王琪
- 作品数：36 被引量：56H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市博士后基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 微型腺病毒载体的扩增和纯化研究
- 2001年
- 微型腺病毒（ｍＡｄ）是去除所有编码基因，仅保留两侧反向末端重复序列（ＩＴＲ）及包装信号（Ψ）的新型腺病毒载体．它具有包装容量大，免疫原性小等优点．在大量扩增时，需与缺失Ｅ１区及包装信号的辅助腺病毒共转染入包装细胞（２９３细胞）内，ＣｓＣｌ超离心纯化，将二者分开．再通过琼脂糖覆盖挑斑、在包装细胞内大量扩增、ＣｓＣｌ超离心纯化等步骤，最终得到较为纯净的ｍＡｄ．但因ｍＡｄ结构不稳定，易与辅助病毒发生同源重组，在ＣｓＣｌ超离心时不能完全与辅助病毒分开，导致外源基因表达逐步下降．
- 邰艳红王飞王琪卢大儒郑尊薛京伦
- 关键词：扩增纯化病毒载体免疫原性
- 腺病毒载体介导胸苷激酶基因/ACV对大鼠脑胶质瘤的离体和活体杀伤作用
- 1998年
- 建立缺陷型重组腺病毒载体介导的胸苷激酶基因治疗系统（Adtk／ACV），进行离休和活体治疗大鼠C6脑胶质瘤研究．将质粒pAdtk与pJM17共转染腺病毒包装细胞──293细胞，同源重组后制备纯化的Adtk并以PCR证实；Adtk对离休C6细胞的杀伤作用随着Adtk滴度和ACV剂量增加而增强，并有旁观者效应，而未转染C6细胞和AdLacZ转染C6细胞均未被杀伤；扫描电镜下见Adtk／ACV处理的细胞呈明显病理改变；ACV可有效杀伤Adtk／C6细胞．在大鼠脑立体定向仪引导下于右额叶接种2×106个C6细胞，分别于第3，6，8和10天原位注射Adtk，同时腹腔注射ACV（100mg／（kg·d-1）），3d组、6d组、8d组大鼠成活期在90d以上，组织学检查未发现肿瘤细胞．10d组成活期（28．5±4．6）d，而C6未治疗组和AdLacZ／ACV治疗组成活期分别为（1．8±3．1）d和（14．0±2．2）d．本文建立的Adtk／ACV在离体和活体水平对大鼠C6脑胶质瘤有强烈的杀伤作用，效果确实，应用方便，ACV价格便宜，有潜在临床应用价值．
- 薛京伦王琪卢大儒邱信芳
- 关键词：腺病毒载体胸苷激酶基因
- 单纯疱疾病毒胸苷激酶基因的脑肿瘤基因治疗研究
- 1998年
- 单纯疱疾病毒胸苷激酶基因（HerpesSimplexVirus－ThymidineKinase，HSV－tk），配合核苷酸类似物（NAS）GCV或ACV的基因治疗是目前肿瘤基因治疗领域中一种较有希望的治疗方法．反转录病毒和腺病毒介导的HSV－tk／NAS肿瘤基因治疗系统的建立，并运用该系统进行脑胶质瘤、垂体瘤、黑色素瘤的基因治疗离体细胞和动物试验，取得了显著的肿瘤杀伤作用，特别是腺病毒介导的脑胶质瘤基因治疗动物试验效果很显著，能够完全消除肿瘤．同时，还建立了反转录病毒以及腺病毒HSV－tk基因治疗的安全性检测体系，为基因治疗的临床试验提供了安全性保证．
- 卢大儒王琪周彩红邱信芳薛京伦
- 关键词：HSV-TK脑肿瘤反转录病毒腺病毒基因治疗
- 子宫颈癌放疗中盆腔剂量均匀分布的方法探讨被引量：4
- 1989年
- 子宫颈癌放疗失败的原因之一是盆腔剂量分布不均匀,主要原因是子宫偏位或移位。由于子宫偏位及移位的发生率极高,治疗中又难以弥补这种缺点,直接影响其疗效及并发症的发生,因此如何达到盆腔剂量的合理分布是目前宫颈癌放疗中十分重要的课题,是提高疗效的关键。近年来采用高剂量率腔内后装治疗,使治疗时间从24小时减少至几分钟,为此纠正宫腔管偏位及移位。
- 蔡树模王香娥王琪高汝聶
- 关键词：宫颈癌子宫瘤放疗盆腔
- 凝血因子IX的体外检测方法研究被引量：1
- 1996年
- 凝血因子ＩＸ的检测是血友病Ｂ基因治疗研究中的重要工作，在实验室原有基础上，发展和完善了凝血因子ＩＸ在蛋白质水平上的检测系统，为基因治疗血友病Ｂ提供了更为直观可靠的依据．首先，建立了以鼠抗人ＦＩＸ单克隆抗体Ａ－７为一抗的检测活性ＦＩＸ蛋白量的ＥＬＩＳＡ法，为检测活性ＦＩＸ提供了快速简便的方法．其次，实现了用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测转染细胞培养液上清中ＦＩＸ，确证了体外培养的转有人ＦＩＸｃＤＮＡ的细胞表达有人ＦＩＸ蛋白．最后，用免疫组织化学方法，原位检测了转有人ＦＩＸｃＮＡ的细胞表达的ＦＩＸ蛋白，展现了在细胞水平上ＦＩＸ表达的直观图象．
- 施前卢大儒王琪王宏伟薛京伦邱信芳
- 关键词：血友病B凝血因子IX免疫组织学基因治疗
- 腺病毒载体中凝血因子Ⅸ基因表达的电镜检测
- ＜正＞人凝血因子Ⅸ基因（Human Coagulation Factor Ⅸ,hFIX）缺陷可导致遗传性出血性疾病,血友病 B,用基因治疗的方法有可能从基因水平上根本纠正 hFIX 的缺陷。替代或补充目前沿用的常规输血疗...
- 王琪卢大儒邱信芳薛京伦颜永碧郑尊
- 文献传递
- 腺病毒载体介导的人凝血因子 IX 基因的离体和活体表达
- 1998年
- 为血友病Ｂ的基因治疗探索了高效转移和表达载体，建立了重组腺病毒载体介导的基因转移系统（Ａｄｈｆｉｘ），并进行了离体和活体表达研究。结果显示：腺病毒离体基因转移效率可达９８％以上并可在多种细胞中高效表达，ｈＦＩＸ蛋白最高可达６．８６μｇ／１０６细胞／２４ｈｒ。小鼠血浆中ｈＦＩＸ蛋白含量最高可达１０７２ｎｇ／ｍｌ血浆，并可持续表达１０周左右；以腹腔注射效果最好；免疫抑制剂环磷酰胺可明显延长表达持续时间。结果表明重组腺病毒载体可介导ｈＦＩＸｃＤＮＡ在离体细胞和活体组织中高效转移和表达。
- 王琪卢大儒颜永碧颜永碧邱信芳
- 关键词：腺病毒载体凝血因子IX基因
- 反转录病毒介导基因转移治疗脑肿瘤的安全性研究 Ⅰ.具有复制能力野生型反转录病毒检测
- 1998年
- 目的：检测反转录病毒介导的脑肿瘤基因治疗过程中具有复制能力野生型反转录病毒（RCR）。方法：RCR检测主要方法有：DNA聚合酶链式反应（PCR），反转录PCR（RT／PCR），Southern杂交以及neo基因和lacZ基因的补救分析。结果：建立了RCR的检测系统，从DNA水平、RNA水平和病毒活体水平对产HSV－TK病毒包装细胞（TK／VPC），C6转TK基因细胞和实验动物血液可能存在的RCR野生型病毒进行检测，结果均没有检测到野生型反转录病毒。结论：采用的反转录病毒基因转移系统没有产生野生型病毒，为临床试验的安全进行提供了保证。
- 胡锦惠国桢潘玉君卢大儒王琪邱信芳薛京伦
- 关键词：野生型反转录病毒脑肿瘤
- 苯、甲苯、二甲苯的生殖及遗传毒性的研究进展被引量：7
- 1993年
- 苯、甲苯、二甲苯都是有机溶剂,在工业上应用广泛,在塑料、橡胶、油漆等行业中工人经常性接触,对其生殖发育的影响及其遗传毒性即基因突变和染色体畸变的研究正日益受到重视。通过应用细菌、培养的哺乳动物细胞。
- 王琪曾晓非蒋学之顾祖维王簃兰
- 关键词：苯甲苯二甲苯生殖毒性遗传毒性
- 蚕豆16S rRNA基因前导顺序的一级结构分析
- 1989年
- 通过测定蚕豆16S rRNA基因前导顺序的一级结构并和其它物种相应顺序的比较发现:(1)在蚕豆16S rRNA基因上游不存在F1和X蛋白基因;(2)蚕豆的F3的保守区域更接近于保守顺序;(3)蚕豆的F3的—10区3’端后更富含A-T核苷酸对;(4)油菜、烟草、玉米和菠菜的16s rRNA基因5’端上游能形成一个稳定的基环结构,而蚕豆则不能。我们由此认为蚕豆的rDNA启动子比油菜的要强,增加转录是一个担负起两个rDNA拷贝功能的原因之一。
- 高家国汪训明王琪谈家桢
- 关键词：蚕豆RNA基因
