脓毒症凉血活血方肠道菌群急性肾损伤
- 基于中医传承辅助平台探索对药治疗反流性食管炎的作用及临床验证被引量：1
- 2023年
- 目的探讨中医药治疗反流性食管炎(reflux esophagitis,RE)的核心药物、组方规律和核心组合,为临床用药提供理论依据。方法收集万方、维普、中国知网中中医药治疗RE的相关文献,筛选并建立方剂数据库,运用中医传承辅助系统(V2.5)软件进行用药规律挖掘。并选取2022年1月-2023年1月就诊于南开医院的RE患者60例,以筛选出的核心对药为基础进行辨证施治,观察治疗前后的临床效果。结果筛选出治疗RE相关方剂101首,涉及中药133种,涉及的主要证型为肝胃郁热证、肝胃不和证、寒热错杂证。肝胃郁热证相关方剂,黄连、吴茱萸、半夏、甘草、柴胡使用频率较高,对药“黄连-吴茱萸”出现频率较高;肝胃不和证相关方剂,柴胡、甘草、白芍、半夏、黄连使用频率较高,对药“白芍-柴胡”出现频率较高;寒热错杂证相关方剂,干姜、黄连、黄芩、半夏使用频率较高,角药“干姜-黄连-黄芩”出现频率较高。用以上核心对药对RE患者三大主要证型进行辨证论治,给予8周的中药治疗后,食管下括约肌静息压及残余压明显升高(P<0.05),平均远段收缩积分(DCI)值明显升高(P<0.05),Demeester评分明显降低(P<0.05)。结论临床RE以肝胃郁热证、肝胃不和证和寒热错杂证多见,中医药防治RE主要从肝胃论治,治法以疏肝泄热、和胃降逆为主,用药多辛苦合用、寒温并调。“黄连-吴茱萸”、“白芍-柴胡”、“干姜-黄连-黄芩”分别为上述不同证型的核心对药或角药,治疗RE的具有良好的临床应用效果,值得推广。
- 郭政唐艳萍史欣刘磊刘思雨刘琰弓艳霞杨磊
- 关键词：反流性食管炎数据挖掘中医传承辅助系统
- 双氢青蒿素和索拉非尼诱导未分化甲状腺癌铁死亡的协同机制
- 2023年
- 目的探究双氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)和索拉非尼(sorafenib, SOR)诱导未分化甲状腺癌(anaplastic thyroid cancer, ATC)细胞发生铁死亡的协同作用及分子机制。方法以细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞仪检测DHA和SOR对ATC细胞CAL-62增殖及铁死亡的影响;实时荧光定量PCR和蛋白印迹检测铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11基因(SCL7A11)、脂氧合酶-15(LOX-15)及p53表达水平的变化;对应的检测试剂盒检测铁死亡中间代谢产物乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛、亚铁离子(Fe2+)、一氧化氮(NO)、活性氧簇(ROS)水平;建立裸鼠肿瘤模型分析DHA和SOR对ATC在体内的抑制作用。结果与对照组相比, DHA、SOR和DHA+SOR处理均呈剂量依赖性抑制细胞增殖(P<0.001), LDH、Fe2+、丙二醛及ROS含量明显增多, GSH活性明显降低(P<0.001), 其作用均被硫酸亚铁(FeSO4)促进, 被铁抑素-1逆转。与对照组及单独用药组比较, DHA+SOR组15-LOX-2及p53表达上调, GPX4和SCL7A11水平降低(P<0.001), 15-LOX-1蛋白含量差异无统计学意义;此外, DHA+SOR组NO的含量显著降低(P<0.001)。DHA和SOR在体抑制ATC肿瘤生长。结论 DHA与SOR协同作用上调15-LOX-2基因的表达, 抑制NO的合成, 从而诱导ATC细胞发生铁死亡。
- 董佳悦李树杰王艳杨磊李棣华孟召伟
- 关键词：双氢青蒿素索拉非尼未分化甲状腺癌
- 活血通降方对反流性食管炎大鼠肠道菌群及Caspase-3/GSDME通路的影响被引量：3
- 2022年
- 目的:探讨活血通降方对反流性食管炎大鼠肠道菌群及半胱氨酸蛋白酶3/焦孔素E(Caspase-3/GSDME)通路的影响。方法:将30只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、活血通降方组,每组10只。除对照组外,其余两组均采用改良部分贲门肌切开术+外置幽门部分结扎术建立反流性食管炎大鼠模型。造模成功后,对照组及模型组予2.5 mL生理盐水灌胃,活血通降方组予2.5 mL活血通降方(3.68 g/kg)灌胃,2次/d,连续给药14 d。采用苏木精-伊红染色法观察各组大鼠食管组织病理变化;采用蛋白组学检测差异蛋白变化;采用酶联免疫吸附法检测血清中内毒素、IL-1β和IL-18的表达;采用蛋白免疫印迹法检测食管组织中Caspase-3和GSDME的表达,采用16S rDNA高通量测序检测肠道菌群的变化。结果:模型组大鼠食管组织病理评分较对照组增高(P<0.05),活血通降方组大鼠食管组织病理评分较模型组下降(P<0.05);蛋白组学分析表明,Caspase-3是各组的主要差异蛋白;与对照组比较,模型组肠道菌群的物种丰度显著降低,未分类拟杆菌属、Prevotellaceae_UCG-003属、螺旋菌属及Prevotellaceae_UCG-001属等革兰阴性菌的相对丰度显著增加,Akkermansia与Ruminococcaceae_UCG-005属的相对丰度显著降低,血清中内毒素、IL-1β和IL-18的含量及食管组织中Caspase-3和GSDME蛋白的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,活血通降方可改善肠道菌群组成,显著增加有益菌Ruminococcaceae_UCG-005的丰度,降低革兰阴性菌如Prevotellaceae_UCG-003属、拟杆菌属及未分类拟杆菌属的相对丰度,显著降低血清中内毒素、IL-1β和IL-18的含量,且可明显下调食管组织中Caspase-3和GSDME蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:活血通降方可能通过调节肠道菌群降低体内内毒素水平,从而下调食管组织中Caspase-3和GSDME蛋白的表达及降低焦亡相关炎症因子的释放,对反流性食管炎大鼠黏膜损伤起�
- 尹红唐艳萍杨磊刘思雨
- 关键词：反流性食管炎肠道菌群半胱氨酸蛋白酶3
- 马鞭草苷对口腔扁平苔藓免疫反应的抑制作用及机制被引量：1
- 2022年
- 目的探讨马鞭草苷对口腔扁平苔藓(OLP)免疫反应的抑制作用及机制。方法用脂多糖(LPS)体外刺激角质形成细胞系HaCaT细胞构建OLP炎症模型,CCK-8法检测细胞活力;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的基因表达变化;蛋白质印迹法检测细胞中核因子-κB p65(NF-κB p65)和p-NF-κB p65蛋白的表达变化。结果在HaCaT细胞中,LPS刺激抑制细胞活力,并诱导TNFα、IL-1β和IL-6基因的表达上调,以及NF-κB p65和p-NF-κB p65蛋白的表达上调;20 mg/L马鞭草苷作用24 h可减轻LPS诱导的HaCaT细胞损伤、抑制炎症因子的表达和NF-κB p65信号通路的活化;同时,经G蛋白偶联受体18(GRP18)抑制剂O1918预处理后,马鞭草苷的保护作用显著减弱。结论马鞭草苷可以通过激活GPR18受体抑制NF-κB信号通路的活化,进而降低炎症因子的表达和减轻OLP口腔黏膜炎症反应。
- 王芳闫卉尚婷婷杨磊
- 关键词：口腔扁平苔藓白细胞介素-1Β核因子-ΚB
- 基于“肺与大肠相表里”探析新型冠状病毒肺炎之肺肠同病及中药治疗作用被引量：4
- 2020年
- “肺与大肠相表里”是中医脏象学说从整体功能状态把握和认识人体生命活动观念的具体体现。肺和大肠在生理上相互关联,通过调节气机升降出入与气化,实现对呼吸运动、津液敷布、水液代谢和大肠传导功能的有序调节。同时肺与大肠在病理上相互影响,肺病可及肠,肠病可及肺,通过淋巴、血液、神经系统等途径实现疾病传变[1-2]。新型冠状病毒肺炎以发热、乏力、咳嗽为主要症状,可伴有腹泻、恶心、呕吐等胃肠道症状,中医药治疗在减轻发热症状、控制病情进展、减少激素用量、减轻并发症等方面具有优势。
- 张淑坤崔乃强崔乃强崔立华卓玉珍刘俊红崔立华李彩霞李棣华
- 关键词：肺与大肠相表里气机升降出入水液代谢疾病传变胃肠道症状
