程志祥
- 作品数：17 被引量：51H指数：5
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- ICP患者蜕膜NK细胞表型及杀伤活性的研究
- 2008年
- 目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者蜕膜自然杀伤(NK)细胞的数量、表型特征及杀伤活性,探讨其在ICP发病中的作用。方法选取确定ICP患者15例,正常晚期妊娠妇女15例,用流式细胞仪检测两组蜕膜组织中NK细胞数量及表型,用LDH法测定NK细胞杀伤活性。结果①正常晚期妊娠蜕膜组织中CD56+CD3-NK细胞占蜕膜单个核细胞(DMC)7.82%±3.3%,ICP患者蜕膜中CD56+CD3-NK细胞含量为38.15%±5.1%(P<0.05);②正常晚期妊娠蜕膜组织中CD56+CD16-、CD56+CD16+NK亚群含量明显低于ICP组,差异有显著性(P<0.05);③ICP组蜕膜组织中NK细胞杀伤活性高于正常晚期妊娠蜕膜组,差异有显著性(P<0.05)。结论NK细胞是妊娠晚期蜕膜组织中的主要淋巴细胞,其亚群失衡及功能异常可能是ICP发病的重要原因。
- 肖敏凌斌周颖赵卫东冯定庆高宗侠程志祥
- 关键词：蜕膜流式细胞术妊娠并发症
- 荧光定量PCR检测宫颈癌旁盆腔组织中HPV-DNA的临床意义被引量：5
- 2007年
- 目的探讨FQ-PCR检测宫颈癌旁盆腔组织中HPV-DNA对预测早期宫颈癌微小转移的意义。方法采用FQ-PCR方法,检测31例Ia-IIb期宫颈癌患者的原发灶及其癌旁组织(阴道切缘、宫旁切缘、盆腔淋巴结)中的HPV亚型和DNA拷贝数,并与患者术后组织病理学结果比较。结果31例癌旁组织HPV-DNA总检出率为58.1%,其中病理检测发生癌旁转移的7例患者均检测到HPV-DNA。宫颈原发灶、组织病理学阳性和阴性的癌旁组织HPV-DNA拷贝数分别为106.75±0.72,105.70±0.87和103.70±1.22,且它们之间有非常显著性差异(P<0.01)。结论癌旁组织检出HPV早于组织病理学发现转移,检测癌旁组织中HPV对早期微小转移具有提示意义,有助于发现组织病理学不易发现的早期隐匿性转移。
- 高宗侠凌斌周颖吴大保肖敏程志祥高婷沈国栋
- 关键词：人乳头瘤状病毒荧光定量聚合酶链反应微转移
- siRNA靶向EDAG-1基因对K562细胞株生长的影响被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:胚胎发育相关基因-1(EDAG-1)是造血系统发育相关的新基因,定位于9q22。本研究探讨抑制EDAG-1基因的表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法:将靶向EDAG-1基因的特异序列连接到逆转录病毒载体中,脂质体介导的重组质粒转染包装病毒细胞(PT67),收集细胞上清感染K562细胞株,经嘌呤霉素筛选稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株,RT-PCR检测EDAG-1基因的抑制情况,应用MTT、流式细胞仪检测转染细胞的增殖能力及细胞周期。结果:成功构建了靶向EDAG-1基因的逆转录病毒重组质粒,建立了抑制EDAG-1基因表达的K562细胞株。抑制EDAG-1基因表达的细胞株增殖速度、增殖指数(PI)、增殖活性(SPF)相应降低,其G0/G1期细胞比例明显升高。结论:EDAG-1基因的沉默可以抑制白血病细胞株的增殖,使其阻滞在G0/G1期,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。
- 周颖凌斌程勇朱园园冯定庆沈国栋程志祥
- 关键词：EDAG-1RNA干扰白血病细胞周期
- 人胎盘滋养层细胞的分离和鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的:体外分离足月妊娠胎盘滋养层细胞,观察其形态学特点,检测人类白细胞抗原-E(HLA-E)在滋养层细胞的表达情况。方法:采用0.25%胰酶和胶原酶I联合消化法及Percoll密度梯度分离法分离人足月妊娠胎盘组织中滋养层细胞,光学显微镜观察分离出的细胞形态,透射电镜观察分离出的细胞超微结构;RT-PCR技术检测分离出的滋养层细胞HLA-E的表达。结果:光学显微镜下初分离的细胞呈大圆形,以单个核为主;透射电镜下可见细胞表面的微绒毛丰富,胞质丰富,内质网扩张明显,有丰富的糖原颗粒、髓样小体和明显的脂滴。在分离的细胞上检测到HLA-E的表达。结论:采用胰酶和胶原酶I联合消化及Percoll密度梯度分离法可获得高纯度的滋养细胞,在透射电镜下可见到超微结构,同时检测到滋养层细胞上表达HLA-E。
- 肖敏凌斌姚凤球周颖陈峥峥程志祥高宗侠沈国栋
- 关键词：滋养层细胞纯化人类白细胞抗原-E
- 血清催乳激素与抗心磷脂抗体联合检测在子宫内膜异位症诊断中的应用被引量：5
- 2007年
- 目的探讨联合检测催乳激素(PRL)和抗心磷脂抗体(ACA)在子宫内膜异位症(EMS)诊断中的应用价值。方法将90例EMS患者按美国生育学会(AFS)修正的分期法分为轻度组(Ⅰ/Ⅱ期)41例和重度组(Ⅲ/Ⅳ期)49例,以10例正常生育年龄妇女做为对照组。采用时间分辨荧光免疫法检测血清PRL,ELISA法检测血清ACA。结果(1)EMS轻度组和重度组血清PRL水平及ACA阳性率分别为(642.60±419.69)u/ml、(647.97±289.76)u/ml和63.4%、71.4%,差异无统计学意义(P>0.05),但均明显高于健康对照组(P<0.05)。(2)轻度组血清ACA阳性率34.1%,显著高于重度组和对照组(P<0.05)。结论联合检测血清PRL和ACA,有助于EMS的诊断和分期。
- 高宗侠凌斌吴大保姚凤球程志祥肖敏冯定庆高婷雷蕾
- 关键词：子宫内膜异位症催乳素抗体抗心脂
- HER2/neu基因与肿瘤治疗
- 2007年
- 程志祥祝怀平
- 关键词：HER2/NEU基因肿瘤治疗神经母细胞瘤DNA
- 靶向Her2基因SiRNA对人卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂敏感性的影响被引量：5
- 2007年
- 目的通过siRNA沉默Her2基因的表达探讨其对卵巢癌细胞株SKOV-3顺铂(DDP)敏感性的影响。方法靶向Her2的siRNA通过阳离子脂质体介导转染到SKOV-3中,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her2基因表达的SK-OV-3细胞株,通过RT-PCR方法检测各组SKOV-3细胞Her2基因的表达。应用四甲基偶氮唑蓝检测DDP对各组SKOV-3细胞增殖水平的影响,应用膜联蛋白V异-硫氰酸荧光素细胞凋亡试剂盒在流式细胞仪上检测DDP作用后各组SKOV-3细胞凋亡水平。结果建立了稳定抑制Her2基因表达的细胞株,SKOV3/siRNA-1组和SKOV3/siRNA-2组细胞Her2基因表达分别为对照组的53.8%和38.4%,而空载体组为92.3%。在DDP作用下SKOV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2的细胞存活率在4 d时分别为67.7%±4.4%和66.4%±3.3%,与未转染对照组81.7%±1.3%和空载体组81.3%±1.4%比较差异有显著性(P<0.05)。FCM分析显示SK-OV3/siRNA-1和SKOV3/siRNA-2细胞的DDP诱导凋亡率分别为38.6%±1.1%和42.8%±1.4%,明显高于未转染组9.1%±0.8%和空载体组8.8%±0.7%,差异有显著性(P<0.05)。结论靶向Her2基因的siRNA可以增强卵巢癌细胞株SKOV-3对DDP的敏感性。
- 程志祥周颖朱园园肖敏高宗侠祝怀平凌斌
- 关键词：基因,ERBB-2顺铂
- 抑制Her-2基因的表达增强NK-92细胞对SKOV3细胞的杀伤活性
- 目的:探讨抑制Her-2基因的表达对NK-92细胞杀伤SKOV3细胞活性的影响。方法:Her-2 siR- NA质粒在脂质体介导下转染到包装病毒细胞株PT67中,将病毒上清转染SKOV3,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制He...
- 周颖凌斌姚凤球沈国栋冯定庆陈峥峥程志祥祝怀平
- 文献传递
- C-erbB-2特异性siRNA逆转录病毒载体的构建与鉴定
- 2006年
- 目的构建并鉴定C-erbB-2特异性siRNA逆转录病毒载体。方法体外合成含针对C-erbB-2特异基因序列的寡核苷酸,并定向克隆入逆转录病毒载体RNAi-ReadypSIREN-RetroQ。结果构建的重组逆转录病毒载体可以被限制性内切酶MIuI、BamHI、EcoRI切开,电泳可显示相应条带,经测序其序列与设计的一致。结论成功构建了C-erbB-2特异性siRNA逆转录病毒载体pRetroQ/C-erbB-2/siRNA-1、pRetroQ/C-erbB-2/siRNA-2、pSIREN-RetroQ/C-erbB-2/siR-NA-3,为进一步研究p185基因沉默奠定了基础。
- 陈敏祝怀平凌斌周颖朱园园高婷程志祥沈国栋赵卫东冯定庆
- 关键词：C-ERBB-2RNA干扰逆转录病毒载体
- ICP患者外周血单个核细胞Th1及Th2细胞变化被引量：5
- 2007年
- 目的研究妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者Th1和Th2型细胞免疫反应的变化,从免疫学角度探讨ICP发病机制。方法采用流式细胞术,分别检测了20例重度ICP患者与20例正常晚期妊娠妇女的外周血单个核细胞和T细胞中Th1和Th2细胞所占的比例。结果重度ICP组外周血单个核细胞中IFN-γ+细胞比例为17.82%±3.43%,明显高于正常晚期妊娠组12.66%±2.34%(P<0.01),而IL-4所占的比例为1.17%±0.26%,低于正常晚期妊娠组1.37%±0.30%,差异有显著性(P<0.05);重度ICP组PB-MC中细胞因子Th1/Th2比率为16.00±4.66,显著高于正常晚期妊娠组9.89±2.82(P<0.01);重度ICP组外周血中T细胞分泌的Th1细胞比例为14.37%±1.38%,明显高于正常晚期妊娠组10.66%±1.18%(P<0.01),而Th2细胞比例1.05%±0.19%,低于正常晚期妊娠组1.24%±0.29%,差异有显著性(P<0.01);重度ICP组T细胞Th1/Th2比率为13.99±2.46,显著高于正常晚期妊娠组8.94±1.84(P<0.01)。结论重度ICP患者与正常晚期妊娠妇女比较,其体内表现为Th1型免疫反应增强,而Th2型免疫反应减弱。体内Th1/Th2细胞平衡紊乱可能与妊娠期肝内胆汁淤积症发生相关。
- 肖敏凌斌姚风球周颖赵卫东陈铮铮程志祥沈国栋高宗侠
- 关键词：TH1细胞TH2细胞
