李超红
- 作品数：19 被引量：10H指数：2
- 供职机构：新乡医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乙酰辅酶A羧化酶1对胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响被引量：3
- 2022年
- 目的探讨乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对人胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移及侵袭的作用。方法Western blotting检测人胶质瘤细胞系U87、U251及U373中ACC1的表达;构建ACC1过表达质粒载体,将过表达ACC1质粒载体瞬时转染至U87细胞中;Western blotting检测转染后U87细胞中ACC1表达情况;MTT实验检测过表达ACC1对U87细胞增殖的影响;Transwell迁移和侵袭实验分别检测过表达ACC1对U87细胞迁移和侵袭的影响;划痕实验检测过表达ACC1对U87细胞划痕愈合能力的影响;Western blotting检测相关蛋白表达变化。结果与人胶质瘤细胞系U251和U373相比,U87细胞中ACC1表达较低;ACC1过表达抑制U87细胞增殖(P<0.01);ACC1过表达抑制U87细胞迁移、侵袭和划痕愈合能力(P<0.01);ACC1过表达迁移和侵袭相关蛋白波形蛋白(vimentin)、纤维连接蛋白(fibronectin)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)表达下调(P<0.01),凋亡抑制蛋白Bcl-2和细胞周期蛋白(cyclin)B、cyclin D表达下调(P<0.01),p-STAT3蛋白表达下调(P<0.01),细胞周期蛋白P21表达上调(P<0.01)。结论过表达ACC1可能通过抑制STAT3活性,抑制人胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。
- 王阳赵宝生李超红刘玉珍
- 关键词：U87细胞增殖迁移免疫印迹法
- dbcAMP对NG108-15细胞中谷氨酸转运体及受体表达的影响
- 2020年
- 目的:探讨谷氨酸转运体及其受体在N6,2-0-二丁酰基腺苷3',5'环单磷酸钠盐(dbcAMP)诱导NG108-15细胞分化前后的表达情况。方法:应用1 mmol/L dbcAMP诱导NG108-15细胞分化,免疫荧光染色检测dbcAMP对NG108-15细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和巢蛋白(nestin)表达影响,RT-PCR技术检测dbcAMP对NG108-15细胞中囊泡膜谷氨酸转运体(VGluTs)、兴奋性氨基酸转运体(EAATs)、离子型谷氨酸受体(iGluRs)和代谢型谷氨酸受体(mGluRs)mRNA表达的影响。结果:dbcAMP处理72 h后NG108-15细胞GFAP和nestin表达下降;dbcAMP增加NG108-15细胞中EAAT1、VGluT2/3、GluR1、mGluR5的mRNA表达水平,而降低EAAT2/3、GluR3/4/7、mGluR2/7/8的mRNA表达水平。结论:dbcAMP处理可引起NG108-15细胞谷氨酸转运体及其受体表达水平发生改变。
- 李超红刘玉珍
- 关键词：谷氨酸转运体代谢型谷氨酸受体NG108-15细胞
- 代谢型谷氨酸受体5在肺组织中的表达及定位
- 2018年
- 目的:检测代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)在大鼠、小鼠和人肺组织中的表达及定位。方法:选择成年SD大鼠、Balb/c小鼠和人肺组织,RT-PCR检测mGluR1和mGluR5 mRNA表达情况,免疫印迹和免疫组织化学法检测肺组织mGluR5表达及定位。结果:RT-PCR显示,mGluR1 mRNA在人肺组织中表达,而在大鼠和小鼠肺组织中未表达;mGluR5 mRNA在三者肺组织中均表达,且在人肺组织中的表达量多于mGluR1。免疫印迹检测结果显示,mGluR5在三者肺组织中均有表达。免疫组织化学结果提示,mGluR5在大鼠和小鼠小支气管、终末细支气管上皮、肺泡和血管表达;在人肺组织中,mGluR5主要在肺泡及血管表达,而在支气管上皮未见表达。结论:mGluR5在人和鼠肺组织内的分布具有种属差异性。
- 黄璐张景航李超红贾祥磊赵宝生刘玉珍
- 关键词：代谢型谷氨酸受体5小鼠
- 大鼠颈动脉体免疫组化实验方法被引量：1
- 2016年
- 目的运用石蜡切片免疫组化试验方法检验大鼠颈动脉体。方法通过对颈动脉体的固定,石蜡包埋,切片。分析切片的质量及其原因,运用免疫组化方法标记大鼠颈动脉体标记物——酪氨酸羟化酶。结果大鼠颈动脉体在100%的酒精和二甲苯的脱水时间18 min为宜。将颈动脉体水平放置包埋和修剪之后更好进行石蜡切片操作。结论应用免疫组化方法研究颈动脉体的过程需要小心操作,反复练习,及时总结,才能熟能生巧,最终掌握适用于颈动脉体的研究方法。
- 贾祥磊李超红蔡瑞艳冯杰姜淑娴刘玉珍
- 关键词：颈动脉体石蜡切片免疫组化
- 多巴胺对急性间歇性低氧诱导的大鼠颈动脉体低氧敏感性的影响
- 2020年
- 目的:观察急性间歇性低氧刺激后大鼠颈动脉体对低氧的敏感性以及多巴胺对颈动脉体低氧敏感性的影响。方法:将分离SD大鼠的颈动脉体-窦神经移入到孵育槽,然后把分离的窦神经吸入到记录的玻璃电极中行电信号记录。记录基线部分缓冲液充入气体为95%O 2+5%CO 2混合气,低氧应激给予5%O 2+5%CO 2+90%N 2混合气,低氧刺激给予30 s,95%O 2+5%CO 2给予90 s,共10个循环,每组实验大鼠数量n大于等于5。结果:大鼠离体的颈动脉体,给予急性间歇性低氧应激,再给予低氧刺激,窦神经较之前低氧刺激放电活动增强。但加入多巴胺后,可以抑制窦神经对低氧的反应,急性间歇性低氧后,多巴胺对窦神经的低氧放电活动抑制作用加强。结论:大鼠颈动脉体给予急性间歇性低氧可增强窦神经对低氧的反应,多巴胺可抑制急性低氧诱导的颈动脉体对低氧敏感性的增强。
- 贾祥磊刘玉珍刘玉珍李超红
- 关键词：颈动脉体多巴胺
- 常规培养条件下成年大鼠颈动脉体原代细胞培养
- 2020年
- 目的 探讨成年大鼠离体颈动脉体的细胞培养方法.方法 选取8~9周龄健康成年雄性SD大鼠,体重250~270 g,游离双侧颈总动脉分叉,体视显微镜下分离出完整颈动脉体,置于100μl胶原酶缓冲液中,采用酶加机械切割方法消化细胞,离心后通过常规培养基重悬细胞后种于预先包被多聚-D-赖氨酸的玻片上.借助颈动脉体Ⅰ型细胞标志物酪氨酸羟化酶和Ⅱ型细胞标志物胶质纤维酸性蛋白鉴定所培养细胞,并通过巢蛋白染色鉴定有无干细胞特性.结果 常规培养基可以培养出有活性的成年8周龄大鼠的颈动脉体原代细胞,Ⅰ型细胞可以保持类似于体内生长状态的簇状,Ⅱ型细胞散在分布.在这些原代培养细胞中含有巢蛋白阳性干细胞.结论 常规培养基能够培养出活性较好且符合体内生长特性的成年大鼠颈动脉体细胞,满足后续颈动脉体分子机制的研究.
- 李超红刘玉珍
- 关键词：颈动脉体原代细胞培养干细胞
- 慢性间歇性低氧通过Ang Ⅱ-AT1R激活PI3K/Akt促进LLC细胞迁移研究
- 2022年
- 目的探究慢性间歇性低氧(CIH)通过血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-AngⅡ1型受体(AT1R)对小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞迁移的影响以及相关机制。方法将20只小鼠随机分为常氧对照组(10只)和CIH组(10只)。用常氧和CIH处理后的LLC细胞皮下成瘤小鼠血清配制成完全培养基来培养LLC细胞,检测LLC细胞形态。Transwell检测不同处理方法对LLC细胞迁移的影响;蛋白质印迹法检测LLC细胞迁移相关信号蛋白水平的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠血清与LLC细胞培养基上清中AngⅡ水平。结果ELISA结果显示,CIH组小鼠血清中AngⅡ的水平升高,t=13.948,P=0.008。不同处理方法小鼠血清培养LLC细胞结果显示,CIH组小鼠血清促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样。Transwell结果显示,Losartan拮抗CIH组小鼠血清对LLC细胞迁移有促进作用,CIH的主效应为F=22.667,P=0.001,Los的主效应为F=29.706,P=0.001,CIH与Los二者间存在交互拮抗效应,F=10.303,P=0.012。用AngⅡ处理LLC细胞后发现,AngⅡ促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样,Transwell结果显示,AngⅡ以浓度依赖性的方式促进LLC细胞迁移,F=42.497,P=0.003。AngⅡ以及AngⅡ联合使用AT1R拮抗剂Losartan处理LLC细胞,Transwell结果显示,Losartan拮抗AngⅡ对LLC细胞迁移有促进作用,F=53.432,P<0.001;蛋白质印迹结果显示,Losartan拮抗AngⅡ对vimentin(F=77.819,P=0.001)、MMP 2(F=49.363,P=0.001)、β-catenin(F=23.847,P<0.001)和p-Akt/Akt(F=58.608,P=0.007)水平有促进作用。AngⅡ以及AngⅡ联合使用PI3K阻断剂LY294002处理LLC细胞后,Transwell结果显示,LY294002拮抗AngⅡ对LLC细胞迁移有促进作用,F=52.792,P=0.002;蛋白质印迹结果显示,LY294002拮抗AngⅡ对vimentin(F=94.231,P=0.032)、MMP 2(F=48.612,P=0.020)、β-catenin(F=46.037,P<0.001)和p-Akt/Akt(F=19.644,P=0.002)水平有促进作用。进一步给予LLC细胞间歇性低氧(IH)以及IH联合Losartan处理,ELISA结果显示,IH提高LLC细胞培养基上清液中
- 赵贞李超红赵宝生刘玉珍
- 关键词：慢性间歇性低氧迁移
- 成年大鼠颈动脉体组织培养被引量：2
- 2016年
- 目的：探讨成年大鼠离体颈动脉体的培养方法。方法：SD大鼠随机分为常氧组和低氧组。游离双侧颈总动脉分叉，体视显微镜下分离出完整颈动脉体，分别置于常氧和低氧中培养，免疫印迹检测颈动脉体组织标志性蛋白酪氨酸羟化酶（TH）的表达水平和ERK1/2磷酸化（p-ERK1/2）水平。结果：颈动脉体组织表达TH，且低氧处理后TH及p-ERK1/2表达量明显增加。结论：通过离体成年大鼠颈动脉体组织培养可获得活性良好的颈动脉体，满足后续颈动脉体分子机制的研究。
- 李超红贾祥磊金保哲惠磊冯杰姜淑娴刘玉珍
- 关键词：颈动脉体低氧
- 大鼠颈上神经节代谢型谷氨酸受体7,8的表达及慢性间歇性低氧对其的影响被引量：1
- 2023年
- 目的研究大鼠颈上神经节(SCG)组织中III组代谢型谷氨酸受体7和8(mGluR7/8)的表达、定位,以及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠30只,免疫组织化学染色检测大鼠SCG组织中mGluR7和mGluR8的表达。免疫荧光共定位染色检测mGluR7和mGluR8的分布。核浆分离蛋白进行Western blot检测mGluR7和mGluR8在细胞浆和细胞核的分布情况。构建6周CIH大鼠模型,CIH组放于低氧小室中:首先向小室内充入100%氮气,使氧浓度分数逐渐降低至6%并维持30 s,然后充入100%氧气,使氧浓度分数回升至21%,作用周期为4 min/次,8 h/d,对照组放于常氧环境中。通过尾动脉血压检测大鼠收缩压、舒张压和平均动脉压的变化。Western blot检测CIH对SCG中mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。结果大鼠SCG表达mGluR7和mGluR8。mGluR7分布于神经元和小荧光(SIF)细胞,上述细胞胞浆和胞核中均染色阳性,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管中不表达;mGluR8定位于神经元和SIF细胞的胞浆中,而在SGCs、神经纤维和血管中不表达。大鼠SCG核浆蛋白检测结果进一步证实mGluR7不仅存在于胞浆也存在于胞核蛋白中,而mGluR8仅存在于胞浆蛋白中。动物实验结果显示,与对照组相比,CIH升高大鼠的收缩压(P<0.0001)、舒张压(P<0.001)和平均动脉压(P<0.0001)。CIH增加mGluR7和mGluR8的蛋白表达量(P<0.05)。结论mGluR7和mGluR8均表达于大鼠SCG,但是细胞定位方式不同,CIH升高大鼠血压并增加mGluR7和mGluR8蛋白在SCG的表达水平。
- 魏茜茜李超红赵晨露赵宝生刘玉珍
- 关键词：颈上神经节慢性间歇性低氧高血压
- 肾上腺素对U251细胞增殖及凋亡的影响
- 2019年
- 目的:探讨肾上腺素对人胶质瘤细胞系U251细胞增殖、凋亡、周期的作用。方法:应用RT-PCR方法检测U251细胞中β-肾上腺素能受体(β-AR) mRNA的表达。MTT法检测肾上腺素对U251细胞增殖的影响;克隆形成实验检测肾上腺素对U251细胞克隆形成的影响;Annexin V-FITC/PI检测肾上腺素对U251细胞凋亡的影响;流式细胞术检测肾上腺素对U251细胞周期的影响;Western Blot检测周期、凋亡和自噬相关蛋白表达变化。结果:人胶质瘤细胞U251表达β-AR;肾上腺素以浓度依赖性的方式抑制U251细胞增殖(P <0. 05);肾上腺素抑制U251细胞的克隆形成(P <0. 05);流式结果显示,随着肾上腺素浓度的增加,细胞的凋亡率明显增加(P <0. 05),G0/G1期细胞比例显著增加(P <0. 05),G2/M期细胞比例下降(P <0. 05);肾上腺素处理U251细胞48 h,细胞周期蛋白Cyclin D表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调,自噬相关蛋白LC3-II/LC3-I比值升高。结论:肾上腺素可能通过激活细胞自噬抑制人胶质瘤细胞的增殖,使细胞阻滞在G0/G1期。
- 王阳黄坷坷李超红陈智赵宝生刘玉珍
- 关键词：肾上腺素应激增殖凋亡U251细胞
