李枫
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- PCSK6对可溶性corin的活化作用研究被引量：1
- 2016年
- 目的:研究前蛋白转化酶枯草溶菌素6(proprotein convertase subtilisin/kextin type 6,PCSK6)对可溶性corin的活化作用,以及PCSK6作用后的可溶性corin是否具有生物学活性。方法:以野生型corin质粒为模板,通过PCR扩增出不含跨膜区的corin基因片段,并将目的基因克隆至真核表达载体p SEC得到重组质粒p SECsol Corin,测序验证。分别将可溶性corin、PCSK6及心钠肽前体(pro-atrial natriuretic peptide,pro-ANP)的表达载体转染人胚胎肾(human embryonic kidney,HEK)293细胞,收取上清液。然后将可溶性corin上清液与不同体积的PCSK6上清液共同孵育,免疫印迹(Western blot)方法检测corin蛋白的活化情况。再将PCSK6作用后的可溶性corin与pro-ANP上清液共孵育,检测可溶性corin的生物学活性。结果:构建了可溶性corin的表达质粒,并在HEK293细胞成功表达可溶性corin蛋白。可溶性corin的上清液与pcsk6上清液共同孵育后可检测到活化条带,并可使pro-ANP活化为ANP。结论:PCSK6同样可以剪切活化可溶性corin蛋白,活化后的corin具有生物学活性。为可溶性corin用于心衰的临床治疗提供了重要基础。
- 李枫周田甜刘萌董宁征
- 关键词：心力衰竭
