纪锐
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
- 供职机构：复旦大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 深海耐盐杆菌来源酯酶PE8的表达纯化、结晶和晶体X-ray衍射研究（英文）被引量：1
- 2016年
- 从深海耐盐杆菌Pelagibacterium halotolerans B2T中分离鉴定的酯酶PE8隶属于酯酶第六家族.因具有耐盐、较高的热稳定性、高手性选择性,PE8是工业上高效生产手性药物前体(R)-3-(4-氟苯基)戊二酸单甲酯((R)-3-MFG)很有开发潜力的催化剂,但其分子催化机理并不清楚.PE8在大肠杆菌中体外表达,并通过镍柱亲和层析,以及凝胶过滤层析纯化,最终通过悬滴结晶方法获得了PE8蛋白晶体.晶体经过X-ray衍射分析获得1.66的分辨率,属于空间群P21,晶胞参数为a=41.772,b=73.398,c=66.403,β=102.37°.一个异构单元包含2个蛋白分子,溶剂(水)含量为35%.
- 纪锐匡思运霍颖异黄静兰星洋许学伟李继喜
- 关键词：酯酶
- 人源RNA解旋酶DDX1的表达、纯化及结构性质研究
- 2021年
- RNA解旋酶DEAD-box(DDX)蛋白家族是目前已知的最大解旋酶家族,可以解旋RNA或者解离蛋白RNA复合物;其中DDX1蛋白参与多种细胞功能,在mRNA/rRNA加工及衰减、病毒复制及转录、激素代谢以及肿瘤发生发展等各方面发挥着重要作用.但目前有关DDX1如何识别、结合和解旋RNA,如何在各种生理病理过程中发挥功能的分子基础仍然不清楚,其核心功能区的结构尚未解析.本研究成功地在大肠杆菌中重组表达和纯化了人源DDX1蛋白,获得了全长DDX1及多个不同长度截短体(或结构域)蛋白.结合动态光散射(DLS)分析发现DDX1的N端解旋酶ATP结合区结构稳定,状态均一;C末端结构域可能介导与其他蛋白相互作用,具动态变化并容易聚集.X光小角散射实验表明,溶液中DDX1全长蛋白为单体且构象均一.二级结构预测和三维结构模型构建表明DDX1具有经典的DEAD解旋酶家族特征.
- 高宝才段树燕苏晓琴纪锐李继喜
- 关键词：RNA解旋酶动态光散射同源建模
- 人源分子伴侣样蛋白及其表达纯化、晶体结构和应用
- 本发明属于生物技术领域，具体为一种人源分子伴侣样蛋白及其表达纯化、晶体结构和应用。本发明的人源分子伴侣样蛋白Archease由179个氨基酸组成，分子量为20.7kDa；在大肠杆菌表达菌株<I>Bl21(DE3)plus...
- 李继喜段树燕纪锐陈子珺
- 嗜热菌RNA连接酶RTCB在低温催化RNA连接和DNA环化中的应用
- 本发明属于生物技术领域，具体为一种嗜热菌RNA连接酶RTCB在低温催化RNA连接和DNA环化中的应用。本发明包括：在70℃~37℃温度条件下，嗜热RTCB用于完成DNA环化激活反应，用于完成RNA环化的激活反应和RNA连...
- 李继喜段树燕陈子珺李正阳纪锐
- 文献传递
- Thermoplasma volcanium来源β-葡萄糖苷酶的酶学性质分析被引量：1
- 2021年
- β-葡萄糖苷酶(BGL)是催化纤维素产生葡萄糖过程中的关键酶,在生物能源利用和食品领域发挥重要作用.本研究克隆了来源于Thermoplasma volcanium的β-葡萄糖苷酶(BGL)基因,并在大肠杆菌中进行表达,经纯化获得了Tv-BGL.酶学性质分析发现,Tv-BGL在pH6.0和80℃时发挥最佳催化活力,以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(pNPGlu)为底物时的K_(m)和V_(max)分别为0.7254 mmol/L和614.60 U/mg,K_(cat)/K_(m)=7.79×10^(5) mol^(-1)·L·s^(-1),以纤维二糖(Cellobiose)为底物时的K_(m)和V_(max)分别为55.63 mmol/L和636.06 U/mg,Kcat/Km=1.06×10^(4) mol^(-1)·L·s^(-1).另外,该酶具有较好的热稳定性,有机溶剂、离子以及葡萄糖耐受性.
- 刘阳刘阳王丹王丹纪锐顾少华
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶糖苷水解酶热稳定
- 人源分子伴侣样蛋白及其表达纯化、晶体结构和应用
- 本发明属于生物技术领域，具体为一种人源分子伴侣样蛋白及其表达纯化、晶体结构和应用。本发明的人源分子伴侣样蛋白Archease由179个氨基酸组成，分子量为20.7kDa；在大肠杆菌表达菌株<I>Bl21(DE3)plus...
- 李继喜段树燕纪锐陈子珺
- 文献传递
- 人源锌指蛋白ZNF24及其锌指结构域的表达、纯化及DNA结合性质的研究
- 2022年
- 转录因子是调控基因表达的关键蛋白,能够以序列特异性方式结合DNA。ZNF24是Krüppel-like锌指转录因子家族成员之一,在细胞增殖和分化中起重要作用,能促进肝癌细胞的增殖,抑制神经元细胞的分化。ZNF24蛋白N端包含一个SCAN结构域,C端为锌指区,由4个串联的C2H2型锌指结构组成。ZNF24能特异性识别和结合基因的启动子,参与基因的表达调控,但其发挥功能的具体分子机制并不清楚。本文我们在大肠杆菌中成功表达了人源锌指蛋白ZNF24全长和其锌指结构域ZNF24(243~368),ZNF24全长蛋白在溶液中以三聚体形式存在,而锌指结构域在溶液中为单体,表明ZNF24蛋白N端的SCAN结构域能够促进全长蛋白的寡聚化。凝胶迁移实验验证ZNF24全长蛋白和锌指结构域与双链DNA底物结合能力,为进一步研究锌指蛋白ZNF24调控基因表达提供理论基础,相关结果表明SCAN结构域介导的蛋白寡聚可能代表了一种新的转录活性调节机制。
- 苏晓琴高宝才纪锐王森李继喜
- 关键词：锌指蛋白蛋白纯化DNA结合
