朱庆锋
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：广东省农业科学院农业生物基因研究中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 喷雾干燥法制备饲用植酸酶制剂被引量：2
- 2016年
- 以重组植酸酶(phyA-ABCD5F7)的毕赤酵母工程菌为植酸酶生产菌,经高密度发酵制备得到粗酶液。通过在粗酶液中添加Mg^(2+)和Zn^(2+)等金属离子以及海藻糖,可明显提高植酸酶的热耐受能力。以植酸酶的酶活回收率为评价指标,考察了进风温度、出风温度和保护剂对植酸酶酶活回收率的影响,确定最佳喷雾条件:保护剂5 g/L MgSO_4·7H_2O、2 g/L ZnSO_4·7H_2O和10 g/L海藻糖,进风温度为160℃,出风温度为70~75℃,在此条件下,植酸酶的酶活回收率达80%。
- 张琪朱庆锋崔百元孔谦王志林晏石娟
- 关键词：植酸酶喷雾干燥保护剂酶活
- 糖基化影响真菌植酸酶的胰蛋白酶耐受性被引量：2
- 2016年
- 通过重叠聚合酶链式反应,将黑曲霉植酸酶（Aspergillus niger NRRL 3135phytase）第238-337位与第382-444位多肽片段的基因编码序列替换为烟曲霉植酸酶（Aspergillus fumigatus ATCC 13073phytase）中的对应序列,构建片段置换植酸酶（Fragments-replaced phytase）基因.将插入该基因的pGAPZαA重组质粒转化入毕赤酵母.通过离子交换与凝胶过滤纯化,获得重组酵母分泌的活性片段置换植酸酶.与黑曲霉植酸酶相比,片段置换显著提高了片段置换植酸酶的胰蛋白酶耐受性.而通过脱糖基化酶PNGase彻底去除N-糖基化,可恢复片段置换植酸酶对胰蛋白酶的敏感性.上述结果表明烟曲霉植酸酶对应片段上的N-糖基化修饰可显著提高毕赤酵母表达的黑曲霉植酸酶的胰蛋白酶耐受性.
- 朱庆锋王志林崔百元张琪陈庄晏石娟贝锦龙
- 关键词：植酸酶黑曲霉烟曲霉糖基化蛋白酶水解
