王宇学
- 作品数：19 被引量：52H指数：4
- 供职机构：湖北中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- HLA-DR_α基因片段TA克隆载体的构建被引量：1
- 2005年
- 目的 应用TA克隆技术构建含HLA-DRα基因的载体,作为实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测 HLA-DRα基因的标准模板。方法 利用RT-FCR法,从提取的外周血单核细胞总RNA中特异地扩增含635bp的HLA- DRαcDNA片段,并将其克隆到TA载体。结果 用限制性内切酶法和测序方法证实扩增片段为目的片段。结论 成功地构建了 HLA-DRα基因片段TA克隆载体。为实时荧光定量RT-PCR法检测HLA-DRαmRNA表达提供标准模板。
- 宁勇姚彩萍王宇学
- 关键词：反转录聚合酶链反应限制性内切酶
- 人肿瘤坏死因子真核表达探讨
- 2006年
- 目的:研究人肿瘤坏死因子真核表达。方法:重组质粒(pORB2TNF-α)和线性杆状病毒(AcNPV)共转染昆虫细胞系(sf21),裂解转染细胞,ELISA方法蛋白定位,裂解物电泳评价杆状病毒重组体(AcNPV-pORB2TNF-α)表达蛋白;用6χHis标签纯化蛋白,纯化蛋白进行蛋白印迹(Westernblot)。结果:转染细胞表达蛋白为可溶蛋白;转染AcNPV-pORB2TNF-α细胞裂解物电泳见35kDXylE蛋白条带;纯化蛋白电泳可见17kD蛋白条带并且Westernblot呈阳性。结论:用构建人肿瘤坏死因子杆状病毒重组体,成功表达TNF-α蛋白。
- 王宇学陈晓徐锐锋
- 关键词：肿瘤坏死因子杆状病毒蛋白质印迹
- 血管活性肽在冠状动脉粥样硬化诊疗中的作用
- 2021年
- 动脉粥样硬化是一种起源于血管内皮细胞的炎症反应。冠状动脉疾病(CAD)是最常见的动脉粥样硬化表现,早期诊断便于临床采取预防措施和更有效的治疗方法,降低急性冠状动脉综合征的发病风险。脂质和葡萄糖被认为是CAD的经典风险因子;另外临床已将心肌肌钙蛋白I和T、B型利钠肽、D-二聚体和C-反应性蛋白质(CRP)作为评价CAD的指标。这些潜在的生物标志物在心血管医学领域已得到了广泛的评价,然而显示出显著的诊断和/或治疗效果的标志物数量有限。
- 张欢王宇学
- 关键词：血管活性肽B型利钠肽动脉粥样硬化心肌肌钙蛋白I心血管医学血管内皮细胞
- LPS诱导小鼠肺微血管内皮细胞VEGF表达的探讨被引量：2
- 2005年
- 目的:研究小鼠肺微血管内皮细胞分离培养方法并探讨脂多糖(LPS)诱导小鼠肺微血管内皮细胞血管 内皮生长因子(VEGF)表达。方法:贴块法培养小鼠肺微血管内皮细胞,并进行系列鉴定。采用ELISA方法检测 正常组、LPS(1μg/ml)作用2、8、16、24、36、48h组的VEGF变化水平。结果:获得的小鼠肺微血管内皮细胞具有鹅 卵石形态,但LPS对小鼠肺微血管内皮细胞形态影响明显。对异植物血凝素结合试验,CD3l及Ⅷ因子抗原免疫组 化染色为阳性。LPS(1μg/ml)分别作用小鼠肺微血管内皮细胞2h组可见VEGF表达升高,8h组达最高,16、24、 36、48h组的表达量低于8h组。结论:LPS作用后,小鼠肺微血管内皮细胞VEGF表达呈抛物线型下降。LPS损 伤内皮细胞功能和形态。
- 宁勇曹淑彦王宇学
- 关键词：脂多糖小鼠肺微血管内皮细胞
- 牛膝多糖诱导单核细胞HLA-DR_αmRNA表达的实验研究被引量：7
- 2005年
- 目的:研究单核细胞的分离培养并检测牛膝多糖(ABPS)诱导单核细胞HLA-DRαmRNA的表达变化。 方法:采集健康成人的血液,肝素抗凝,用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,用贴壁法分离 单核细胞。接种细胞到24孔板,同一时间不同ABPS浓度或同一浓度ABPS不同时间37℃、5%CO2培养。RT PCR检测HLA-DRαmRNA表达水平并且进行PCR产物验证。结果:(1)鉴定单核细胞:在PBMC中,流式细胞术 检测到CD14阳性细胞占12.0%,黏附得到的单核细胞中,流式细胞术检测到CD14阳性细胞占83.1%。(2)同一 时间不同浓度ABPS上调HLA-DRαmRNA表达。(3)不同时间同一浓度ABPS上调HLA-DRαmRNA表达。(4) 引物序列和产物序列分别进行BLAST表明PCR产物为NM_019111。结论:在体外,ABPS上调单核细胞HLA -DRαmRNA,有显著的剂量和时间效应关系。提示ABPS能激活单核细胞并有增强免疫功能。
- 王宇学宁勇曹淑彦
- 关键词：牛膝多糖单核细胞逆转录-聚合酶链反应
- 妇科炎症患者宫颈分泌物发酵支原体和穿透支原体的检测
- 2007年
- 目的探讨3种难培养支原体(发酵支原体,Mf;穿透支原体,Mpe;梨支原体,Mpi)的临床检测方法,同时了解其在温州地区妇科炎症患者中的感染情况。方法采集妇科炎症患者和正常女性(各280例)的宫颈管分泌物,接种于SP-4培养液培养。阳性培养物应用套式聚合酶链反应(nPCR)和DNA测序等方法加以鉴定。结果280例患者的宫颈分泌物中分离到8株Mf(2.86%)、7株Mpe(2.50%),而280例正常女性未分离到相应菌株。nPCR检测结果与之相符,阳性菌株经测序确认。结论培养液分离培养法结合nPCR技术,准确、较快速,是进行艾滋病(AIDS)相关支原体分离鉴定较可靠实用的方法。温州地区妇科炎症患者存在Mf、Mpe感染,在临床诊治中应予关注。
- 曹淑彦周丽萍姚群峰王宇学王忠永
- 关键词：聚合酶链反应发酵支原体穿透支原体
- 牛膝根多糖上调单核细胞免疫功能实验被引量：3
- 2005年
- 目的:研究牛膝根多糖(ABPS)在体外对单核细胞活性的调节及诱导单核细胞HLA-DRα表面分子的表达。方法:贴壁法分离培养外周血单核细胞并进行鉴定。ABPS诱导单核细胞后,用电镜技术、中性红实验、四甲基偶氮唑盐(MTT)法分别检测单核细胞超微结构、吞噬能力、增殖的改变;并且用流式细胞术检测单核细胞HLA-DRα表面分子表达水平。结果:ABPS能诱导单核细胞胞浆溶酶体和胞浆量增多、吞噬能力增强,但没有增殖能力;同时上调单核细胞HLA-DRα表面分子的表达。结论:ABPS能增强单核细胞活性,上调单核细胞HLA-DRα表面分子的表达,提示ABPS有增强单核细胞的抗原呈递功能。
- 王宇学曹淑彦姚雅萱
- 关键词：单核细胞牛膝多糖流式细胞术
- 超声微泡造影剂传送TFPI-2抑制动脉血栓和狭窄
- 动脉粥样硬化是一种多因素慢性炎症反应疾病。动脉内血栓和狭窄是动脉粥样硬化的特征。目前没有一个治疗动脉粥样硬化的理想方法。动脉粥样硬化的基因治疗已经被广泛研究，但临床应用没有开展。组织因子（TF）是一个穿膜蛋白，在体内启动...
- 王宇学
- 关键词：超声微泡造影剂动脉粥样硬化
- 文献传递
- 引起幼儿腹泻的腺病毒的实验室诊断被引量：4
- 2005年
- 目的 研究引起幼儿腹泻的腺病毒的型别。方法 取因腹泻住院的幼儿粪便标本,经PCR检测为腺病毒F组( Ad4 0或Ad4 1)阳性后,用2 93细胞分离病毒并培养,当细胞发生典型病变效应,刮下细胞备用:( 1)固定,送电镜室检测;( 2 )按照湖北中医学院检验系实验室常用的方法提取病毒DNA。用Sma I和Hind III 2种限制性核酸内切酶消化腺病毒DNA并与文献报道的Ad4 0和Ad4 1的酶切图谱比较。结果 5例阳性标本的PCR产物的大小是5 19bp.电镜可见细胞核内腺病毒晶格状排列;并且Sma I和Hind III的酶切图与文献报道的Ad4 1图谱一致。
- 王宇学宁勇曹淑彦
- 关键词：腺病毒腹泻限制性核酸内切酶病毒DNAPCR产物消化腺
- 枸杞多糖对外周血单核细胞激活作用被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨枸杞多糖对外周血单核细胞是否具有激活作用。方法:贴壁法分离培养外周血单核细胞并进行鉴定。应用中性红实验检测枸杞多糖对单核细胞吞噬作用;用非特异性酯酶染色及电镜技术检测枸杞多糖诱导单核细胞内溶酶体的改变;用0.312,1.250,5.000g.L-1枸杞多糖对体外培养的外周血单核细胞进行诱导培养12h,ELISA法测定单核细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达。结果:枸杞多糖能增强单核细胞的吞噬作用,增加单核细胞胞质内溶酶体量,显著诱导单核细胞表达TNF-α和IL-6。结论:枸杞多糖对单核细胞具有激活作用。
- 曹淑彦王宇学
- 关键词：枸杞多糖单核细胞
