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李清华
作品数:
3
被引量:9
H指数:2
供职机构:
泰山医学院附属医院
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发文基金:
泰安市科技发展计划项目
山东省医药卫生科技发展计划项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王克强
泰山医学院附属医院
吴家锋
泰山医学院附属医院
侯彦强
泰山医学院附属医院
魏丽
泰山医学院附属医院
王雅姝
泰山医学院附属医院
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医药卫生
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特异性抑制剂
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作者
3篇
王克强
3篇
李清华
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侯彦强
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吴家锋
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魏丽
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段衍超
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李湘奇
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陈岱韻
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殷殷
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2016
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磷脂酰肌醇3激酶特异性抑制剂LY294002对结核杆菌低分子多肽抗原激活γδT细胞的影响
被引量:5
2015年
目的观察磷脂酰肌醇3激酶(P13K)特异性抑制剂LY294002对CD3单克隆抗体(CD3mAb)活化的T细胞及结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)激活γδT细胞的影响,探讨P13K在CD3mAb活化的T细胞及Mtb-Ag启动的78T细胞TCR途径信号转导中作用。方法分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用CD3mAb、佛波醇酯+离子霉素(PMA+IM)、Mtb-Ag刺激PBMC,采用流式细胞术检测CD3’T细胞和78T细胞0、6、12、24、48h和72h的CD69分子的表达情况。PBMC经LY294002(0、0.4、2、10~tmol/L)处理后再刺激培养,用EIA试剂盒检测CD3mAb和PMA+IM刺激组CD3’T细胞白细胞介素(IL)一2的含量;经CD3PE和CD69FITC、v6PE和CD69FITC双染后,检测LY294002对CD3mAb活化T细胞和Mtb.Ag活化的γδT细胞增殖的影响,并计数培养扩增10d的细胞数量。结果用CD3mAb刺激24hCD3’T细胞和γδT细胞CD69的表达均达高峰(均在56%左右),用PMA+IM刺激6h,均达高峰(均在99%左右),用Mtb-Ag刺激24h,亦均达高峰,但CD3^+T细胞和γδT细胞CD69的表达分别为(16.0±0.0)%和(75.2±0.7)%,3组同时间点CD3^+T细胞CD69的表达之间差异均有统计学意义(均P〈0.05),而78T细胞CD69的表达在PMA+IM刺激组高于CD3mAb刺激组和Mtb-Ag刺激组(均P〈0.05),后两组差异则没有统计学意义(均P〉0.05)。用LY294002终浓度分别为0、0.4、2、10μmol/L处理的样本,CD3mAb刺激组CD3^+T细胞CD69的表达分别为(52.0±0.5)%、(46.3±0.4)%、(33.2±0.4)%和(19.1±0.0)%;Mtb-Ag刺激组78T细胞CD69的表达分别为(66.2±0.6)%、(58.4+0.5)%、(38.1±0.3)%和(19.3±0.1)%。0、0.4、2、10μmol/LLY294002处理CD3+T细胞后,CD3mAb刺激组IL-2的含量分别为(561.1±86.2)、(477.0±75.5)、(280.3±53.9)、(36.0±8.7)ng/L,PMA+IM刺激组为�
王克强
侯彦强
段衍超
陈岱韻
吴家锋
刘晶
王雅姝
李清华
关键词:
T细胞
1-磷脂酰肌醇3-激酶
MAPK/ERK特异性抑制剂对结核杆菌低分子多肽抗原活化γδΤ细胞的影响
被引量:2
2016年
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)特异性抑制剂PD98059对结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)活化γδΤ细胞的影响。方法分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用佛波醇酯+离子霉素(PMA+IM)、MtbAg刺激PBMC,流式细胞术检测处理0、6、12、24、48和72 h后γδΤ细胞CD69的表达。浓度为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入MtbAg(MtbAg组)、PMA+IM(PMA+IM组)处理24 h,流式细胞术检测活化γδΤ细胞CD69的表达;Mtb-Ag组继续培养10 d后收集细胞计数细胞总数、检测γδΤ细胞比例并计算γδΤ细胞的绝对数量。结果使用PMA+IM处理6 h,γδΤ细胞CD69表达达高峰;使用Mtb-Ag处理24 h,γδΤ细胞CD69表达达高峰。处理后同一时点两组γδΤ细胞CD69表达比较,差异均具有统计学意义(均P〈0.05)。使用终浓度分别为0、1、10和100μmol/L的PD98059预处理PBMC后再分别加入Mtb-Ag、PMA+IM处理24 h,流式细胞术检测显示Mtb-Ag组γδΤ细胞CD69表达分别为(79.0±0.8)%、(75.0±0.7)%、(54.0±0.5)%和(17.0±0.2)%,而PMA+IM组γδΤ细胞CD69表达均在98%以上;MtbAg组继续培养10 d后,细胞总数由培养前的1.5x106分别增殖到(10.3±2.5)x106、(9.5±2.1)x106、(5.8±1.8)x106和(2.1±0.5)x106,γδΤ细胞数分别增殖到(6.2±0.9)x106、(5.0±0.8)x106、(2.1±0.5)x106和(0.4±0.1)x106。结论 Mtb-Ag可以通过MAPK/ERK信号转导通路特异性活化γδΤ细胞。
王克强
侯彦强
冉张申
吴家锋
殷殷
魏丽
李清华
李湘奇
关键词:
酶抑制剂
CD69分子在γδΤ细胞中的应用进展
被引量:4
2016年
分化抗原簇69( cluster of differentiation 69,CD69)于1981年被发现,早期又称活化诱导分子(activation inducer molecule,AIM),早期活化抗原-1(early activation antigen-1, EA-1),Leu23和MLR-3,是淋巴细胞活化最早表达的膜表面分子,通常作为T细胞活化标志用于许多研究中[1-3]。CD69可诱导表达在T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、中性和嗜酸性粒细胞、胸腺细胞,构成表达在血小板等、表皮的Langerhans细胞,一部分胸腺髓质细胞、滤泡皮质B细胞和一部分生发中心的T细胞。CD69是一个多向性的免疫调节分子,对多种造血细胞的活化和分化具有重要作用[4]。γδΤ细胞是1986年被确认的一类T细胞的亚群,在成年人外周血中仅占0.5%-5%,主要分布于黏膜和皮下组织,如在人小肠上皮淋巴细胞(intra-epithelial lymphocyte,IEL)中占10%-18%,人大肠IEL中占25%-37%,小鼠IEL中占50%。黏膜和上皮组织是抵抗病原体入侵的第一道防线,也是肿瘤常发生部位,γδΤ细胞在黏膜及上皮组织中的高比例分布,提示γδΤ细胞在抗微生物和寄生虫及肿瘤免疫方面可能起重要作用[5-10]。本文就CD69的分子组成、基因位点、在γδΤ等细胞中的作用及在一些疾病中异常表达的临床意义作一简要的综述。
李清华
魏丽
王克强
关键词:
淋巴细胞活化
CD69
LANGERHANS细胞
LYMPHOCYTE
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