李芳
- 作品数：24 被引量：111H指数：6
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 犬转铁蛋白受体基因的沉默及稳定感染细胞系的建立
- 2016年
- 目的通过构建沉默犬转铁蛋白受体(TfR)基因慢病毒载体并感染Walter Reed犬(WRD)细胞,建立稳定感染沉默犬TfR基因的细胞系。方法构建2条针对犬TfR基因的特异性短发夹RNA(shRNA),用慢病毒载体转染HEK293T细胞,包装、收集病毒并测定其滴度。用包装好的慢病毒感染WRD细胞,用实时荧光定量PCR和Western blot法检测TfR的mRNA和蛋白的表达水平以评价干扰效率,筛选沉默效果较好的靶点,并建立稳定沉默TfR基因的WRD/TfR-细胞系。结果成功构建出TfR小干涉RNA慢病毒载体,成功包装2种不同靶点的沉默TfR基因的RNA干扰慢病毒,测定其病毒滴度均达到1×108转导单位(TU)/m L。选用沉默效果较好的p GMLV-TfR A2载体,建立TfR小干涉RNA慢病毒载体稳定感染的WRD/TfR-细胞系。结论成功构建TfR小干涉RNA慢病毒载体并建立了稳定感染WRD/TfR-细胞系。
- 白鲁根李芳张薇闫琰朱燕妮孙玉宁
- 关键词：TFRRNA干扰慢病毒载体
- 布地奈德福莫特罗吸入治疗咳嗽变异性哮喘疗效观察被引量：7
- 2010年
- 杨艳娟郑西卫李芳张鹏陈芳王绍金
- 关键词：哮喘咳嗽布地奈德
- 枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1表达并降低MMP-9及HIF-1α表达被引量：7
- 2016年
- 目的监测在缺氧条件下进行枸杞多糖处理后肺血管平滑肌细胞中沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达。方法血管平滑肌细胞分为常氧(200 m L/L O2)培养的正常细胞、2μmol/m L枸杞多糖处理的常氧细胞、DMSO处理的常氧细胞、DMSO处理的缺氧(100 m L/L O2)细胞、(0.5、1、2)μmol/m L枸杞多糖处理的缺氧细胞、SIRT1的特异性激动剂10μmol/L白芦藜醇处理的缺氧细胞、非特异性激动剂1μmol/L SRT-1720处理的缺氧细胞、SIRT1抑制剂0.5μmol/L EX-527处理的缺氧细胞,培养于6、12、24 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测SIRT1、MMP-9及HIF-1α的mRNA和蛋白表达;在缺氧的血管平滑肌细胞中加入枸杞多糖处理12 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测血管平滑肌细胞中SIRT1、MMP-9及HIF-1α的表达。结果缺氧条件下血管平滑肌细胞SIRT1mRNA和蛋白水平降低,MMP-9及HIF-1αmRNA和蛋白水平升高。缺氧条件下用枸杞多糖处理后,SIRT1的含量随枸杞多糖剂量的增加而增加,同时MMP-9、HIF-1α的含量降低。SIRT1的特异性激动剂白藜芦醇可抑制MMP-9的表达。结论枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1水平、降低MMP-9及HIF-1α的水平。
- 朱燕妮孙玉宁关文霞闫琰张薇白鲁根孔海涛李芳
- 关键词：枸杞多糖肺动脉平滑肌细胞
- 吸入噻托溴铵治疗慢性阻塞性肺疾病40例肺功能观察被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨吸入噻托溴铵治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)的疗效。方法:将80例稳定期COPD患者随机分为两组,对照组仅给予常规治疗;治疗组在常规治疗的基础上加吸噻托溴铵。分别于治疗前、治疗3月后测定两组患者的肺功能,观察两组患者肺功能和临床症状的改善情况。结果:治疗组FEV1%、FEV1、PEF、FEV1/FVC、V50、V25、Raw较治疗前明显改善(P<0.05);肺功能及临床症状改善明显好于对照组(P<0.05)。结论:COPD患者吸入噻托溴铵可明显改善肺功能和临床症状。
- 杨艳娟郑西卫李芳张鹏王绍金
- 关键词：呼吸功能试验呼吸疗法
- Sirt-1和Hif-1α在慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中的表达及其意义被引量：10
- 2015年
- 目的:检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中沉默信息调节子(Sirt-1)和缺氧诱导因子1α(Hif-1α)的表达,探讨Sirt-1和Hif-1α的表达在COPD发生发展中的作用。方法:应用肺功能仪对COPD急性加重期组(n=20)、COPD稳定期组(n=22)和对照组(n=20)的研究对象进行肺功能指标测定,采用Real-time PCR和Western blotting法检测3组研究对象PBMCs中Sirt-1和Hif-1αmRNA和蛋白表达,并分析Sirt-1和Hif-1α表达水平与肺功能的关系。结果:与对照组比较,COPD急性加重期组、COPD稳定期组患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV1/FVC%)均降低(P<0.05);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期组患者FEV1%和FEV1/FVC%降低(P<0.05)。COPD急性加重期组、COPD稳定期组患者PBMCs中Sirt-1mRNA和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05或P<0.01);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期患者PBMCs中Sirt-1mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01);与对照组比较,COPD患者Hif-1αmRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),COPD急性加重期患者其表达水平升高更明显(P<0.01);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期组患者PBMSCs中Hif-1αmRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。Pearson直线相关法分析,Sirt-1mRNA(蛋白)表达水平与患者FEV1%(rmRNA=0.61,r蛋白=0.545)和FEV1/FVC%(rmRNA=0.513,r蛋白=0.491)呈正相关关系,Hif-1αmRNA(蛋白)表达水平与FEV1%(rmRNA=-0.812,r蛋白=-0.781)和FEV1/FVC%(rmRNA=-0.661,r蛋白=-0.674)呈负相关关系(P<0.05)。结论:COPD患者PBMCs中Sirt-1基因表达水平下降,Hif-1α基因表达水平上调,二者的表达变化可能与COPD的发生发展密切相关。
- 李芳关文霞任飞仝雪霞孙玉宁
- 关键词：缺氧诱导因子1慢性阻塞性肺疾病外周血单个核细胞
- 慢性低氧及枸杞多糖干预对大鼠生理指标和血浆IL-2、IL-6及IgG含量的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察慢性低氧和枸杞多糖干预对大鼠生理指标及免疫因子的影响。方法雄性SD大鼠随机分为对照组、低氧组和低氧/枸杞多糖组。低氧处理为常压低氧舱,氧浓度设定为10.0%;枸杞多糖干预为200mg·(kg·d)-1。各种干预均持续4周。结果与对照组比较,低氧和低氧/枸杞多糖组从实验第2周开始体重明显下降(P<0.05或<0.01);低氧组血红蛋白含量高于对照组(P<0.01),低氧/枸杞多糖组血红蛋白含量低于低氧组(P<0.05);低氧组血浆Ig G、IL-2含量明显低于对照组(P<0.01),IL-6含量高于对照组(P<0.01);低氧/枸杞多糖组血浆Ig G、IL-2含量高于低氧组(P<0.05或<0.01),IL-6含量低于低氧组(P<0.01)。三组间红细胞、白细胞、血小板差异均无统计学意义(P>0.05)。结论枸杞多糖能够改善低氧大鼠的基本状况,调节其免疫功能。
- 关文霞仝雪霞任飞李建宁郑西卫李芳
- 关键词：低氧枸杞多糖生理指标免疫因子
- 急性冠脉综合征患者GRACE评分与N末端脑钠肽前体水平的相关性研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨急性冠脉综合征(ACS)患者N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)与冠脉病变全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)风险评分的相关性研究。方法选择137例ACS患者纳入ACS组,另选取经冠状动脉造影术后排除冠心病的老年患者89例作为对照组。入院24h内测定患者血浆NT-pro BNP,1周内行冠脉动脉造影术。采用GRACE评分标准对ACS组患者进行危险分层,分为低危组(53例)、中危组(44例)和高危组(40例)3个亚组。分析ACS患者血浆NT-pro BNP水平与GRACE评分的相关性及临床意义。结果与对照组相比,ACS患者NT-pro BNP水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);ACS患者GRACE评分均高于正常组(P<0.01)。血浆NT-pro BNP水平与GRACE评分呈正相关关系(r=0.323,P<0.01))。结论NT-pro BNP水平与GRACE评分呈正相关,可用于对ACS患者的危险分层。
- 李溪仇玉民刘志军李芳刘慧马列姜晓
- 关键词：N末端脑钠肽前体急性冠脉综合征风险评估
- 慢病毒介导的犬WRD细胞p53基因沉默及稳定感染细胞系的建立被引量：2
- 2014年
- 目的构建靶向犬p53基因慢病毒干扰载体,建立稳定沉默p53基因的WRD/p53-细胞系。方法设计并构建4条针对犬p53基因的特异性shRNA干扰质粒。将构建的慢病毒表达载体(p GMLV-p53)和包装质粒(packaging mix)组成的包装系统共转染293T细胞,包装病毒,收集病毒原液,超滤浓缩,并测定滴度。包装好的慢病毒感染WRD细胞,Western blot和实时荧光定量PCR方法检测不同靶点RNA干扰载体对p53基因的干扰效果,确定有效靶点。针对有效靶点慢病毒颗粒以最适感染复数(multiplicity of infection,MOI)感染WRD细胞,puromycin抗生素筛选稳定感染细胞系WRD/p53-。结果结果显示p53 RNAi慢病毒载体构建成功,成功包装四种不同靶点的p53基因RNA干扰慢病毒,病毒滴度均达到1×109TU/ml。四种干扰载体慢病毒均具有较好的干扰效果,选用沉默效果最好的p GMLV-p53A1为最优靶点,成功建立p53 RNAi慢病毒载体稳定感染细胞系WRD/p53-。结论成功构建p53 RNAi慢病毒载体,并有效干扰WRD细胞中p53 mRNA和蛋白表达,同时成功筛选并建立p53RNAi慢病毒稳定感染WRD/p53-细胞系。
- 李芳闫琰张茜李建宁姚青高玉婧杨怡孙玉宁
- 关键词：P53慢病毒载体P53
- 低氧性肺动脉高压大鼠肺内凝血酶敏感蛋白-1的表达被引量：6
- 2012年
- 目的了解低氧肺动脉高压时肺内凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)与肺血管重建的关系。方法将30只雄性Wistar大鼠分为正常对照组和低氧肺动脉高压组,肺动脉高压组以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型,以微导管法测定各组大鼠肺动脉压,采用免疫组化法检测各组大鼠肺内TSP-1和TGF-β1的表达,对肺组织切片进行图像分析。结果低氧3周后,低氧肺动脉高压组大鼠形成明显的肺动脉高压,管壁增厚和管腔狭窄,大鼠肺动脉压(2.86±0.39)kPa,右心室肥厚指数〔右心室(RV)/左心室+室间隔(LV+S)〕为(43.53±3.38)%,管壁厚度占外径的百分比(WT%)为(35.24±11.2)%,管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)为(55.09±12.38)%,分别与正常对照组〔(1.35±0.28)kPa、(23.68±3.48)%、(23.63±9.74)%和(41.62±12.83)%〕相比升高(P<0.01);肺小动脉TSP-1免疫阳性染色灰度值在低氧肺动脉高压组大鼠为1.32±0.04,与正常对照组(0.96±0.03)相比增强(P<0.01),低氧肺动脉高压组大鼠TGF-β1免疫阳性染色灰度值为1.38±0.05,与正常对照组(1.04±0.04)相比增强(P<0.01)。结论低氧所致TSP-1的合成增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用,其作用可能与活化TGF-β1有关。
- 杨艳娟程德云郑西卫李芳杨桂兰
- 关键词：低氧肺动脉高压肺血管重建凝血酶敏感蛋白-1
- 肺癌患者伴肺部感染的临床分析被引量：5
- 2010年
- 目的探讨肺癌患者伴肺部感染的临床研究。方法对2004-2007年68例肺癌伴肺部感染患者病原学和临床特征进行回顾性研究。结果年龄≥60岁和接受放化疗的患者肺炎发生率较高,鳞癌(47.1%)感染构成比高于腺癌(26.5%)和小细胞癌(14.7%);分离病原菌76株,革兰阴性菌占59.2%,肺炎克雷伯氏菌、不动杆菌属、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌居前5位;真菌占10.5%;肺炎克雷伯氏菌、不动杆菌属、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌出现高比例、多药耐药。结论肺癌伴肺部感染与患者年龄、性别、放化疗以及基础疾病、临床分期密切相关,病原菌以革兰阴性杆菌为主,且存在多药耐药;应根据药敏结果选择抗菌药物,同时加强支持和综合治疗,有益于病人康复。
- 谷文龙尹莉李芳
- 关键词：肺肿瘤病原菌谱肺部感染
