黄琦雯
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金：江西省科技计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白、抗体及其应用
- 本发明公开了一种鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白、多克隆抗体及其应用。本发明提供的鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白，其全长氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，编码该蛋白的全长核...
- 王庆郑树城李莹莹曾伟伟王英英刘春任燕石存斌黄琦雯
- 文献传递
- 一种基于免疫过氧化物酶细胞单层试验的GCRV病毒Ⅱ型抗体检测试剂盒及其方法
- 本发明公开了一种基于免疫过氧化物酶细胞单层试验的GCRV病毒Ⅱ型抗体检测试剂盒及其方法，所述试剂盒含有固定在细胞培养板上的细胞内阳性抗原，其制备方法为将草鱼呼肠孤病毒株接种到GSB细胞悬液中，加入到细胞板中，培养成单层细...
- 曾伟伟王庆王英英李莹莹石存斌宋新建黄琦雯吴淑勤
- 文献传递
- 基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量：5
- 2017年
- 基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)是当前引起草鱼出血病暴发与流行的主要病原,为建立快速检测GCRV-Ⅱ的方法,本研究根据GCRV-ⅡRd Rp基因的保守区域序列设计引物及TaqMan探针,经反应参数优化,建立了检测GCRV-Ⅱ的荧光定量PCR方法。结果显示,该方法仅对GCRV-Ⅱ的靶基因序列进行扩增,与其它非靶目标核酸均无交叉反应;其最低检出量为3拷贝/μL病毒核酸,比普通PCR的敏感度高100倍;组内和组间重复试验变异系数均小于1%。采用该方法检测60份草鱼出血病疑似样品,GCRV-Ⅱ阳性检出率为75%(45/60),与细胞分离结果一致。应用该方法分析了GCRV-Ⅱ在不同细胞和不同培养方式下病毒的增殖含量,结果显示GSB和PSF细胞增殖量最大,达106拷贝/μL^107拷贝/μL病毒核酸,转瓶接种比常规的细胞培养瓶和培养板接种其病毒含量低2个数量级。本研究建立的GCRV-ⅡTaqMan荧光定量PCR方法具有高效、特异、敏感、可重复性强的优点,适用于GCRV-Ⅱ的临床快速检测和病毒定量分析。
- 黄琦雯王庆王英英李莹莹石存斌任燕高彩霞吴杰兴郑树城曾伟伟
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒TAQ
- 一种抗锦鲤免疫球蛋白IgM的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了抗锦鲤IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗锦鲤IgM的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO：C2015218的杂交瘤细胞株A5‑E10分泌产生的。利用所述的单克隆抗体可以用于锦鲤或普通鲤鱼某病...
- 李莹莹王庆曾伟伟王英英刘春郑树城石存斌宋新建黄琦雯
- 文献传递
- 草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型在不同鱼类细胞中的增殖情况被引量：10
- 2016年
- 草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型（GCRVⅡ）是当前导致草鱼出血病流行和暴发的主要基因型,本研究拟通过分析GCRVⅡ代表株HZ08在不同鱼类细胞中的增殖情况来筛选GCRVⅡ的敏感细胞系。首先以不同浓度的HZ08株接种草鱼吻端成纤维细胞（PSF）和草鱼鳔细胞（GSB）,以确定病毒接种的最佳浓度;然后以最佳接种浓度同时感染PSF、GSB、草鱼肝细胞（L8824）、草鱼卵巢细胞（CO）等10种鱼类细胞,接毒后每天观察细胞状态,用荧光定量PCR（q PCR）方法定量分析HZ08在各种细胞系中的增殖量,并在感染5 d后用间接免疫荧光定性分析病毒在各种细胞中的增殖情况。结果显示,HZ08感染细胞的最佳接种浓度为1.0×10^4拷贝/μL,该毒株接种的10种鱼类细胞均无明显的细胞病变效应（CPE）;q PCR分析病毒感染5~8 d后的结果显示,HZ08在GSB、L8824、PSF、草鱼鳍条细胞（CF）、CO、草鱼脑细胞（CIB）、锦鲤吻端细胞（KS）7种细胞中均能增殖,其中在GSB、L8824和PSF细胞中的增殖量较大,最大分别为1.14×10^7、5.90×10^6和6.30×10^4拷贝/μL。而在鲤上皮细胞（EPC）、锦鲤脑细胞（KB）、鲫脑细胞（Cc B）中不增殖,免疫荧光定性检测结果与荧光定量检测结果相吻合,在GSB、L8824和PSF中的荧光信号较多、较强,其他细胞中则较弱或没有荧光信号。研究表明,GSB、L8824和PSF是GCRVⅡ较为敏感的细胞系,该研究结果对今后Ⅱ型GCRV的研究和防控产品开发具有重要意义。
- 李贤曾伟伟王庆王英英李莹莹宋新建黄琦雯石存斌吴淑勤
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒细胞系
- 一种抗锦鲤免疫球蛋白IgM的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了抗锦鲤IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗锦鲤IgM的单克隆抗体是由保藏编号为？CCTCC？NO：C2015218？的杂交瘤细胞株A5-E10分泌产生的。利用所述的单克隆抗体可以用于锦鲤或普通鲤鱼...
- 李莹莹王庆曾伟伟王英英刘春郑树城石存斌宋新建黄琦雯
