张坤
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院蔬菜花卉研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金北京市重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 接头连接介导的PCR扩增马铃薯抗晚疫病基因侧翼序列研究被引量：1
- 2013年
- 利用接头连接介导的PCR技术,以前期NBS profiling试验获得的1条马铃薯抗晚疫病基因片段为基础,设计巢式基因特异性引物,扩增获得两侧序列。结果表明:基因组DNA经DraⅠ酶切后,在已有536bp片段的左侧和右侧均得到序列延伸,右侧扩增得到2301bp,左侧扩增得到820bp,去除边界序列后,向左延伸789bp,向右延伸2273bp,拼接后共长3443bp。采用GENSCAN进行基因预测,发现包含内含子在内的晚疫病抗性基因全长2413bp,在该预测基因的UTR区域设计特异性引物,在马铃薯抗病和感病的基因型中扩增包含完整基因在内的2571bp序列,发现该特异候选基因与晚疫病抗性相连锁。
- 张坤徐建飞段绍光庞万福卞春松刘杰金黎平
- 关键词：马铃薯晚疫病抗病基因
- 不同杀虫剂对烟蓟马的室内毒力与田间防效被引量：11
- 2021年
- 烟蓟马是一种世界性害虫,为筛选出高效低毒的药剂,采用叶管药膜法测定了不同药剂对烟蓟马的室内毒力,并开展了田间防效试验。室内毒力测定结果表明,对成虫活性最高的药剂是阿维菌素、乙基多杀菌素和虫螨腈,其LC_(50)均小于1 mg/L;多杀霉素的毒力也较高,其LC_(50)为2.11 mg/L;吡丙醚对2龄若虫表现较高毒力。田间试验结果表明,2.5%高效氯氟氰菊酯SC、10%虫螨腈SC和60 g/L乙基多杀菌素SC对烟蓟马药后3~14 d的防效均达90%以上,除100 g/L吡丙醚SC外,其他药剂药后14 d的防效均达80%以上。2.5%高效氯氟氰菊酯SC、10%虫螨腈SC和60 g/L乙基多杀菌素SC可作为防治烟蓟马的首选药剂,并交替使用其他药剂。
- 董丽娜华登科郑晓斌张坤袁江江刘廷辉吴青君
- 关键词：烟蓟马毒力测定田间防效
- 西花蓟马GABA受体基因鉴定及FoRDL在多杀霉素抗性中的作用被引量：2
- 2021年
- 【目的】γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)是动物神经系统中一种重要的神经递质。本研究旨在鉴定西花蓟马Frankliniella occidentalisγ-氨基丁酸受体(GABA receptors,GABAR)家族基因,明确离子型受体(GABAAR)在西花蓟马对多杀霉素抗性形成中的作用。【方法】根据西花蓟马基因组和转录组数据,鉴定并克隆GABAR基因,进行生物信息学分析;采用qPCR检测GABAAR亚基基因FoRDL,FoLCCH3和FoGRD在西花蓟马多杀霉素敏感品系不同发育阶段(1-2龄若虫、蛹和成虫)的表达模式及在敏感和抗性品系成虫期的相对表达量差异;对西花蓟马敏感品系3日龄成虫的FoRDL进行RNAi 24 h后,在0.250和0.400 mg/L多杀霉素处理下生物测定计算西花蓟马成虫死亡率。【结果】注释并克隆获得8个GABAR基因:FoRDL,FoLCCH3,FoGRD,FoGRD-like1,FoGRD-like2,FoB1,FoB2和FoB-like(GenBank登录号:MH148151-MH148158),其ORF长度介于1080~3720 bp;系统进化分析表明,西花蓟马的GABAR基因与其他昆虫物种相应基因聚类,具有很高的保守性。GABAAR亚基FoRDL,FoLCCH3和FoGRD具有典型的N端胞外区环结构(loop A-F)和4个跨膜区(TM 1-4);FoRDL外显子3存在互斥剪切。FoRDL,FoLCCH3和FoGRD的表达量随多杀霉素敏感品系西花蓟马发育阶段逐渐升高,成虫期达最高;FoRDL在西花蓟马抗性品系成虫期的表达量显著低于敏感品系成虫期的。对西花蓟马敏感品系的FoRDL进行RNAi后,在0.250和0.400 mg/L多杀霉素处理剂量下,西花蓟马成虫死亡率均显著下降,分别比对照下降了55.80%和43.00%。【结论】在西花蓟马体内鉴定到5个离子型和3个代谢型GABAR基因,其中FoRDL可能在西花蓟马对多杀霉素产生抗性中发挥一定作用。
- 王京何秉青华登科张坤袁江江郑晓斌徐宝云张友军吴青君
- 关键词：西花蓟马Γ-氨基丁酸受体多杀霉素RNA干扰
