刘明晓
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 慢病毒介导的CRISPR/Cas9敲除TGF-β1基因对鹿茸软骨细胞增殖的影响被引量：1
- 2019年
- 为探究TGF-β1基因在鹿茸快速生长期的作用,利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,设计并构建3条靶向梅花鹿TGF-β1基因第1外显子的gRNA寡核苷酸序列,在人胚肾细胞293T内进行慢病毒包装,通过neo抗性筛选稳转细胞株。提取稳转细胞株总蛋白,经BCA法测定总蛋白质量浓度,Western Blot检测TGF-β1蛋白的相对表达水平;MTT法检测TGF-β1基因敲除对鹿茸软骨细胞体外增殖的影响。结果表明:成功构建了靶向梅花鹿TGF-β1的CRISPR/Cas9基因敲除载体p BOBI-gRNA2。TGF-β1基因的缺失抑制了鹿茸软骨细胞的体外增殖。
- 刘明晓韩香玉刘洪运陈丹阳李月胡薇
- 关键词：转化生长因子Β1慢病毒
- 梅花鹿Smad2与Smad4基因的克隆及其在鹿茸顶端组织的表达被引量：2
- 2019年
- 为了从梅花鹿鹿茸顶端组织中克隆Smad2与Smad4基因的编码区(CDS)序列,分析其分子特性及在鹿茸顶端不同组织中的表达情况,试验采用TRIzol法提取鹿茸顶端组织总RNA,以PCR方法获得Smad2与Smad4基因,并利用生物信息学软件对其进行生物信息学分析,免疫组化法检测Smad2与Smad4基因在鹿茸顶端不同组织中的表达水平。结果表明:Smad2基因完整的CDS序列长度为1 404 bp,编码467个氨基酸,与牛、人、马和猪的Smad2核苷酸序列同源性分别为98.29%、94.52%、95.30%和95.51%;Smad4基因完整的CDS序列长度为1 662 bp,编码553个氨基酸,与牛、人、马和猪的Smad4核苷酸序列同源性分别为98.26%、94.89%、95.85%和95.97%;Smad2与Smad4蛋白的分子质量分别为52.24 ku与60.50 ku,理论等电点分别为6.13与6.50,均具有较强的亲水性;梅花鹿Smad2与Smad4基因在茸皮层、间充质层和软骨层中均有表达,在软骨层中表达水平较高。说明梅花鹿Smad2与Smad4基因在鹿茸软骨层中表达水平较高,对鹿茸再生发育具有一定的调节作用。
- 刘洪运韩香玉刘明晓胡薇
- 关键词：梅花鹿SMAD蛋白免疫组化克隆
- 一种拟南芥AAP1基因的克隆及植物表达载体的构建方法
- 本发明公开了一种拟南芥AAP1基因的克隆及植物表达载体的构建方法，用TRIzol法提取拟南芥幼苗的总RNA，测定OD<Sub>260</Sub>/OD<Sub>280</Sub>比值，为2.014；将PCR产物进行凝胶回...
- 崔喜艳张治安陈展宇刘相国佟珊珊王阔范贝鹿丹刘明晓
- 文献传递
- 梅花鹿成熟型TGF-β1基因的克隆与结构分析及其在鹿茸顶端组织中的表达被引量：4
- 2020年
- 为探究细胞因子对鹿茸再生的影响,提取鹿茸顶端组织总RNA(Trizol法),反转录获得cDNA模板,克隆TGF-β1成熟肽基因。利用生物信息学软件,对其基因序列及蛋白质结构进行分析。结果表明:成功获得梅花鹿TGF-β1成熟肽基因,序列长339 bp,共编码112个氨基酸,蛋白性质稳定,理论分子质量约为12.8 kD。同源性分析结果显示,TGF-β1在进化过程中具有高度保守性,梅花鹿与牛、羊、猪、人、鼠的核苷酸序列同源性均>90%;除鼠外,梅花鹿与其他物种氨基酸序列并未发生变化。免疫组化结果显示,TGF-β1在鹿茸顶端不同组织中差异表达,软骨层中表达水平最高。由此推测,TGF-β1在鹿茸再生过程中可能发挥重要作用。
- 刘明晓韩香玉刘洪运胡薇
- 关键词：梅花鹿转化生长因子Β1基因克隆免疫组化
- 慢病毒介导的CRISPR/Cas9敲除TGF-β1基因及其对鹿茸软骨细胞的影响
- 鹿茸是哺乳动物中极为特殊的骨质器官，它以惊人的生长速度发挥其周期性再生的能力，并且通过割茸创伤的无疤痕愈合，展现了其强大的免疫功能，使之成为各科研领域广为推崇的研究模型。鹿茸的发生与再生是多方面因素的合力所共同实现的，迄...
- 刘明晓
- 关键词：慢病毒介导TGF-Β1基因梅花鹿转化生长因子Β1
- 拟南芥AAP基因家族的生物信息学分析被引量：7
- 2016年
- 氨基酸通透酶（amino acid permease,AAP）是一种跨膜转运蛋白,广泛参与氨基酸的吸收、转运。本研究采用生物信息学方法对拟南芥AAP基因家族8个成员（编号AtAAP1~At AAP8）进行染色体定位、蛋白质理化性质、亚细胞定位、三级结构、跨膜区、基因结构及调控元件等进行分析,为探索AAP基因在拟南芥氨基酸吸收转运中的作用及进一步研究AtAAP基因家族的功能提供理论依据。
- 范贝刘明晓李慧杰张雪王晓梅崔喜艳
- 关键词：拟南芥基因家族生物信息学分析
