齐宗利
- 作品数：14 被引量：50H指数：5
- 供职机构：陕西省人民医院更多>>
- 发文基金：陕西省科学技术研究发展计划项目西安市科技计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- MDCK细胞在流感病毒单克隆抗体鉴定中的应用
- 2013年
- 目的尝试应用MDCK细胞鉴定流感病毒单抗。方法以制备的流感病毒单克隆抗体做一抗,对感染流感病毒的MDCK细胞进行免疫荧光检测。结果与阴性对照细胞相比,感染病毒的MDCK细胞呈现出明显的绿色荧光。结论 MDCK细胞可以用于流感病毒单克隆抗体的鉴定,具有较好的适用性。
- 张海祥齐宗利齐宗利谢鑫刘扬郭春艳谢鑫
- 关键词：MDCK细胞流感病毒单克隆抗体
- 下一代测序技术在弥漫大B细胞淋巴瘤基因重排检测中的应用被引量：5
- 2019年
- 目的探究下一代测序技术(next generation sequencing,NGS)在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)辅助诊断中的应用价值。方法收集陕西省人民医院病理科存档的20例组织蜡块,其中15例诊断为DLBCL,5例诊断为淋巴组织反应性增生(reactive lymphoid hyperplasia,RLH)。采用天根公司石蜡包埋组织基因组DNA提取试剂盒进行DNA提取,安捷伦4200评价DNA质量。采用LymphoTrack IGH FR2 Assay和LymphoTrack Dx TCRG Assay进行组织克隆性测定。结果5例RLH均为多克隆性,11例DLBCL出现NGS IgH FR2单克隆重排(阳性率73.3%,11/15),另有4例未检测出单克隆性重排(2、5、8、15号)。15例中有3例出现TCRG重排性扩增(6、7、14号)。经PCR凝胶电泳法进行验证:4例NGS检测的IgH FR2多克隆性病例均检测到IgH单克隆性基因重排;3例NGS检测到TCRG单克隆性重排病例中,PCR凝胶电泳法只检测到1例呈TCRG克隆性重排。结论高通量测序方法特异性较高,但由于其检测过程复杂,影响因素较多,检测方法的敏感性受到一定影响。虽然该方法可以准确得到基因重排序列,但由于其检测成本较高,对技术平台和人员要求更高,其在临床上的应用尚需时日。
- 齐宗利郭华郭华房国栋房国栋王李秦李文生
- 关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤基因重排
- His标签单克隆抗体的制备及交叉抗原的表位分析被引量：6
- 2016年
- 目的研究His标签对重组蛋白在疫苗、免疫和致病等方面的影响。方法制备His标签的单克隆抗体(m Ab),通过ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色方法研究其生物学特性、免疫反应特性以及与人体组织的反应性。结果 His标签m Ab和抗原的结合与空间构型有关,多数抗His标签m Ab可以与血红蛋白结合,亦可与人体多种正常组织反应。结论带His标签的重组蛋白进行体内实验时可刺激机体产生抗His标签的抗体,该抗体可与血红蛋白及人体正常组织结合而影响重组蛋白的后期研究。
- 赵向绒张海祥刘杨王鑫王光华齐宗利李元胡军
- 关键词：重组蛋白单克隆抗体空间构型
- EZH2在子宫内膜癌中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的探讨EZH2在子宫内膜癌组织中的表达及其与子宫内膜癌临床病理特征及预后的关系。方法采用原位杂交及免疫组织化学SP法检测正常子宫内膜组织24例、子宫内膜增生组织26例及子宫内膜癌组织48例(包括局限性子宫内膜癌19例、弥漫性子宫内膜癌29例)中EZH2蛋白及EZH2 mRNA的表达。结果 EZH2蛋白及EZH2 mRNA在子宫内膜癌中的阳性率显著高于正常子宫内膜、子宫内膜增生症(P均<0.05)。子宫内膜癌浸润肌层不同深度、有无淋巴转移、不同临床分期、不同大体类型、不同分化程度之间EZH2蛋白及EZH2 mRNA阳性率均有统计学差异(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果表明,EZH2表达只与淋巴转移、临床分级及肌层浸润显著相关(P均<0.05)。结论 EZH2基因的表达与子宫内膜癌的转移、临床分期有关。
- 杜善平齐宗利王亚琴陈丽红唐治国王光华张健
- 关键词：子宫内膜肿瘤子宫内膜增生症EZH2
- 缺氧诱导因子-1α蛋白在外阴癌组织中的表达及临床意义被引量：1
- 2013年
- 目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白在外阴癌组织和外阴上皮内瘤病变组织中的表达,探讨其与临床病理特征和疾病预后的关系。方法:选择手术切除外阴癌组织标本48例,外阴上皮内瘤病变组织14例,正常外阴组织19例。采用免疫组织化学SP法检测上述组织中HIF-1α蛋白的表达情况。结果:HIF-1α在外阴癌中阳性率(58.3%)显著高于正常外阴组织(5.3%)、外阴上皮内瘤变(14.3%),P<0.05。单因素分析表明有淋巴转移组的HIF-1α阳性率(78.6%)显著高于无淋巴转移组(35.3%),P<0.05。Ⅰ-Ⅱ期组的HIF-1α阳性率(47.6%)显著低于Ⅲ-Ⅳ期组(77.8%),P<0.05。中、低分化外阴癌中HIF-1α阳性率(63.0%)高于高分化癌(28.6%),P<0.05。结论:HIF-1α表达与外阴癌的淋巴转移、临床分期等显著相关。
- 杜善平张键段英梅齐宗利唐治国王鑫刘佳红
- 关键词：外阴癌缺氧诱导因子临床病理特征
- 肉及肉制品动物源成分联合检测方法建立及应用被引量：1
- 2017年
- 目的建立肉及肉制品中6种动物源成分的联合检测方法,并对西安市场的肉制品掺假情况进行调查分析。方法设计猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅6种动物源成分的特异性引物,建立实时荧光PCR联合检测方法,对该方法的特异性和灵敏度进行验证,并用此方法检测西安市场上的肉制品。结果本研究建立的肉制品联合检测方法的特异性为100%,灵敏度可达1%,其检测50份样本,与标注成分不符的共有19份,占总样本的38%。结论成功建立了6种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法,可应用于肉和肉制品的掺假检测。
- 孙丽君张海祥舒静孙晶莹郭华齐宗利李元胡军
- 关键词：肉制品掺假
- 非小细胞肺癌组织EGFR/ALK/ROS1基因联合检测的临床意义被引量：11
- 2018年
- 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR),间变性淋巴瘤激酶(ALK)和肉瘤致癌因子-受体酪氨酸激酶(ROS1)三种基因突变联合检测的临床意义。方法收集2017年1月～2018年7月患者NSCLC组织标本146例,采用过柱法提取DNA和RNA,突变检测采用RT-PCR法和扩增阻滞突变系统(ARMS)法。结果EGFR/ALK/ROS1三联检的突变频率为41.8%(61/146),明显高于单基因检测突变率:EGFR (33.6%,49/146),ALK(6.8%,10/146)和ROS1(2.7%,4/146)。EGFR的不同突变类型的检出率如下:19Del 52.9%(27/51),L858R41.2%(21/51),G719X,L861Q5.9%(3/51);其中还检出四例双突变标本:19Del+L858R(1例),19Del+G719X,L861Q(1例),ALK+19Del(1例),ROS1+L858R(1例)。EGFR/ALK/ROS1阳性标本中女性(56.7%,30/53)明显高于男性(33.3%,31/93),两者比较差异有统计学意义(χ~2=7.516,P=0.006),肺腺癌(47.9%,58/121)明显高于鳞癌(4.8%,1/21),差异具有统计学意义(χ~2=13.733,P=0.000)。不同来源组织突变检出率为:手术切除肿瘤组织标本41.0%(32/78),细针穿刺活检及支气管镜刷检细胞学等标本43.4%(23/53),胸腔积液标本40.0%(6/15),三者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在NSCLC基因突变中:EGFR/ALK/ROS1三联检的突变频率明显高于EGFR,ALK和ROS1单基因检测。EGFR常见突变基因为19Ex Del和21Ex L858R。女性突变率明显高于男性。EGFR/ALK/ROS1的联合检测可一次获得更多基因突变信息,为靶向用药提供更多选择,尤其是对于临床稀有标本意义更大。
- 郭华齐宗利张海祥李真真房国栋李文生
- 关键词：间变性淋巴瘤激酶
- 结直肠癌患者循环肿瘤细胞与临床病理特征的关系被引量：5
- 2019年
- 目的:探讨外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)在结直肠癌患者检测中的临床意义。方法:收集陕西省人民医院结直肠癌患者外周血标本57例,良性病变和健康受试者外周血标本29例。应用CyttelTM-CTC平台检测技术(即阴性富集技术结合免疫荧光原位杂交法)检测受试者外周血CTCs,搜集结直肠癌患者临床病理特征,采用统计学方法分析与其外周血CTCs之间的关系。结果:在Cut-off值≥2的结直肠癌患者中CTCs检出率为78.9%(45/57),远高于良性病变及健康受试者中CTCs检出率的6.9%(2/29)(P<0.05)。在Cut-off值≥3的结直肠癌患者中,发生淋巴转移的患者CTCs检出率为62.1%(18/29),高于未发生淋巴转移患者CTCs检出率的32.1%(9/28)(P=0.024)。在Cut-off值≥4的结直肠癌患者中,周围组织侵犯患者CTCs检出率为53.8%(7/13),高于周围组织未侵犯患者CTCs检出率的25.0%(11/44)(P=0.049)。在不同的病理分期中,与癌胚抗原(CEA)检测比较,CTCs检出率均高于CEA检出率。结论:CTC平台检测技术可有效检测结直肠癌患者外周血CTCs,CTCs计数分布与结直肠癌患者的病理分期显著相关,该技术敏感性高,准确性好,对于结直肠癌患者的临床诊断具有重要指导意义。
- 郭华陈琳吴鼎龙刘宗智齐宗利张海祥李文生
- 关键词：循环肿瘤细胞结直肠癌癌胚抗原病理特征
- 溶瘤性腺病毒携带canstatin基因对肺癌A549细胞小鼠移植瘤的抑制作用
- 2015年
- 目的:研究溶瘤性腺病毒介导的canstatin基因表达对A549细胞的抑制作用。方法:将构建的溶瘤性腺病毒载体CRAd-canstatin感染A549细胞。Western blot方法鉴定canstatin基因在A549细胞中的表达;结晶紫染色法和MTT法检测重组病毒体外对细胞的生长抑制作用;将腺病毒注射入荷瘤的裸鼠体内,通过测量肿瘤体积,形态学观察等方法验证CRAd-canstatin对肿瘤的抑制效果。结果:体外结果显示腺病毒介导的canstatin基因在A549细胞中有效表达。体内结果显示相比对照组而言,肿瘤体积明显缩小。结论:初步的实验表明溶瘤性腺病毒介导的CRAd-canstatin基因有望用于肺癌细胞的治疗。
- 李曙东齐宗利田伟冯杨萌王鑫赵向绒封青胡巧侠
- 关键词：CANSTATIN肺癌基因治疗
- 人乳头瘤病毒58型L1/E7“假病毒”疫苗的制备及免疫效果评价被引量：2
- 2018年
- 目的构建人乳头瘤病毒58型L1/E7"假病毒"疫苗,并研究其免疫学特性。方法采用sf9昆虫-杆状病毒表达系统表达HPV58L1蛋白,体外解离重组病毒颗粒,向已经解离的衣壳中加入mE7-pcDNA3.1+质粒,CaCl2室温透析促使病毒样颗粒(VLP)重新聚合,用"假病毒"颗粒滴鼻免疫小鼠,检测小鼠血清IgG,IgA中和抗体以及脾淋巴细胞IFN-γ的分泌水平和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。结果 SDS-PAGE,Western blot和红细胞凝集实验证实sf9昆虫-杆状病毒表达系统有效表达有功能活性的HPV58L1蛋白,HPV58L1蛋白能够有效的折叠、解聚以及再折叠为VLP。小鼠免疫保护实验发现,用包含有mE7-pcDNA3.1^+质粒的HPV58L1"假病毒"免疫小鼠,抗HPV58L1特异性IgG,IgA明显升高(P<0.001),"假病毒"免疫组产生的IFN-γ明显高于VLP免疫组(P<0.001);"假病毒"免疫过的小鼠脾淋巴细胞可以特异性杀伤Tc-1细胞,引起CTL反应。结论成功制备了人乳头瘤病毒58型L1/E7"假病毒"疫苗,能诱发免疫动物较强的体液免疫反应,激发保护性抗体的产生。
- 王亚婷李文生闫小飞齐宗利郭华
- 关键词：病毒样颗粒假病毒细胞毒性T淋巴细胞
