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王蕾: 作品数：12 被引量：5H指数：2; 供职机构：青海大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金青海省自然科学基金青海省科技厅应用基础研究项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学文化科学政治法律更多>>

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一种多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白多肽疫苗GLEP及其制备方法与应用: 本发明公开了一种多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白多肽疫苗GLEP及其制备方法与应用，疫苗GLEP的活性成分是一条多肽，主要由多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白多肽序列构成。通过基因合成技术合成多房棘球蚴疫苗GLEP基因序列，以及双酶切连接...; 李润乐汤锋华国勇格日力冯琳魏威王蕾; 文献传递

一种多房棘球蚴亮氨酰胺肽酶亚单位疫苗LAP及其制备方法与应用: 本发明公开了一种多房棘球蚴亮氨酰胺肽酶亚单位疫苗LAP及其制备方法与应用，亚单位疫苗LAP的活性成分是一条多肽，主要由多房棘球蚴抗原蛋白LAP氨基酸序列构成。本发明主要通过基因合成技术合成多房棘球蚴亚单位疫苗LAP基因序...; 嘎琴李润乐樊海宁格日力汤锋杨宝良郑佳冯琳王蕾胡缤文; 文献传递

多房棘球绦虫重组抗原蛋白14-3-3对小鼠继发性泡球蚴病的预防与治疗效果被引量：2: 2020年; 目的评价重组抗原蛋白14-3-3的免疫原性和其在多房棘球绦虫原头节继发性感染BALB/c小鼠模型中的预防及治疗效果。方法构建多房棘球绦虫重组抗原蛋白14-3-3的原核表达系统,经IPTG诱导和Ni^2+亲和层析法得到高纯度的14-3-3重组蛋白免疫BALB/c小鼠。用ELISA法检测免疫后小鼠血清中的抗体和细胞因子水平变化;在泡球坳小鼠继发性感染模型中观察囊泡数量和重量。结果成功表达并获取高纯度的多房棘球绦虫重组14-3-3抗原蛋白,免疫原性研究发现重组抗原蛋白14-3-3具有较好的免疫原性并激活小鼠产生Th1/Th2混合型免疫应答;在预防效果评价模型中,经14-3-3抗原免疫后,小鼠囊泡数量减少(59.84±15.09%),P=0.049,囊泡重量减轻(83.28±18.01%),P=0.049;在治疗效果评价模型中,经14-3-3抗原免疫后小鼠囊泡重量减轻(72.28±11.47%),P=0.006。结论多房棘球绦虫重组抗原蛋白14-3-3对继发性小鼠泡球坳病具有预防和治疗作用。; 魏威王蕾周培张颖李润乐李润乐; 关键词：多房棘球绦虫原核表达免疫

多房棘球蚴抗原亮氨酸氨基肽酶的原核表达纯化及酶活性分析被引量：1: 2020年; 目的构建多房棘球坳抗原亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)原核表达系统,并做纯化及最佳酶活性条件分析,为后续作用机制研究奠定基础。方法利用Optimum^TM Codon软件对LAP编码序列进行优化后合成目的基因,连接入表达载体pCzn1后转化入大肠杆菌BL-21菌株,在发酵过程中加入IPTG诱导目的蛋白表达后,通过Ni柱亲和纯化获得高纯度重组目的蛋白LAP。以亮氨酸对硝基苯胺(Leu-pNA)为底物测定LAP酶活性,观察酶活性的最适pH和温度,以及不同金属离子对其酶活性的影响。结果﹐基因测序和酶切鉴定显示pCzn1-LAP质粒构建成功,通过Ni柱亲和纯化得到一个大小约为57KD的蛋白。当pH为9.0、温度为60℃时LAP酶活性最强;金属离子对LAP酶活性影响的小大顺序为Co^2+>Zn^2+>Ca^2+>Mn^2+>Mg^2+>Ba>K^+。结论本研究成功构建LAP原核表达系统,表达和纯化了LAP蛋白,获得了酶活性最强时的基础条件,为研发抗寄生虫药物及探究LAP在多房棘球坳感染过程的作用机制奠定了基础。; 王蕾杨宝良魏威周培刘海生李润乐李润乐; 关键词：多房棘球蚴原核表达酶活性

多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶优势抗原表位的鉴定被引量：2: 2021年; 目的根据预测多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)抗原表位的结果,进一步鉴定其优势的T细胞和B细胞抗原表位。方法构建重组质粒pCzn1-LAP后进行蛋白原核表达与纯化,将纯化的LAP蛋白进行动物免疫后,利用脾脏淋巴细胞增殖、流式细胞术、ELISA pot、ELISA等方法鉴定优势抗原表位。最后,利用SWISS-MODEL软件对LAP蛋白3D结构建模,PyMOL软件对鉴定的LAP优势抗原表位分布进行准确定位。结果pCzn1-LAP菌株诱导表达的蛋白约为57 kDa,蛋白经过复性后成功纯化。流式细胞术鉴定的Th1型优势抗原表位为LAP 79-63、LAP 396-410和LAP 106-120;Th2型优势抗原表位为LAP 13-28、LAP 495-510和LAP 396-410。ELISA pot鉴定的Th1型优势抗原表位为LAP 396-410、LAP 504-518和LAP 106-120;Th2型优势抗原表位为LAP 504-518、LAP 313-328和LAP 396-410。BALB/c小鼠血清的抗原表位特异性ELISA筛选出的优势B表位结果为LAP 464-479、LAP 495-510和LAP 313-328。LAP蛋白3D结构建模成功,LAP优势抗原表位分布于表面居多。结论多房棘球蚴LAP蛋白优势T细胞和B细胞抗原表位鉴定成功,使得研制抗多房棘球蚴感染的多价表位疫苗成为可能。; 王蕾魏威周培刘海生杨宝良李润乐汤锋; 关键词：多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶抗原表位

多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶优势抗原表位鉴定及预防治疗效果评价: 目的分析多房棘球蚴抗原重组蛋白LAP酶活性，并评价其抗多房棘球蚴感染的效果（预防与治疗），以及鉴定优势抗原表位。方法1.LAP基因序列通过OptimumTMCodon软件进行优化后并合成，连接入表达载体pCzn1后制备大...; 王蕾; 关键词：多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶抗原表位; 文献传递

青海高校思想政治理论课有效性研究: 思想政治理论课有效性是检验思想政治理论课教学效果的重要指标,提升思想政治理论课有效性,在强化思想政治理论课育人功能和主渠道作用方面起着十分重要作用。青海作为西北的内陆性省份,经济发展相对落后,教育资源相对匮乏,少数民族人...; 王蕾; 关键词：青海高校思想政治理论课有效性; 文献传递

多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白抗原表位生物信息学预测: 2022年; 目的通过对多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白(Echinococcus multilocularis glucose transporter,EmGLUT)二级结构的分析,并结合在线工具来预测优势T细胞和B细胞抗原表位。方法从NCBI-Gen Bank库中获取EmGLUT基因的mRNA和氨基酸序列。二级结构特征预测使用SOPMA软件。使用IEDB、Syfpeithi软件分析T细胞优势抗原表位,使用Bcepred、ABCpred软件分析B细胞优势抗原表位。结果分析结果显示,在EmGLUT二级结构中α螺旋比例占51.08%,β折叠比例占17.88%,β转角比例占3.73%,无规则卷曲比例占27.31%。综合5个在线软件分析结果得出EmGLUT有10个T细胞优势抗原表位和18个B细胞优势抗原表位,其中5个同时具有T-B细胞双抗原表位。结论EmGLUT的优势T细胞和B细胞抗原表位被成功预测。; 王蕾魏威周培冯琳冯琳汤锋; 关键词：多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白抗原表位 B细胞

一种多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白多肽疫苗GLEP及其制备方法与应用: 本发明公开了一种多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白多肽疫苗GLEP及其制备方法与应用，疫苗GLEP的活性成分是一条多肽，主要由多房棘球蚴葡萄糖转运蛋白多肽序列构成。通过基因合成技术合成多房棘球蚴疫苗GLEP基因序列，以及双酶切连接...; 李润乐汤锋华国勇格日力冯琳魏威王蕾