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野生型和突变型GDF5蛋白表达及亚细胞定位的研究: 2012年; 目的研究人生长分化因子5基因(GDF5)c.1118T>G(p.L373R)突变对GDF5蛋白在HEK-293细胞系表达及其亚细胞定位的影响。方法构建pDsRed1-N1-GDF5-WT和pDsRed1-N1-GDF5-L373R载体,分别转染HEK-293细胞,细胞培养72h后通过荧光显微镜观察比较野生型和突变型GDF5蛋白荧光分布情况。结果 GDF5蛋白在HEK-293细胞中成功表达,在荧光显微镜下观察到转染野生型和突变型GDF5的细胞胞浆均匀发出红色荧光,而空载体组的红色荧光则弥散于全细胞,荧光强度均匀一致。结论野生型和突变型GDF5蛋白均定位于HEK-293细胞质。; 刘杏王述森刘琦高锦兰罗阳; 关键词：生长分化因子5 蛋白表达

GDF5-L373R突变导致指(趾)骨间关节粘连的作用机制研究: 生长分化因子5（Growth differentiation factor5，GDF5）又称软骨形态发生蛋白-1（cartilage-derived morphogenetic protein-1，CDMP-1）或骨形态...; 刘杏; 关键词：生长分化因子5 基因突变前体蛋白; 文献传递

DOC-1R基因重组表达载体构建及其在HeLa细胞中的表达被引量：1: 2012年; 目的构建人DOC-1R基因重组逆转录病毒表达载体,实现该基因在体外培养细胞中的大量表达,从而研究表达蛋白的功能。方法通过重组技术将含有FLAG标签序列的DOC-1R cDNA编码区全长克隆至逆转录病毒载体pLXSN,菌落PCR鉴定、限制性内切酶双酶切及测序验证重组载体的构建。将重组载体转染至GP-293细胞进行病毒包装并以所包装的病毒感染HeLa细胞,通过Western blot及间接免疫荧光染色检测重组DOC-1R蛋白的表达及细胞内定位。结果测序结果表明重组载体中插入的重组片段序列及开放阅读框架正确,逆转录病毒表达载体pLXSN-FLAG-DOC-1R成功构建。Western blot及间接免疫荧光染色结果证实,逆转录病毒介导的重组DOC-1R蛋白在HeLa细胞中高效表达,表达效率明显高于真核表达载体介导的重组蛋白表达。结论 DOC-1R基因逆转录病毒表达载体成功构建,重组蛋白在体外培养细胞正确高效表达。; 刘琦刘杏高锦兰胡西华罗阳; 关键词：DOC-1R 转染

DOC-1R基因表达载体的构建及其重组蛋白的表达纯化被引量：1: 2009年; 目的构建DOC-1R（deleted in oral cancer-1related）的原核表达载体并且纯化其重组蛋白，用于进-步研究DOC-1R蛋白的结构与功能。方法采用基因重组技术构建原核表达载体pGEX—DOC-1R，经DNA测序鉴定后，转化E．coliB[21，IFFG诱导表达并纯化融合蛋白。结果以菌落PCR及限制性内切酶酶切鉴定得到候选阳性克隆，测序结果表明所得到的克隆序列及开放阅读框架完全正确，IPTG诱导后SDS—PAGE电泳分析表明在40kD处出现特征蛋白表达带，经磁珠亲合层析后Western印迹检测证实得到较高纯度的GST—p14 DOC-1R融合蛋白。结论成功构建了pGEX—DOC-1R的原核表达载体，表达并纯化出GST—p14 DOC-1R融合蛋白，为DOC，1R抗体制备及研究DOC-1R蛋白结合蛋白及其在细胞周期调控中的生物学功能奠定了基础。; 刘杏刘琦王述森高锦兰罗阳; 关键词：DOC-1R 基因表达基因克隆融合蛋白

周期素G2抑制Wnt/β-catenin信号通路的作用机制研究: 周期素G2具有抑制细胞周期进程的作用，其表达水平能够被DNA损伤药物放线菌素D和抗肿瘤药物海鞘素诱导升高，提示周期素G2的作用不同于传统的细胞周期蛋白，而是细胞周期和细胞增殖的负性调控因子。本课题组前期报道了周期素G2过...; 高锦兰罗阳刘琦刘杏王述森; 关键词：WNT/Β-CATENIN信号通路细胞周期

GDF5-L373R突变导致SYM1的致病机制研究: 目的近端指/趾骨间关节粘连(proximal symphalangism,SYM1,OMIM：185800)为常染色体显性遗传病,表现为近端指/趾骨间关节强直、粘连,包括腕骨与跗骨的融合,近节指骨关节不能曲伸或曲伸受限...; 刘杏张欣馨曲胜强刘琦罗阳; 关键词：基因突变; 文献传递

DOC-1R蛋白对细胞周期调控作用的研究: ＜正＞DOC-1R（Deleted in oral cancer-1 related,DOC-1 related）是近年发现的候选抑癌基因,已有文献预测DOC-1R蛋白具有细胞周期素依赖性蛋白激酶（cyclin-depe...; 刘琦罗阳王述森刘杏高锦兰; 关键词：DOC-1R CDK2 细胞周期; 文献传递

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刘杏