刘彩霞
- 作品数：14 被引量：53H指数：5
- 供职机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胚胎干细胞分化为表皮样细胞的基因表达谱差异被引量：3
- 2012年
- 【目的】用全基因表达谱芯片技术筛选小鼠胚胎干细胞(ESC)定向分化为表皮样细胞(ELC)的差异表达的基因并对其进行分析,以进一步阐明ESC分化为ELC的分子机制。【方法】利用人羊膜建立体外诱导体系,将小鼠ESC诱导定向分化为ELC,做3次生物学重复,分别取未分化的ESC和诱导分化的ELC提取总RNA进行扩增、Cy3标记,与NimbleGen135k小鼠全基因表达谱芯片(含44170个基因)杂交,荧光扫描,筛选出差异表达基因,并进行GO分析和pathway分析,用实时定量PCR对结果进行验证。【结果】芯片筛选结果显示,分化后的ELC与ESC间的差异表达的基因多达4856个(Cut off:2)。基因本体(GO)分析显示与生物学过程相关的差异表达基因最多的是细胞过程,1931个;与亚细胞组分(CC)相关的差基因中最多的是细胞和细胞组分相关基因,2391个;与分子功能相关的差异基因中最多是的结合功能(binding)基因,1869个。Pathway分析显示,与DNA复制通路相关的差异基因有23个;与蛋白酶体通路相关的24个;剪接体通路相关有47个;细胞周期相关的有44个。【结论】ESC体外诱导定向分化为ELC过程中,基因表达谱发生了巨大的变化,提示细胞分化是一个众多基因参与的复杂的生物学过程,这些基因在分化过程所起的作用和作用机制尚需大量的实验研究阐明。
- 张仁礼刘彩霞孟锦绣闻安民张丽丽韩冬
- 关键词：胚胎干细胞
- 多囊卵巢综合征患者子宫内膜INSR基因mRNA表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovariansyndrome,PCOS)患者INSR基因外显子mRNA的表达及意义。方法:根据有无胰岛素抵抗(insulin resistence,IR)把35例PCOS患者分为IR组17例和NIR组18例。统计两组患者年龄、月经周期、身高、体重、腰围和臀围,计算体质指数(BMI)和腰臀比(WHR)。取子宫内膜组织用荧光定量RT-PCR检测INSR mRNA的表达,并进行统计分析。结果:两组患者年龄、月经周期和身高无统计学差异(P>0.05)。IR组体重、腰围、臀围、BMI和WHR显著高于NIR组。NIR组INSR mRNA的表达值是0.158±0.190,低于IR组的表达值0.113±0.161,两组比较差异无统计学意义(P=0.446)。结论:PCOS患者子宫内膜有INSR mRNA表达,是胰岛素作用的靶器官。IR有降低PCOS子宫内膜INSR mRNA表达的趋势。
- 林芸梁洁玲刘彩霞闻安民张仁礼陈玉
- 关键词：多囊卵巢综合征胰岛素受体子宫内膜
- 胚胎干细胞分化为表皮样细胞基因启动子区差异甲基化的研究被引量：2
- 2013年
- 目的:用全基因组甲基化芯片探讨可能参与小鼠胚胎干细胞(ESCs)分化为表皮样细胞(ELCs)的基因DNA甲基化调控机制。方法:利用人羊膜建立体外诱导体系,将小鼠ESCs诱导定向分化为ELCs,分别取未分化的ESCs和诱导分化后的ELCs进行芯片分析,利用甲基化免疫共沉淀技术将每组染色质DNA的甲基化片段共沉淀下来,和本底对照(input)分别标记Cy3和Cy5荧光,一同上样于Roche NimbleGen高密度(2.1M,芯片覆盖22 425个启动子)甲基化芯片,启动子区采用UCSC数据库进行注释,启动子覆盖转录起始位点上游8 200 bp、下游3 000 bp,通过对这些启动子区甲基化谱的分析,筛选出甲基化调控可能与ESCs向ELCs定向分化相关的基因。结果:小鼠ESCs和ELCs两组细胞在基因组水平上有17 500个启动子存在甲基化,其中有3 435个启动子发生甲基化差异变化,高CpG岛的启动子有894个发生差异甲基化,中度CpG岛的启动子有974个发生差异甲基化,低CpG岛的启动子有1 567个发生差异甲基化。结论:在ESCs向ELCs定向分化的过程中,众多的基因启动子区发生了甲基化程度的变化,说明细胞分化是一个复杂的表观遗传学事件。这些基因启动子的差异甲基化在ESCs向ELCs定向分化过程中所起的作用及其机制尚有待进一步的功能学研究阐明。
- 张仁礼刘彩霞孟锦绣张丽丽韩冬蔡佳杰闻安民
- 关键词：DNA甲基化胚胎干细胞启动子
- 卵巢早衰42例临床观察被引量：8
- 2009年
- 目的:了解卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)患者的临床特点及治疗现状,以指导临床对POF的诊治。方法:回顾性分析2002年1月至2008年1月在广东省人民医院妇科确诊的42例POF患者的临床资料,并对治疗1年前后的实验室数据进行比较。结果:42例POF患者常见病因依次是特发性11例(26.19%)、系统性红斑狼疮5例(11.90%)、卵巢手术史4例(9.52%)。规范化的激素替代治疗1年后黄体生成素明显下降,雌二醇明显上升,差异有显著性。血甘油三酯上升超过正常值,差异无统计学意义。8例>35岁POF患者骨密度测定均为低骨量和骨质疏松。31例患者有生育要求,5例治疗期间自然妊娠。结论:自身免疫因素在POF的发病中占一定比例,但大部分POF为原因不明。POF患者应进行长期的激素替代治疗,在治疗期间有自然受孕可能,推荐有生育要求的患者使用雌孕天然激素。
- 林芸彭幼玲闻安民刘彩霞
- 关键词：卵巢功能早衰激素替代治疗系统性红斑狼疮
- 一种防止堵塞的新型胚胎移植管组件
- 本实用新型公开了一种防止堵塞的新型胚胎移植管组件，包括内管、外管和管芯，所述管芯的前端设有膨大部，所述膨大部为软质的球形结构，且所述膨大部的直径略大于所述外管的内径。本实用新型的胚胎移植管组件中，在外管中配备一条管芯，管...
- 张仁礼孟锦绣凌家炜张芯月刘彩霞韩冬
- 文献传递
- DNA甲基转移酶1、3a和3b在多囊卵巢综合征患者子宫内膜的表达被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者子宫内膜DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3a和DNMT3b表达的意义。方法:收集PCOS妇女35例。根据有无胰岛素抵抗(insulin resistence,IR)分为IR组17例和非IR组18例。选择10例非PCOS妇女为对照组。测量人体身高、体重、腰围和臀围,计算体质量指数和腰臀比。测定血清睾酮、黄体生成素、卵泡刺激素、雌二醇、催乳素、空腹胰岛素和空腹血糖。取子宫内膜组织采用免疫印迹(Western Blot)方法测定DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的蛋白表达。结果:PCOS-IR组、PCOS-NIR组和非PCOS组DNMTl的免疫印迹相对表达量分别是0.172±0.127,0.165±0.195和0.097±0.074;DNMT3a的免疫印迹相对表达量分别是0.054±0.071,0.058±0.118和0.041±0.087;DNMT3b的免疫印迹相对表达量分别是0.766±0.603,0.408±0.395和0.291±0.218。PCOS-IR组和PCOS-NIR组,PCOS-IR组和非PCOS,PCOS-NIR组和非PCOS组子宫内膜的DNMTl、DNMT3a免疫印迹相对表达量相比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。PCOS-IR组子宫内膜DNMT3b免疫印迹相对表达量高于PCOS-NIR组,差异有统计学意义(P<0.05);PCOS-IR组子宫内膜DNMT3b免疫印迹相对表达量显著高于非PCOS组,差异有统计学意义(P<0.05);PCOS-NIR组和非PCOS之间的DNMT3b免疫印迹相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DNMT3b在子宫内膜癌等多种肿瘤早期表达升高,提示有IR的PCOS患者有发生子宫内膜癌的表观遗传学发病基础。
- 林芸梁洁玲刘彩霞闻安民陈玉
- 关键词：多囊卵巢综合征DNA甲基转移酶子宫内膜
- 彗星分析法研究靶向SMPD1的siRNA对小鼠卵母细胞凋亡的保护作用
- 2009年
- 目的建立彗星分析小鼠卵母细胞凋亡的模型,研究靶向酸性鞘磷酯酶1(SMPD1)的siRNA对卵子自发性凋亡的保护作用,为建立新的生殖保护方法奠定基础。方法通过同源性分析并结合siRNA设计软件设计并化学合成靶向SMPD1的3条siRNA,用超排卵技术对雌性BALB/c小鼠进行超排卵并杀鼠取卵,利用显微注射的方法将siRNA分别导入超排获得的小鼠卵子,分别于48h和72h观察卵子形态学变化,通过彗星分析检测卵细胞DNA破坏程度来分析卵子自发性凋亡情况。结果彗星分析法观察到小鼠卵母细胞在体外培养24h可见少量DNA泳出,48h可见大量DNA泳出;通过显微注射导入siRNA48h后的彗星分析结果显示,其中1对siRNA注射组,即siRNA003组的卵母细胞泳出量与其它2个siRNA注射组及对照组相比显著降低(P<0.01),其它2对siRNA注射组与对照组无明显差异。结论靶向SMPD1的siRNA能够有效保护卵子的自发性凋亡,有望成为新的生殖保护方法。
- 张仁礼孟锦绣闻安民黄跃深周灿权王凯贾磊刘彩霞邓新燕陈系古
- 关键词：卵母细胞RNA干扰彗星分析法
- 一种防止堵塞的胚胎移植管
- 本实用新型公开了一种防止堵塞的胚胎移植管，包括胚胎移植管本体，所述胚胎移植管本体包括外管和内管，所述外管的前端开口上设置至少一片呈弧面状的活瓣，所述活瓣组成一个半球面罩对外管的前端开口进行封盖，同时，活瓣在外管的前端开口...
- 张仁礼孟锦绣张芯月刘彩霞韩冬
- 文献传递
- 影响宫腔内人工授精妊娠率的相关因素分析被引量：15
- 2015年
- 【目的】探讨丈夫精子宫腔内人工授精(IUI)妊娠率的相关影响因素。【方法】回顾性分析不育不孕患者共1 382个IUI治疗周期,对处理后前向运动(PR)精子数、女方年龄、优势卵泡数、治疗方案、病因等因素与临床妊娠率的关系进行统计分析。【结果】1 382个IUI周期共获得167例临床妊娠,总周期妊娠率是12.1%。1PR精子数对妊娠率影响不大(P>0.05);2女性年龄超过40岁,妊娠率下降;32和3个优势卵泡妊娠率高于1个卵泡(P=0.001);4促排卵周期妊娠率高于自然周期(P=0.004),各促排卵方案之间差异无统计学意义;5排卵障碍患者的妊娠率最高为20.9%,与其他组间差异有统计学意义(P=0.001)。【结论】人工授精更适合于有排卵障碍的年轻患者。
- 刘彩霞闻安民张仁礼韩冬周艳
- 关键词：宫腔内人工授精妊娠率女性年龄
- RNA干扰沉默酸性鞘磷脂酶1基因对人成纤维细胞凋亡的影响
- 2009年
- 目的为研发保护女性生殖细胞的小分子干扰RNA(siRNA)类药物,以人包皮成纤维细胞(HFF)为模型,检测靶向凋亡关键基因酸性鞘磷脂酶1(SMPD1)基因的siRNA对HFF凋亡的抑制作用。方法设计合成三对靶向SMPD1基因的siRNA并体外转染HFF细胞,转染后48 h用丝裂霉素(MMC)诱导细胞凋亡。荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Q-RT-PCR)法及免疫印迹(Western blot)检测siRNA转染后SMPD1在mRNA水平和蛋白水平的变化,Annexin Ⅴ -PI双染检测细胞凋亡率。用脂质体(lipofectamine 2000)和无干扰siRNA(NT siRNA)作为对照。结果 siRNA1、 2 、 3对SMPD1基因mRNA的抑制效率分别为(67. 0±9.0)%、0%、(45.0±2.1)%,以siRNA1最高,蛋白水平的抑制也呈现相同变化。siRNA1组细胞凋亡率为15.2%,明显低于 MMC组(26. 3%)。结论靶向SMPD1的siRNA可以抑制人包皮成纤维细胞凋亡。
- 高军马芸张仁礼刘彩霞周灿权
- 关键词：RNA干扰小分子干扰RNA卵巢衰竭
