常亚飞
- 作品数:6 被引量:25H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 苏云金素高产菌苏云金芽胞杆菌032的育种及发酵工艺优化
- 苏云金素是某些苏云金芽胞杆菌菌株产生并分泌于细胞外的一种热稳定核苷类似物,具有杀虫、杀螨、杀线虫活性,其毒性比多数化学杀虫剂要低,因此它有很大的潜力成为有效杀虫剂。
本文对本实验室保存的103株苏云金芽胞杆菌的...
- 常亚飞
- 关键词:苏云金素芽胞杆菌菌种选育发酵工艺补料发酵
- 文献传递
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒依赖Caspase途径诱导仔猪胸腺细胞凋亡被引量:2
- 2016年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Hu N4株诱导断奶仔猪胸腺细胞凋亡的分子机制,本实验通过免疫荧光技术、流式细胞术、荧光定量PCR和western blot等方法检测HP-PRRSV感染仔猪胸腺内细胞凋亡相关因子Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3表达量的变化。结果显示:HP-PRRSV感染仔猪后,胸腺内表达凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的细胞比例显著升高,并且凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3表达量也明显升高。以上结果表明:HP-PRRSV感染仔猪引起胸腺细胞凋亡是通过Caspase依赖性通路介导。本研究为进一步了解HP-PRRSV感染机制提供了实验依据。
- 张冲赵识非王刚于颖刘永刚常亚飞涂亚斌王淑杰姜成刚蔡雪辉
- 关键词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞凋亡CASPASE-8CASPASE-9CASPASE-3
- 地塞米松对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪的影响被引量:1
- 2015年
- 为研究地塞米松(DEx)对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP—PRRSV)感染仔猪造成的免疫系统和呼吸系统损伤的影响,本实验在断奶仔猪感染HP-PRRSVHuN4株前后,肌肉注射不同剂量的DEX。观察临床症状,检测其免疫系统相关指标的变化。结果显示:不同剂量DEX注射组实验猪均表现典型临床症状,虽然其外周血中的促炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF—d水平降低,CD4+CD8‘T淋巴细胞亚群比例较HuN4单独感染组升高,CD8+CD4-T细胞比例较HuN4单独感染组降低,但DEX注射组仔猪体温始终维持在40℃-42℃,肺部、胸腺和淋巴组织病变加重,死亡率达到100%(10/10),而HuN4单独感染组仔猪死亡率仅为25%(1/4)。表明DEX对HP—PRRSV感染的断奶仔猪虽具有一定的抑制炎症反应作用,但加重了HP-PRRSV感染的不利影响。本研究为全面防控HP—PRRSV提供新的实验依据。
- 佟杰王刚于颖张冲常亚飞刘永刚涂亚斌汤艳东姜成刚王淑杰蔡雪辉
- 关键词:地塞米松促炎性细胞因子
- 带有EGFP的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒的构建
- 2018年
- 为了构建带有绿色荧光蛋白(EGFP)的高致病性猪繁殖与呼吸综合征重组病毒(HP-PRRSV HuN4 EGFP),试验采用分子克隆的方法,将转录调控序列TRS6与EGFP基因克隆至HP-PRRSV HuN4株感染性克隆上,用重组质粒pHP-PRRSV HuN4 EGFP转染Marc-145细胞拯救重组病毒HPPRRSV HuN4 EGFP,将拯救病毒连续传代观察其稳定性。结果表明:HP-PRRSV HuN4 EGFP感染性克隆构建成功;转染后荧光显微镜下可观察到特异性绿色荧光,表明重组病毒拯救成功;将拯救的病毒连续传5代,仍可观察到绿色荧光,表明该重组病毒稳定性良好。说明试验成功构建并拯救出HP-PRRSV HuN4 EGFP。
- 刘天昕陶冶李爱东常亚飞王刚汤艳东刘永刚蔡雪辉
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒拯救分子克隆
- 苏云金素发酵培养基的优化设计被引量:21
- 2006年
- 采用Plackett-Burman设计对出发培养基各种成分影响苏云金芽孢杆菌中华亚种CT43发酵合成苏云金素的效应进行评价,筛选出有显著影响效应的因素为葡萄糖和黄豆饼粉。利用最陡爬坡路径试验逼近最大苏云金素产出区域,找到后续试验中心点。综合中心组合设计和响应面分析法确定显著因素的最佳浓度。优化后培养基组成为(g/L):葡萄糖22.8g、黄豆饼粉32.5g、酵母抽提物3.0g、蛋白胨4.5g、玉米浆3.0g、KH2PO42.0g、MgSO4.7H2O 0.15g、MnSO4.H2O0.02g,苏云金素产量可达3.2g/L,比出发培养基提高2倍以上。
- 常亚飞陈守文喻子牛
- 关键词:苏云金素发酵培养基
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4传代致弱株HuN4-F30感染性克隆的构建及拯救病毒致病性分析被引量:1
- 2016年
- 为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Hu N4株传代致弱株Hu N4-F30感染性克隆,本研究利用高保真DNA聚合酶,分6个片段进行病毒全基因组序列扩增,并通过点突变在其基因组10 808位引入Mlu I作为分子标记。通过重叠延伸PCR在5'端上游引入CMV启动子,3'端引入丁型肝炎病毒(HDV)核酶基因和牛生长素多聚腺苷酸化信号(BGH)。将各片段依次连接克隆于改造的p Belo BAC11载体中,构建含有全长HP-PRRSV致弱株c DNA感染性克隆p Belo BAC11-Hu N4-F30,并将全长质粒直接转染Marc-145细胞拯救出病毒。通过核酸鉴定与测序、分子标记鉴定、间接免疫荧光试验和动物致病性试验等进行鉴定。结果表明,拯救的病毒能够通过Mlu I酶切与亲本鉴别,拯救病毒的间接免疫荧光与亲本病毒一致,拯救病毒表现出低致病性。HP-PRRSV Hu N4-F30感染性克隆的构建与病毒的拯救,为进一步研究HP-PRRSV传代致弱机制奠定了基础。
- 常亚飞刘永刚李爱东陶冶王刚张冲李海蔡雪辉
- 关键词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆