华伟伟
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：浙江工商大学食品与生物工程学院更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 基于壳聚糖类的组氨酸标签蛋白纯化介质的制备及应用
- 蛋白质不仅是生命活动的物质基础，而且也是生物体内的功能性大分子。随着生物技术的发展，人们通过基因重组技术利用微生物大量表达功能性蛋白，比如可食性功能蛋白，药物蛋白等，而这些蛋白质的分离纯化是蛋白质组学和蛋白质功能性研究的...
- 华伟伟
- 关键词：分离纯化技术壳聚糖
- 文献传递
- 组氨酸标签蛋白纯化介质——EDTA-壳聚糖的制备与应用
- 2018年
- 以离子液体为溶剂,溶解具有较强金属螯合能力的EDTA-壳聚糖,能够保持较强的稳定性。将其用于涂膜处理,螯合两种金属离子(Ni2+,Zn2+),形成M2+-EDTA-壳聚糖(M=Ni,Zn),并对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化。结果表明:EDTA-壳聚糖经过涂膜处理后,形成坚韧而富有弹性的膜,用于组氨酸蛋白分离取得良好的效果,相比直接用于EGFP-(His)6-NH2蛋白纯化分离表现很大的优势,得到目的蛋白的纯度约为95%,与涂膜前相比,缩短了10 min的分离时间,且能更好地特异性吸附目的蛋白,在一定程度上节约了时间和成本。
- 邵明聪华伟伟邱金丹黄建颖
- 关键词：离子液体组氨酸标签分离纯化
- 组氨酸标签蛋白纯化介质的合成及应用被引量：2
- 2016年
- 以离子液体为萃取溶剂,将氮杂大环功能性配体与疏水性离子液体链接构建亲和性离子液体,通过氮杂大环螯合金属离子构成复合物;利用螯合的金属离子(Cu2+、Ni2+、Zn2+)对组氨酸标签特异的亲和性,对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化,结果表明:AIL螯合金属离子后才会对FITC-(His)6-OH产生亲和性。Cu-AIL亲和性最强,对于His-tag EGFP的选择性最差;Ni-AIL受限于其低的金属离子结合量,获得的目的蛋白最少;Zn-AIL能有效亲和His-tag EGFP,纯化效率相对最佳。结合以上不同亲和介质的特性,开发出利用Zn-AIL与Cu-AIL的二次纯化体系,获得纯度约90%的His-tag EGFP。
- 华伟伟徐维元黄建颖杨利军
- 关键词：螯合组氨酸标签蛋白质纯化
