张帅
- 作品数：11 被引量：47H指数：3
- 供职机构：北京农学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 纳米免疫磁珠技术联合胶体金层析快速检测单增李斯特菌
- 本发明提出的纳米免疫磁珠技术联合胶体金层析快速检测单增李斯特菌方法如下：应用链霉亲和素‑生物素介导偶联的纳米磁珠标记经杂交瘤技术制备筛选所得单抗1B12 CGMCCNo.10312制备成免疫磁珠；以胶体金标记的另一配对单...
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- 文献传递
- 牛妊娠相关糖蛋白boPAG2双抗体夹心ELISA体系的建立被引量：7
- 2020年
- 【目的】通过双抗体夹心ELISA体系实现对牛妊娠相关糖蛋白boPAG2的免疫学检测,为后续研发牛妊娠检测试剂盒奠定基础。【方法】将自制boPAG2作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,以细胞融合技术对呈阳性的杂交瘤细胞进行筛选。运用ELISA相加性试验筛选最佳配对抗体,初步建立起双抗体夹心酶联免疫吸附试验系统,采集牛场中120头荷斯坦奶牛血清样本进行初筛。【结果】筛选出3株能稳定分泌boPAG2单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为2C01,5E02,3B05。纯化出单克隆抗体滴度为(1∶22.48×10^4)^(1∶11.96×10^4),免疫球蛋白亚型均为IgG。ELISA相加性试验筛选出2株可识别boPAG2抗原不同表位的最佳配对抗体5E02和3B05。当5E02作为包被抗体,3B05作为检测抗体时,其最佳稀释质量浓度为1.25μg/mL,检测boPAG2的灵敏度可达5μg/mL。【结论】制备和选定了两株最佳配对单克隆抗体5E02和3B05,该对抗体效价高,通过建立双抗体夹心ELISA体系实现对boPAG2的免疫学检测,并对少量血清样品进行了初步鉴定。
- 祁文婧张帅赵鑫张红星谢远红金君华刘慧
- 关键词：单克隆抗体
- 快速检测生鲜肉中三种食源性致病菌被引量：12
- 2016年
- 为同时快速检测生鲜肉中鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌和福氏志贺氏菌3种食源性致病菌,降低检测成本,制备了特异性单克隆抗体和多克隆抗体,研制出能够同时检测以上3种致病菌的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,本试验成功筛选出3株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株2E3、2E7和2E8,3种单克隆抗体效价均在128×10^6以上,3种多克隆抗体效价均在200×10^6以上。制备的胶体金免疫层析试纸条对鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌和福氏志贺氏菌3种食源性致病菌的特异性良好,灵敏度均为1×10^4CFU/g。
- 张帅齐颖颖张红星王怡雯谢远红刘慧
- 关键词：食源性致病菌单克隆抗体多克隆抗体胶体金免疫层析试纸条
- 纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠伤寒沙门氏菌的方法
- 本发明公开一种抗鼠伤寒沙门氏菌单克隆抗体，所述单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.10313的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明还公开了由上述单克隆抗体制备得到的纳米免疫磁珠以及纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠...
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- 文献传递
- 纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠伤寒沙门氏菌的方法
- 本发明公开一种抗鼠伤寒沙门氏菌单克隆抗体，所述单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.10313的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明还公开了由上述单克隆抗体制备得到的纳米免疫磁珠以及纳米免疫磁珠技术联合酶联免疫吸附快速检测鼠...
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- 双抗夹心ELISA快速检测冷鲜肉中福氏志贺氏菌2a被引量：3
- 2019年
- 为建立冷鲜肉中福氏志贺氏菌2a双抗夹心ELISA检测体系,采用福氏志贺氏菌2a抗原免疫获得多克隆抗体,应用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选出1株福氏志贺氏菌2a单克隆抗体杂交瘤细胞株,命名为2C10。试验结果表明,2C10杂交瘤细胞株抗体效价为1∶10.24×104,抗体纯度为96%,免疫球蛋白亚型为IgG2a。用此单克隆抗体作为检测抗体,多克隆抗体为捕捉抗体,建立双抗夹心ELISA体系,检测限为1 000 CFU/g。用此体系检测宋内志贺氏菌、大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌、单增李斯特菌、枯草芽孢杆菌及阪崎肠杆菌,均无交叉反应。本研究可为冷鲜肉中福氏志贺氏菌2a的检测提供一种特异性强,准确度高的ELISA检测方法。
- 王怡雯张帅张红星齐颖颖谢远红刘慧鲁舟
- 关键词：单克隆抗体多克隆抗体
- 单增李斯特菌的微滴数字PCR检测方法及其应用
- 本发明提供了一种单增李斯特菌的微滴数字PCR检测方法及其应用，涉及生物检测技术领域。本发明提供的单增李斯特菌的微滴数字PCR检测方法，首先分别提取单增李斯特菌标准品、待测样品和非目标菌株的DNA，然后将得到的DNA进行微...
- 张红星谢远红章若曦张帅金君华刘慧刘文博
- 文献传递
- 双抗夹心酶联免疫吸附快速检测冷鲜肉中的6种血清型沙门氏菌被引量：25
- 2016年
- 为快速检测冷鲜肉中的沙门氏菌,筛选出1株产抗6种沙门氏菌单克隆抗体的细胞株,运用产生的抗体建立酶联免疫吸附检测方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。实验采用6种血清型致病沙门氏菌制备出混合抗原,对BALB/c小鼠及新西兰大白兔进行免疫,运用杂交瘤技术进行细胞融合,制备出抗沙门氏菌单克隆抗体以及多克隆抗体,并建立双抗夹心ELISA体系检测冷鲜肉中沙门氏菌。结果表明,成功筛选出1株能稳定分泌抗沙门氏菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株6E7,保藏编号为CGMCC 10313以及多克隆抗体,效价分别为1∶1.28×106和1∶8.0×105;将多抗作为包被抗体吸附于96孔酶标板上,并用辣根过氧化物酶标记单抗,建立双抗夹心ELISA体系;检测模拟污染肉样中沙门氏菌,其检测限为800 CFU/g;并与其他血清型沙门氏菌、志贺氏菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157:H7、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌均无交叉反应,特异性良好。
- 张帅齐颖颖张红星王怡雯谢远红刘慧
- 关键词：沙门氏菌杂交瘤技术单克隆抗体
- 一种检测水产制品中副溶血性弧菌的ELISA试剂盒
- 本发明公开了一种检测水产制品中副溶血性弧菌的ELISA试剂盒及使用方法。检测对象包括熟制水产品、即食生制水产品。本发明涉及生物技术领域以及免疫学领域。该试剂盒包括：包被有特异性副溶血性弧菌单克隆抗体一的96孔酶标板、用辣...
- 张红星张帅齐颖颖谢远红刘慧段慧霞
- 文献传递
- 福氏志贺氏菌2a单克隆抗体的制备及ELISA方法的建立被引量：2
- 2017年
- 为制备特异性和灵敏度较高的抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体,并建立双抗夹心酶联免疫吸附检测法,用于检测生鲜食品中的福氏志贺氏菌2a。本研究利用自制的福氏志贺氏菌2a抗原免疫BALB/c小鼠,并用杂交瘤技术进行细胞融合,经筛选克隆后,获得3株分泌抗福氏志贺氏菌2a单克隆抗体稳定的杂交瘤细胞,分别命名为5C12、1B5和6A11。3株杂交瘤细胞注射进小鼠腹腔后,诱导产生的腹水中抗体的效价为1∶2.048×10~5~1∶1.024×10~5,免疫球蛋白亚型均为IgG。3株抗体识别抗原表位的最佳配对为5C12和6A11,由此建立双抗夹心ELISA体系,测得其灵敏度为1 000 CFU/g,且具有良好的特异性。
- 王怡雯齐颖颖张红星张帅谢远红刘慧
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤
