江小龙
- 作品数：13 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 相关领域：化学工程医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 生产奎尼酸相关的大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用
- 本发明提供生产奎尼酸相关的大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用，包括生产3‑脱氢奎尼酸的重组大肠杆菌和生产奎尼酸的重组大肠杆菌，其在有氧条件下，均可以利用葡萄糖无机盐培养基进行发酵，降低了培养基成本，从而降低了3‑脱氢奎尼...
- 王钦宏陈五九江小龙彭彦峰张媛媛
- 生产多巴黄素大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用
- 本发明提供了高效全细胞催化生产多巴黄素和发酵法从头合成多巴黄素重组菌株。其通过对不同来源的4，5多巴双加氧酶进行评价进而得到多巴黄素合成效率高的酶。进一步的，将筛选到的高活性双加氧酶整合至左旋多巴高产菌株得到三株高产多巴...
- 王钦宏田立岩江小龙
- 原儿茶酸脱羧关键酶挖掘改造优化儿茶酚生物合成
- 2024年
- 儿茶酚(catechol,CA)是一种重要的化工和医药中间体,应用范围极为广泛。目前制备CA的方法是苯酚羟化法,但由于该方法存在对环境污染大、石化资源不可再生等问题,使得生物合成儿茶酚的方法逐渐受到关注。但受制于原儿茶酸脱羧酶的活性不够高且生物合成儿茶酚生产效率较低,难以满足大规模工业生产的要求。为了进一步提高儿茶酚生产效率,本研究首先对不同来源的21个原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)脱羧酶进行筛选,发现理研菌(Rikenellaceae)来源的RbAroY脱羧酶性能最好,含有该酶的全细胞生物催化剂ER11能够合成13.54 g/L儿茶酚。然后利用在线工具HotSpotWizard对该酶进行稳定性计算,选取自由能下降最多的10个潜在突变位点进行验证,发现含有突变子RbAroYG99A的全细胞生物催化剂ERT01能够催化合成15.16 g/L儿茶酚,较野生型产量提高12%。之后对生物催化条件进一步优化,以原儿茶酸为底物,全细胞生物催化剂ERT01能够催化合成25.70 g/L儿茶酚。最后,以3-脱氢莽草酸发酵液为底物,同时表达3-脱氢莽草酸脱水酶和原儿茶酸脱羧酶的全细胞生物催化剂DER03,催化合成29.55 g/L儿茶酚,为目前国内外报道的生物合成的最高产量。本研究为儿茶酚生物合成工业生产提供了重要参考。
- 田立岩李静江小龙江小龙路福平戴宗杰路福平王钦宏
- 关键词：生物合成全细胞催化儿茶酚
- 生产3-脱氢莽草酸的重组微生物、其构建方法及应用
- 本公开涉及生产3‑脱氢莽草酸的重组微生物、其构建方法及应用。具体的，本公开基于代谢组学分析与验证通过增强的或者降低/消失的特定酶活性和/或其编码基因的表达水平，以提升DHS生产菌株的生产性能。与此同时，本公开记载了通过启...
- 王钦宏宋国田陈五九江小龙吴凤礼彭彦峰张媛媛
- 一株生产原儿茶酸的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法与应用
- 本方法公开了一株生产原儿茶酸的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法与应用。其通过在产3‑脱氢莽草酸的大肠杆菌中表达3‑脱氢酶莽草酸脱水酶(aroZ)进而可生产原儿茶酸。该菌株可以利用葡萄糖无机盐培养基发酵生产原儿茶酸，降低了培...
- 王钦宏陈五九江小龙宋国田彭彦峰张媛媛
- 文献传递
- 生产3‑脱氢莽草酸大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用
- 本发明提供一种生产3‑脱氢莽草酸的大肠杆菌(Escherichia coli)重组菌株WJ004，其通过下调3‑脱氢酶莽草酸脱氢酶(aroE)的表达或不表达而降低3‑脱氢莽草酸脱氢酶酶活。该菌株可以在葡萄糖无机盐培养基中...
- 王钦宏陈五九江小龙彭彦峰
- 生产3-脱氢莽草酸的重组微生物及其构建方法与应用
- 本公开涉及生产3‑脱氢莽草酸(DHS)的重组微生物及其构建方法与应用。具体的，本公开涉及用于DHS生产的重组微生物，其具有增强的或者降低/消失的特定酶活性和/或其编码基因的表达水平。与此同时，本公开还进一步记载了利用前述...
- 王钦宏宋国田陈五九江小龙吴凤礼彭彦峰张媛媛
- 生产奎尼酸相关的大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用
- 本发明提供生产奎尼酸相关的大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用，包括生产3‑脱氢奎尼酸的重组大肠杆菌和生产奎尼酸的重组大肠杆菌，其在有氧条件下，均可以利用葡萄糖无机盐培养基进行发酵，降低了培养基成本，从而降低了3‑脱氢奎尼...
- 王钦宏陈五九江小龙彭彦峰张媛媛
- 文献传递
- 产顺,顺-粘康酸细胞工厂的构建与优化被引量：1
- 2016年
- 顺,顺-粘康酸是重要的平台化学品。目前,生物合成顺,顺-粘康酸还缺乏高性能菌株,已报道的主要工程菌株不仅需要诱导表达,遗传不稳定,而且发酵培养基组分复杂,不利于大规模工业化生产。构建能利用简单无机盐培养基、遗传稳定且不需要诱导表达的新型工程菌受到人们的关注。本研究在实验室前期构建的产三脱氢莽草酸工程菌株WJ060中,整合合成顺,顺-粘康酸的3个外源基因(aro Z、aro Y、cat A),并且利用3个不同强度的组成型启动子进行组合调控,成功构建了27株顺,顺-粘康酸工程菌,得到的最优工程菌MA30的产量达到1.7 g/L。为了进一步提高顺,顺-粘康酸工程菌的生产能力,利用基因组复制工程构建突变体库,结合高通量筛选方法,经过两轮筛选,成功筛选到了顺,顺-粘康酸产量提高超过8%的大肠杆菌MA30-G2。利用5 L发酵罐进行分批补料发酵,MA30-G2的顺,顺-粘康酸产量达到了11.5 g/L。本研究采用组合调控和高通量筛选相结合的策略不仅促进了顺,顺-粘康酸的生物合成,同时也为其他生物基化学品的生物制造提供了重要参考。
- 宋国田江小龙陈五九彭彦峰路福平王钦宏
- 关键词：大肠杆菌组成型启动子高通量筛选
- 一株生产原儿茶酸的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法与应用
- 本方法公开了一株生产原儿茶酸的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法与应用。其通过在产3‑脱氢莽草酸的大肠杆菌中表达3‑脱氢酶莽草酸脱水酶(aroZ)进而可生产原儿茶酸。该菌株可以利用葡萄糖无机盐培养基发酵生产原儿茶酸，降低了培...
- 王钦宏陈五九江小龙宋国田彭彦峰张媛媛
- 文献传递
